復方瓜子金苦味物質矯味研究

★ 何華山 劉旭海 余銀芳 (.國家知識產(chǎn)權局專利局專利審查協(xié)作江蘇中心 江蘇 蘇州5000;.江中藥業(yè)股份有限公司 南昌330096)

復方瓜子金含片是由瓜子金、大青葉、白花蛇舌草、野菊花、紫花地丁及海金沙六味中藥所制成的復方制劑。具有清熱利咽，散結止痛，祛痰止咳之功效;用于風熱襲肺或痰熱雍肺所致的咽部紅腫、咽痛、發(fā)熱、咳嗽，急性咽炎、慢性咽炎急性發(fā)作及上呼吸道感染見上述證侯者［1］。原制劑味苦、口感差，不利于口含服用，致使患者依從性差。本課題運用現(xiàn)代制藥技術，對本品的制劑工藝進行了改進，確定了最佳矯味工藝。

1 儀器與試藥

Agilent 1200/1100高效液相色譜儀(自動進樣器，DAD檢測器);UV-1206紫外分光光度計(日本SHIMADZU);瓜子金、大青葉、白花蛇舌草等六味藥材(安徽省亳州市中信中藥飲片廠)，經(jīng)江西中醫(yī)藥大學中藥鑒定教研室范崔生教授鑒定其來源，經(jīng)檢測符合《中華人民共和國藥典》2010年版一部有關各項規(guī)定)。

2 方法與結果

2.1 苦味溯源研究 復方瓜子金含片由瓜子金、大青葉、白花蛇舌草、野菊花、紫花地丁及海金沙6味藥組成，味道極苦，采用單純的矯味方法并不能掩去苦味。因此，本實驗首先對復方苦味來源進行追蹤，以明確苦味來源，從而對苦味藥材采用有針對性方法進行矯味。

按復方處方量分別稱取瓜子金37.5g、大青葉87.5g、白花蛇舌草62.5g、野菊花62.5g、紫花地丁50g及海金沙50g，分別置于6個圓底燒瓶中，加8倍量60%乙醇回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，過濾，回收乙醇，按處方比例進行濃縮，靜置冷卻至室溫。由于人類對香、甜、淡、苦等口感的分辨力極強，僅需對提取液進行簡單口嘗即能分辨各藥物的口感，因此將各藥物提取液經(jīng)10名志愿者口嘗即可鑒定苦味來源。結果見表1。

表1 苦味溯源考察結果表

從考察結果中可看出，復方瓜子金含片的苦味主要來自野菊花。其他5味藥材單提液，則味淡，苦味輕。因此，可將野菊花單獨提取，對野菊花提取物進行掩味［2］，另將瓜子金、大青葉、白花蛇舌草、紫花地丁及海金沙5味藥材合提。

2.2 野菊花提取物矯味工藝研究

2.2.1 矯味方法的選擇 目前，苦味抑制方法多樣，但就其矯味機理，主要有以下幾點:1、對苦味進行掩蓋，如加入甜味劑等;2、對味蕾進行麻痹，如加入薄荷腦，檸檬酸等;3、降低苦味物質在唾液中的溶解度，如對苦味物質進行包衣，或者制成微囊等;4、改變苦味物質的物理化學形態(tài)，如包合法利用苦味物質進入β-環(huán)糊精的空穴結構內，從而掩蓋苦味［2］。由于復方瓜子金含片是一類用于局部治療咽炎的制劑，要求藥物能夠在口腔內部釋放，從而發(fā)揮藥效，而包衣法制備的片劑在溶化完包衣層之后，苦味依然存在，因此不采用包衣法矯味。

由于人們對苦味的分離閾是極低的，即使微摩爾也可被感覺到，為使矯味實驗更為精準，將口感指標分為4級，“-”表示口感較差，苦味較濃，難以忍受;“+”表示口感一般，感受到苦味，不想忍受;“++”表示口感較好，感受到苦味，可以忍受;“+++”表示口感好，沒有任何苦味。

本實驗以口感為考察指標，對矯味劑法、麻醉味蕾法、包合法進行篩選，方法如下:

(1)矯味劑法:取藥粉適量(過100目篩)，選用常用的矯味劑蔗糖、蛋白糖、三氯蔗糖、乳糖、安賽蜜、阿斯巴甜進行篩選。試驗方法:分別按常量加入以上六種矯味劑，經(jīng)10名志愿者口嘗，反復調節(jié)用量，進行篩選。

(2)麻痹味蕾法:取藥粉適量(過100目篩)，選用薄荷腦、檸檬酸作為麻痹劑，分別按常量加入2種麻痹劑，經(jīng)10名志愿者口嘗，反復調節(jié)用量，進行篩選。

(3)包合法:取藥粉適量(過100目篩)，按一定方法制備總黃酮含量確切的包合物，經(jīng)10名志愿者口嘗，反復調節(jié)用量，進行篩選。

試驗結果見表2。

表2 野菊花提取物矯味方法考察結果表

結果表明，包合法對野菊花提取物的矯味作用效果較好，這是因為野菊花提取物進入β-環(huán)糊精的空穴結構內，改變了其物理化學形態(tài)，苦味得到很好的改善;相比于口含包衣制劑由于包衣層溶化而直接暴露藥物成分，導致矯味效果差的缺點，包合法由于能夠改變野菊花提取物的物理化學形態(tài)，從而能夠達到改善苦味和使有效成分在口腔內部進行吸收的雙重效果。而矯味劑及味蕾麻痹劑對野菊花的矯味作用并不明顯，原因是人們對苦味的分離閾是極低的，即使微摩爾也可被感覺到，而且苦味的感覺也比甜味持續(xù)的時間長，單純的矯味劑并不能掩蓋野菊花提取物的苦味。因此，本研究采用包合法對野菊花提取物苦味進行掩蓋。

2.2.2 包合物制備方法考察 包合物的制備方法有飽和水溶液法、超聲法、膠體磨法、冷凍干燥法、噴霧干燥法等。本研究根據(jù)現(xiàn)有生產(chǎn)設備及實驗條件，對飽和水溶液法和膠體磨法進行比較。

(1)飽和水溶液法［3］取β-環(huán)糊精8g加100mL蒸餾水，水浴加熱使其溶解，降至50℃時，加入1g野菊花提取物(野菊花提取物溶于適量60%乙醇中)，用磁力攪拌器攪拌3h，冷藏24h，抽濾，沉淀物于60℃干燥，收集包合物。

(2)膠體磨法［4］取β-環(huán)糊精8g加10mL蒸餾水，研磨使之成糊狀物，稱取1g野菊花提取物，于膠體磨中研磨30min，冷藏24h，抽濾，沉淀物于60℃干燥，收集包合物。

將上述兩種方法制得的包合物進行比較，測定其包合物收得率、總黃酮包合率，結果見表3。結果表明:膠體磨法法制備包合物，包合物得率與包合率均比飽和水溶液法高，這主要是因為在飽和水溶液包合過程中，由于用水量較大，野菊花提取物的水溶性較大，導致總黃酮不易進入β-環(huán)糊精的環(huán)狀中空圓筒型的結構中，使得包合率及包合物收得率低于膠體磨法。因此，本研究確定采用膠體磨法法對野菊花提取物進行包合。

表3 兩種野菊花提取物包合方法的比較

2.2.3 膠體磨法包合工藝條件的優(yōu)化 (1)β-環(huán)糊精與野菊花提取物的比例

分別稱取β-環(huán)糊精6，8，10，12g四份，置研缽中，分別加入等量蒸餾水，即6，8，10，12mL，研磨使之成糊狀物。精密加入1g野菊花提取物，繼續(xù)研磨40min，冷藏放置24h，抽濾，抽干，再分別用5mL蒸餾水洗滌包合物，收集濾渣，置60℃烘箱中烘干，稱重并按測定法測定總黃酮含量。分別計算總黃酮收得率和包合物收得率，結果見表4。結果表明:隨著β-環(huán)糊精與野菊花提取物的配比的升高，總黃酮的包合率及包合物收得率變化呈現(xiàn)出拋物線走向，原因是隨著β-環(huán)糊精的量的增加，野菊花提取物包合越完全，但當β-環(huán)糊精與野菊花提取物的配比到達8倍時，基本包合完全，再隨著β-環(huán)糊精的增加，已經(jīng)沒有野菊花提取物進入β-環(huán)糊精空腔中。因此，本研究確定β-環(huán)糊精與野菊花提取物的配比為8∶1。

