竹節參總皂苷對Triton WR-1339誘發的高脂血癥小鼠降血脂作用研究

賈銀芝，楊中林

(中國藥科大學 天然藥物活性物質與功能國家重點實驗室，江蘇 南京 210009)

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竹節參總皂苷對Triton WR-1339誘發的高脂血癥小鼠降血脂作用研究

賈銀芝，楊中林*

(中國藥科大學 天然藥物活性物質與功能國家重點實驗室，江蘇 南京 210009)

目的：研究竹節參總皂苷的降血脂作用。方法：采用Triton WR-1339誘發急性高脂血癥小鼠模型，將66只雄性小鼠隨機分為空白組、模型組、非諾貝特組、竹節參總皂苷低劑量組、竹節參總皂苷中劑量組、竹節參總皂苷高劑量組，每組11只。觀察竹節參總皂苷對各組小鼠血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平的影響。結果：與模型組比較，非諾貝特組可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)；竹節參總皂苷低劑量組(100mg/kg)可降低小鼠血清TC水平(P<0.05)，顯著降低小鼠血清TG水平(P<0.01)；竹節參總皂苷中劑量組(200mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG水平(P<0.01)，降低小鼠血清LDL-C水平(P<0.05)；竹節參總皂苷高劑量組(400mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)。結論：竹節參總皂苷具有一定的降血脂作用，且呈劑量依賴性。

高脂血癥；小鼠；竹節參總皂苷；Triton WR-1339

近年來，心腦血管疾病已成為威脅人類健康的主要殺手，高脂血癥是引起心腦血管疾病的主要因素[1]。開發安全、有效且多靶點作用的降血脂藥物已成為全球研究熱點，中草藥安全、價廉、來源廣，可以發揮多途徑、多靶點作用，在降血脂方面具有得天獨厚的優勢[2]。

1 實驗材料

1.1 試劑與試藥

竹節參總皂苷(實驗室試樣品，批號：20131204)；非諾貝特膠囊(法國利博福尼制藥公司，批號：21264)；總膽固醇測定試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司)；甘油三酯測定試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司)；低密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒(南京建成生物工程研究所)；Triton WR-1339(美國 Sigma-Aldrich 公司)。

1.2 儀器

電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統有限公司)；80-2型低速離心機(江蘇金壇市金城國盛實驗儀器廠)；HH-6數顯恒溫水浴鍋(國華電器有限公司)；KQ-250E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；Epoch型酶標儀(美國BioTek)。

1.3 動物

KM小鼠66只，SPF級，雄性，體重18～22g，購自上海杰思捷實驗動物有限公司。

2 實驗方法

2.1 實驗樣品液配制

2.1.1 造模劑配制 將Triton WR-1339溶于生理鹽水配成濃度為40mg/mL的藥劑，給藥體積為10mL/kg，給藥劑量為400mg/kg。

2.1.2 非諾貝特混懸液配制 精密稱取非諾貝特膠囊內容物150mg，置于100mL鹽水瓶中，加100mL0.5%CMC-Na溶液，超聲處理，即得濃度為1.5mg/mL的非諾貝特混懸液，于4℃保存。

2.1.3 竹節參總皂苷藥液配制 竹節參總皂苷低劑量組：精密稱取0.5g竹節參總皂苷粉末于100mL鹽水瓶中，加100mL0.5%CMC-Na溶液，超聲處理，即得濃度為5mg/mL的竹節參總皂苷藥液，于4℃保存。

竹節參總皂苷中劑量組：精密稱取1g竹節參總皂苷粉末于100mL鹽水瓶中，加100mL0.5%CMC-Na溶液，超聲處理，即得濃度為10mg/mL的竹節參總皂苷藥液，于4℃保存。

竹節參總皂苷高劑量組：精密稱取2g竹節參總皂苷粉末于100mL鹽水瓶中，加100mL0.5%CMC-Na溶液，超聲處理，即得濃度為20mg/mL的竹節參總皂苷藥液，于4℃保存。

2.2 給藥造模

昆明種雄性小鼠66只，適應性飼養3天。將小鼠隨機分為空白組、模型組、非諾貝特組、竹節參總皂苷低劑量組、竹節參總皂苷中劑量組、竹節參總皂苷高劑量組，每組11只。空白組和模型組小鼠每天灌胃給予0.5%CMC-Na溶液(給藥體積均為20mL/kg)；給藥組小鼠每天灌胃給予藥物，給藥劑量分別為：非諾貝特組30mg/kg，竹節參總皂苷低劑量組100mg/kg，竹節參總皂苷中劑量組200mg/kg，竹節參總皂苷高劑量組400mg/kg，給藥體積均為20mL/kg，連續給藥7天。

末次給藥前16h，空白組小鼠腹腔注射生理鹽水(給藥體積為10mL/kg)，其余各組小鼠腹腔注射Triton WR-1339，給藥劑量為400mg/kg，給藥體積為10mL/kg。末次給藥1h后，眼眶取血，靜置1h，離心分離血清，測定血清中TC、TG、LDL-C水平。

2.3 統計學分析

3 實驗結果

實驗結果表明，與空白組比較，模型組血清TC、TG、LDL-C水平明顯升高，且差異具有顯著統計學意義(P<0.01)，顯示急性高脂血癥小鼠模型成功；與模型組比較，非諾貝特組可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)；竹節參總皂苷低劑量組(100mg/kg)可降低小鼠血清TC水平(P<0.05)，顯著降低小鼠血清TG水平(P<0.01)；竹節參總皂苷中劑量組(200mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG水平(P<0.01)，降低小鼠血清LDL-C水平(P<0.05)；竹節參總皂苷高劑量組(400mg/kg)可顯著降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)。各組小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平測定結果見表1。

