淡竹葉黃酮對大鼠心肌缺血-再灌注損傷作用研究

汪新亮

(湖北科技學院 藥學院，湖北 咸寧 437100)

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淡竹葉黃酮對大鼠心肌缺血-再灌注損傷作用研究

汪新亮

(湖北科技學院 藥學院，湖北 咸寧 437100)

目的：探討淡竹葉黃酮對大鼠心肌缺血-再灌注損傷模型的機制作用。方法：將30只SD級大鼠隨機分為竹葉黃酮組、假手術組及缺血再灌注組，各10只；竹葉黃酮組小鼠注射淡竹葉黃酮，缺血再灌注組及假手術組小鼠注射等分量生理鹽水，連續1周，末次冠脈結扎手術前2h給予SD大鼠腹腔注射給藥，左冠狀動脈前降支中上1/3處作為SD大鼠結扎部位，結扎手術完成后1h剪開結扎線，用止血鉗將大鼠胸腔夾閉，再灌注2h。檢測所有小鼠CK水平和血清LDH，采用TTC染色法對心肌梗死面積進行測定，檢測心肌組織中MDA(丙二醛)、SOD(超氧化物歧化酶)的含量。結果：與缺血再灌注組和假手術組比較，淡竹葉黃酮組小鼠的SOD超氧化物歧化酶活性明顯增強，心肌梗死面積顯著減小，SD大鼠丙二醛及血清LDH和CK含量明顯下降。結論：淡竹葉黃酮對大鼠心肌缺血-再灌注損傷有一定保護作用，其機制可能與增強心肌抗氧化能力及穩定心肌細胞定位和增加超氧化物歧化酶活性有關。

淡竹葉黃酮；心肌缺血-再灌注損傷；作用；機制

隨著我國科學技術的不斷進步，臨床醫療水平不斷提升，冠狀動脈再通術的先進醫學療法在臨床中應用逐漸成熟，如冠狀動脈旁路移植術、冠狀動脈介入術及藥物溶栓術等，能對缺血受損心肌進行及時再通，大大降低現階段急性心血管不良事件的病死率及致殘率，為急性心血管疾病患者帶來新的曙光。早期再灌注治療缺血心肌疾病能夠將梗死面積降至最小，還能夠令缺血心肌再次恢復生機，在實際治療過程中，冠狀動脈閉塞一定時間再進行灌注會給患者心肌細胞造成一定損傷，心肌梗死后4h對血管進行再通難以收獲到預期的效果，還加快心肌細胞的死亡速率。目前，隨著心細血管分子生物學研究的深入，已逐步證實心肌細胞凋亡與心肌缺血再灌注有著密切關系，細胞凋亡現象存在于缺血再灌注損傷過程，進而導致不可逆轉性細胞凋亡速度加快，且缺血再灌注損傷的持續時間長短直接影響心肌細胞凋亡數量。冠狀動脈再通嚴重并發癥為心肌缺血再灌注損傷，在心肌缺血再灌注過程中易導致再灌注性心律失常、冠狀動脈無復流及心肌頓抑和心肌細胞死亡等形式的心肌損傷性改變[1]。

1 實驗部分

1.1 材料

1.1.1 動物 SD大鼠50只(除試驗用30只，20只備用)，雄性，體重285～355g，由相關機構實驗動物中心提供。

1.1.2 試劑與藥品 TTC(氯化三苯基四氮唑)；含90.3%的淡竹葉黃酮，采用生理鹽水進行稀釋；超氧化物歧化酶活性(SOD)試劑盒，丙二醛(MDA)試劑盒，血清LDH測試盒，CK測試盒，考馬斯亮蘭蛋白試劑盒。

1.2 入選標準

1.2.1 選取標準 SD大鼠基本健康條件符合實驗標準且得到科學證實，對研究SD大鼠進行相關傳染疾病測試；大鼠精神狀態良好，具有足夠活動能力，能正常進食，且大鼠生命強弱程度及其他標準具有統一性[2]。

1.2.2 排除標準 基本健康條件不符合實驗標準，具有微型或中型甚至重型傳染疾病，體重較其他SD大鼠超重，生命跡象微弱。

1.3 操作方法

1.3.1 分組 將30只SD級大鼠隨機分為竹葉黃酮組、假手術組及缺血再灌注組，各10只。竹葉黃酮組SD大鼠注射30mg·kg-1·d-1的淡竹葉黃酮，缺血再灌注組及假手術組SD大鼠注射30mg·kg-1·d-1的生理鹽水，連續1周。在末次冠脈結扎手術前2h給予SD大鼠腹腔注射給藥。

1.3.2 制備大鼠心肌梗死模型 對SD大鼠腹腔注射10%的水合氨醛麻醉劑(0.3mL/100g)，在無菌條件下切開氣管且插管，采用專用動物呼吸機對其進行呼吸，維持頻率60次/min，潮氣量3mL。

1.3.3 結扎 對大鼠胸部去毛且消毒，在左冠狀動脈前降支中上1/3處作為SD大鼠結扎部位，切開皮膚2cm，在第四第五助鈍性分離肌層，將胸腔打開，剪開SD大鼠心包，輕壓右側胸腔，將心臟擠出，在預定位置進行結扎，若左心室出現室壁變白現象，則說明結扎成功[3]。

1.3.4 術后處理 結扎手術完成后1h剪開結扎線，用止血鉗將大鼠胸腔夾閉，再灌注2h，檢測CK水平和血清LDH，采用TTC染色法對心肌梗死面積進行測定，檢測心肌組織中MDA(丙二醛)、SOD(超氧化物歧化酶)的含量。

2 結果

測試數據顯示：與缺血再灌注組和假手術組比較，淡竹葉黃酮組小鼠的SOD超氧化物歧化酶活性明顯增高，SD大鼠丙二醛及血清LDH和CK含量明顯下降[4]。見圖1。

圖1 各組小鼠生化指標比較

3 討論

實驗結果表明：淡竹葉黃酮對大鼠心肌缺血-再灌注損傷有一定保護作用，其機制可能與增強心肌抗氧化能力及穩定心肌細胞定位和增加超氧化物歧化酶活性有關。因此，實驗明確淡竹葉黃酮對抑制心肌缺血再灌注損傷細胞凋亡的作用機理，為預防治療冠心病、改善再灌注損傷心肌功能提供相應具體數據，在一定程度上有助于降低臨床死亡率及致殘率，進而提高患者的生活質量，但具體淡竹葉黃酮對人體心肌血管疾病的作用機制，還需臨床進一步研究。

[1] 邵瑩,吳啟南,周婧,等.淡竹葉黃酮對大鼠心肌缺血/再灌注損傷的保護作用[J].中國藥理學通報,2013(2):241-247.

[2] 王健.冠心舒通膠囊對大鼠心肌缺血再灌注損傷細胞凋亡影響的實驗研究[J].遼寧中醫藥大學,2013(1):201-206.

[3] 楊明,朱姝,隋殿軍,等.蜂膠總黃酮對大鼠心肌缺血-再灌注損傷誘導細胞凋亡的影響[J].中國藥理學通報,2011(5):551-554.

[4] 李慶林,王成永,彭代銀,等.黃蜀葵花總黃酮對心肌缺血再灌注損傷的保護作用研究[J].中國實驗方劑學雜志,2012(2):39-42.

(責任編輯：李嵐春)

2014-11-26

汪新亮(1976-)，男，湖北科技學院講師，研究方向為中藥化學。

R285.5

A

1673-2197(2015)06-0029-02

10.11954/ytctyy.201506012