表4 β-環(huán)糊精與野菊花提取物的配比的考察

(2)加水量的考察

稱取β-環(huán)糊精8g四份置研缽中，按配比為0.8，1，1.2，1.5，分別加入6.4，8，9.6，12mL蒸餾水，研磨使之成糊狀物。精密加入1g野菊花提取物，繼續(xù)研磨40min，5℃冰箱中放置24h，抽濾，抽干，再分別用5mL蒸餾水洗滌包合物，收集濾渣，置60℃烘箱中烘干，稱重并按測定法進行紫外-可見分光光度法測定總黃酮含量。分別計算總黃酮收得率和包合物收得率，結果見表5。結果表明:包合物收得率隨著加水量的增加而緩慢降低，原因是加水量的增加使更多的包合物溶解于水中;而總黃酮包合率呈現(xiàn)出拋物線走向，到β-環(huán)糊精:水為1∶1時，包合率最高，達到77.31%，因此本研究確定β-環(huán)糊精與水比例為1∶1。

表5 包合加水量的考察

(3)包合時間考察

稱取β-環(huán)糊精8g四份，加8mL蒸餾水，研磨使之成糊狀物，分別稱取1g野菊花提取物，于膠體磨中分別研磨40，50，60，70min，冷藏放置24h，抽濾，抽干，再分別用5mL蒸餾水洗滌包合物，收集濾渣，置60℃烘箱中烘干，稱重并按測定法進行紫外-可見分光光度法測定總黃酮含量。分別計算總黃酮收得率和包合物收得率。結果見表6。結果表明:隨著包合時間的增加，野菊花提取物包合率和包合物收得率兩項指標都有一定的提高，但當包合時間達到60min后，包合率和包合物收得率基本趨于穩(wěn)定。因此，確定野菊花提取物包合工藝包合時間為60min。

(4)結論

通過對野菊花提取物包合工藝的主要影響因素β-環(huán)糊精與野菊花提取物的配比、包合溫度以及包合時間三者進行單因素考察，確定野菊花提取物包合工藝最佳條件為:β-環(huán)糊精:野菊花提取物(g∶g)=8∶1、β-環(huán)糊精:水(g∶mL)=1∶1、包合時間為60min。

表6 包合時間的考察

2.2.4 野菊花提取物包合工藝驗證試驗 為考察該野菊花提取物包合工藝的穩(wěn)定性，進行3次平行試驗，結果見表7。結果表明:由上表可知，野菊花提取物包合率和包合物收得率兩項指標都較穩(wěn)定，兩者RSD＜3%。因此，表明該野菊花提取物包合工藝穩(wěn)定可行。所得野菊花包合物口感好，完全去除了原野菊花的苦味。

表7 包合工藝驗證試驗(n=3)

2.3 含片制劑 以甘露醇為填充劑、阿斯巴甜為甜味劑、薄荷腦為清涼劑、硬脂酸鎂為潤滑劑、30%乙醇溶液為潤濕劑，混以野菊花包合物和其余五味藥物浸膏粉，制備得到的復方瓜子金含片很好的掩蓋了含片中的苦味，具有口感好，便于服用的特點。

3 討論

本研究首先對處方中六味藥材進行苦味溯源，發(fā)現(xiàn)其苦味主要來自野菊花，因此將野菊花另提處理，提取物經(jīng)精制后，采用β-環(huán)糊精對野菊花提取物進行包合，野菊花提取物經(jīng)包合后，能夠掩蓋野菊花濃烈的苦味，使矯味工藝易于進行，改善含片口感，提升產(chǎn)品品質。

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