表1 各組小鼠血清TC、TG、LDL-C測定結果

組別TCTGLDL-C空白組(n=11)3.94±0.554.02±1.071.04±0.37模型組(n=11)10.08±1.41△△57.91±7.75△△4.44±1.18△△非諾貝特組(n=11)4.32±0.56**32.12±7.50**1.99±0.56**竹節參總皂苷低劑量組(n=11)8.50±1.97*40.53±10.79**4.37±0.75竹節參總皂苷中劑量組(n=11)5.88±2.55**38.71±7.67**3.22±1.35*竹節參總皂苷高劑量組(n=11)5.06±1.85**33.65±9.02**2.07±0.67**

注：與空白組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

4 討論

本實驗采用腹腔注射Triton WR-1339誘發高脂血癥小鼠模型，該模型屬于內源性升高血脂，原理為Triton WR-1339可抑制極低密度脂蛋白(VLDL)與其他脂蛋白交換而富集在血漿中，同時抑制脂蛋白脂肪酶(LPL)活性，造成血清TC、TG值升高[6]。實驗結果顯示，與空白組比較，模型組可顯著提高小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.01)，表明急性高脂血癥模型成功。

本實驗采用陽性藥為非諾貝特(貝特類降脂藥)，該類藥物是目前降TG最有效藥物之一，是一類人工合成的過氧化物酶體增生激活受體α(PPARα)配體，通過激活PPAR-α，誘導LPL表達，增強LPL活性，促進血漿中富含TG脂蛋白的TG水解，從而降低TG；同時也具有降低TC、LDL-C作用[7]。

根據實驗結果得出結論，竹節參總皂苷可顯著降低急性高脂血癥小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平，表明其具有一定的降血脂作用，且呈劑量依賴性，高劑量組降脂作用與陽性藥非諾貝特相當。長期服用貝特類藥物會引起消化不良、肌毒性等不良反應[8]，關于竹節參總皂苷的不良反應未見報道。因此，將竹節參總皂苷開發成安全有效的降脂藥物具有極大潛力和發展空間。

[1] JAIN KS,KATHIRAVAN MK,SOMANI RS,et al. The biology and chemistry of hyperlipidemia[J]. Bioorg Med Chem,2007,15(14): 4674-4699.

[2] 王海勇,王林. 降血脂藥物的研究進展[J]. 國外醫學·藥學分冊,2004,31(3): 160-166.

[3] 歐陽麗娜,向大位,吳雪,等. 竹節參化學成分及藥理活性研究進展[J]. 中草藥,2010,41(6): 1023-1027.

[4] 左銳,袁丁. 竹節參化學成分和藥理活性研究進展[J]. 時珍國醫國藥,2005,16(9): 838-839.

[5] 翟羽佳,陳邦添,李善兵,等. Triton WR-1339誘發小鼠高脂血癥模型的研究[J]. 中國藥理學通報,2011,27(8): 1178-1179.

[6] LEVINE S,SALTZMAN A.A procedure for inducing sustained hyperlipemia in rats by administration of a surfactant[J].J Pharmacol Toxicol Methods,2007,55(2): 224-226.

[7] 劉玲,趙水平.貝特類調脂藥物的研究及應用進展[J].中國新藥與臨床雜志,2000,19(5): 349-352.

[8] 郭丹杰,徐成斌.貝特類調脂藥物在降脂領域的地位及認識[J].臨床藥物治療雜志,2008,6(2): 1-3.

(責任編輯：李嵐春)

Hypolipidemic Action of Total Saponins of Panax Japonicus on Triton WR-1339 induced Hyperlipidemic Mice

Jia Yinzhi,Yang Zhonglin*

(State Key laboratory of Natural Products and Functions,China Pharmaceutical University,Nanjing 210009,China)

Objective:To observe the hypolipidemic effect of total saponins of Panax japonicus (TSPJ). Methods:Animal models of hyperlipidemia induced by Triton WR-1339 (400mg/kg) were established. The serum levels were respectively measured,including total cholesterol (TC),triglyceride (TG) and low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C). Results:Contrast to the model group,fenofibrate significantly lowered the serum TC,TG,LDL-C levels (P<0.01),and TSPJ (100mg/kg) significantly lowered the serum TC levels (P<0.05) and TG levels (P<0.01),and TSPJ (200mg/kg) significantly lowered the serum TC,TG levels (P<0.01) and LDL-C levels (P<0.05),and TSPJ (400mg/kg) significantly lowered the serum TC,TG,LDL-C levels (P<0.01). Conclusion:TSPJ show notable antihyperlipidemia effect in serum in mice,which are in dose-dependent manner.

Total Saponins of Panax Japonicus; Triton WR-1339; Hyperlipidemia；Mice

2014-02-06

江蘇高校優勢學科建設工程資助項目

賈銀芝(1990-)，女，中國藥科大學碩士研究生，研究方向為中藥新藥研究。E-mail:yinzhizhi.hi@163.com

楊中林(1950-)，女，中國藥科大學中藥學院教授，博士生導師，研究方向為中藥新藥研究。 E-mail:yzl1950@126.com

R285.5；R589.2

A

1673-2197(2015)12-0009-03

10.11954/ytctyy.201512004