宮頸癌和宮頸上皮內瘤變組織中成纖維活化蛋白α的表達*

徐麗偉，張夢真

鄭州大學第一附屬醫院婦產科；河南省高等學校臨床醫學重點學科開放實驗室 鄭州 450052

宮頸癌和宮頸上皮內瘤變組織中成纖維活化蛋白α的表達*

徐麗偉，張夢真#

鄭州大學第一附屬醫院婦產科；河南省高等學校臨床醫學重點學科開放實驗室 鄭州 450052

#通信作者，女，1965年2月生，博士，主任醫師，研究方向：婦科腫瘤，E-mail:13683806877@163.com

宮頸癌；宮頸上皮內瘤變；成纖維活化蛋白α；浸潤；轉移

目的：檢測宮頸癌和宮頸上皮內瘤變(CIN)組織中成纖維活化蛋白α(FAPα)的表達情況。方法：采用免疫組化SP法檢測10例宮頸炎、40例CIN及81例宮頸癌組織中FAPα的表達。結果：FAPα在宮頸炎組織中不表達，宮頸癌組織中FAPα陽性表達率高于CIN組織(χ2=81.706，P<0.001)。不同組織學類型(Z=2.069，P=0.039)、淋巴結轉移情況(Z=3.382，P=0.001)和浸潤深度(Z=2.185，P=0.029)的宮頸癌組織中FAPα表達水平比較，差異有統計學意義。結論：FAPα可能參與了宮頸癌的發生發展。

宮頸癌是全球女性的第三大惡性腫瘤。找到宮頸癌發生發展的分子標記物是早期診斷宮頸上皮內瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宮頸癌的關鍵[1]。最近研究[2-4]發現，成纖維活化蛋白α(fibroblast activation protein α,FAPα)在多種上皮性癌組織中表達，參與細胞基質的降解及腫瘤細胞的增殖、侵襲和轉移過程，與腫瘤的發生及擴散有關。該研究采用免疫組化SP法檢測正常宮頸、CIN及宮頸癌組織中FAPα的表達，分析其與宮頸癌患者臨床病理因素的關系，探討其在宮頸癌變和早期浸潤、轉移中所起的作用。

1 材料與方法

1.1 標本來源 10例慢性宮頸炎、40例CIN和81例宮頸癌組織標本均取自鄭州大學第一附屬醫院2012年至2014年手術切除并經病理科確診的組織，所有患者術前均未進行放化療。宮頸癌患者的臨床病理因素如下：年齡40～71歲，中位年齡48歲，其中<48歲43例，≥48歲38例；FIGO分期：Ⅰ期58例，Ⅱ期23例；無淋巴結轉移69例，有淋巴結轉移12例；組織學類型：鱗癌68例，腺癌13例；分化程度：G1/G2期60例，G3期21例；浸潤深度：>1/2宮頸厚度41例，≤1/2宮頸厚度40例。

1.2 3種組織中FAPα的檢測方法

1.2.1 主要試劑 FAPα多克隆兔抗人抗體(Bioss公司)、免疫組化即用型SP試劑盒(北京中杉金橋生物技術有限公司)等。

1.2.3 結果判定 由2位病理科醫師雙盲閱片， FAPα產物為棕黃色顆粒，位于胞膜、胞質和(或)胞核內。觀察10個400倍視野，根據染色強度和陽性細胞所占百分比進行分級：陰性(-)，細胞無染色；弱陽性(+)，細胞呈淺棕黃色染色，陽性細胞百分比<10%；陽性()，細胞呈棕黃色染色，陽性細胞百分比10%～50%；強陽性()，細胞呈深黃色染色且陽性細胞百分比>50%。以(+)～()為陽性表達[5]。

1.3 統計學處理 應用SPSS 17.0進行分析。CIN和宮頸癌組織中FAPα陽性表達率的比較采用χ2檢驗，不同臨床病理因素宮頸癌組織中FAPα表達水平的比較采用秩和檢驗。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 FAPα在3種組織中的表達 宮頸炎組織未見FAPα陽性細胞(圖1A)，宮頸癌和CIN組織中FAPα呈陽性表達(圖1B和1C)。CIN和宮頸癌組織中FAPα陽性表達率的比較見表1。

圖1 3種宮頸組織中FAPα的表達(SP)

組織類型nFAPα/例-+陽性表達率*/%CIN組織4017136457.50宮頸癌組織81147201398.77

*:χ2=81.706，P<0.001。

2.2 FAPα表達與宮頸癌患者臨床病理因素的關系 FAPα表達與患者年齡、FIGO分期無關，組織學類型為腺癌、分化程度達G3期、浸潤深度>1/2宮頸厚度和有淋巴結轉移的宮頸癌組織中FAPα的表達強度更高，見表2。

表2 不同臨床病理因素人群宮頸癌組織中FAPα表達水平的比較 例(%)

續表2

3 討論

FAPα是具有二肽基肽酶活性和明膠酶活性的細胞膜整合糖蛋白[6]，通過與細胞表面蛋白質分子形成二聚體發揮作用，能明顯降解細胞外基質[7]，與多種上皮性癌的發生發展密切相關。FAPα參與了骨肉瘤[8]、非小細胞肺癌[9]、卵巢癌[10]等的發生和發展，可促進腫瘤細胞的生長和擴散。該研究發現，宮頸癌和CIN組織中FAPα呈陽性表達，而宮頸炎組織中FAPα不表達。

宮頸癌組織中FAPα陽性表達率為98.77%，而CIN組織中陽性表達率為57.50%，差異有統計學意義。另外，隨著宮頸癌浸潤深度的增加、淋巴結的轉移，FAPα的表達增加，提示FAPα的表達與腫瘤的浸潤和轉移有關。宮頸腺癌組織中FAPα的表達強于鱗癌組織。由于宮頸腺癌的預后較鱗癌差，這一差異可能反映FAPα的表達與預后相關，受樣本量的限制，這一結果有待進一步研究。

FAPα在正常人組織、上皮來源的良性和癌前病變組織中通常不表達，但是在惡性腫瘤間質成纖維細胞中表達[11]。該研究發現FAPα在CIN組織中表達，與其他研究結果不一致。推測可能是不同的癌前病變組織中FAPα的功能發生了變化，FAPα在不同程度上參與了宮頸細胞從CIN至宮頸癌進程中的調控。

總之，FAPα在宮頸癌和CIN組織中表達，可能參與了宮頸癌的發生發展，是宮頸癌早期浸潤和轉移的一個標志物。

[1]武海英,史惠蓉.不同宮頸病變組織中C-MYC基因與P16蛋白的表達[J].鄭州大學學報:醫學版,2011,46(5):739

[2]Augoff K,Hryniewicz-Jankowska A,Tabola R,et al.Upregulated expression and activation of membrane-associated proteases in esophageal squamous cell carcinoma[J].Oncol Rep,2014,31(6):2820

[3]Shi M,Yu DH,Chen Y,et al.Expression of fibroblast activation protein in human pancreatic adenocarcinoma and its clinicopathological significance[J].World J Gastroenterol,2012,18(8):840

[4]Kraman M,Bambrough PJ,Arnold JN,et al.Suppression of antitumor immunity by stromal cells expressing fibroblast activation protein-alpha[J].Science,2010,330(65):827

[5]苑文娜,張夢真.DPPⅣ蛋白和Seprase蛋白在卵巢上皮性癌中的表達及意義[J].實用婦產科雜志,2012,28(1):57

[6]Wikberg ML,Edin S,Lundberg IV,et al.High intratumoral expression of fibroblast activation protein(FAP) in colon cancer is associated with poorer patient prognosis[J].Tumor Biol,2013,34(2):1013

[7]Williams KC,Coppolino MG.SNARE-dependent interaction of Src,EGFR and β1 integrin regulates invadopodia formation and tumour cell invasion[J].J Cell Sci,2014,127(Pt 8):1712

[8]Yuan DT,Liu BB,Liu KX,et al.Overexpression of fibroblast activation protein and its clinical implications in patients with osteosarcoma[J].J Surg Oncol,2013,108(3):157

[9]Liao Y,Ni Y,He R,et al.Clinical implications of fibroblast activation protein-α in non-small cell lung cancer after curative resection: a new predictor for prognosis[J].J Cancer Res Clin Oncol,2013,139(9):1523

[10]Chen H,Yang WW,Wen QT,et al.TGF-beta-induced fibroblast activation protein expression, fibroblast activation protein expression increases the proliferation, adhesion, and migration of HO-8910PM[J].Exp Mol Pathol,2009,87(3):189

[11]Zhang J,Valianou M,Simmons H,et al.Identification of inhibitory scFv antibodies targeting fibroblast activation protein utilizing phage display functional screens[J].FASEB J,2013,27(2):581

(2014-10-10 收稿 責任編輯姜春霞)

Expression of fibroblast activation protein α in cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia tissue

XULiwei，ZHANGMengzhen

DepartmentofGynecologyandObstetrics，theFirstAffiliatedHospital，ZhengzhouUniversity；Key-DisciplinesLaboratoryforClinicalMedicineofHenanProvince,Zhengzhou450052

cervical cancer; cervical intraepithelial neoplasia; fibroblast activation protein α; invasion; metastasis

Aim: To detect the expression of fibroblast activation protein α (FAPα) in cervical cancer and cervical intraepithelial neoplasia tissue. Methods: FAPα expression in 10 cases of human cervicitis, 40 cases of cervical intraepithelial neoplasia and 81 cases of cervical cancer tissue was detected by SP method.Results: FAPα expression was higher in cervical cancer tissue than that in cervical intraepithelial neoplasia tissue(χ2=81.706，P<0.001). FAPα expression in cervical cancer tissue was different with different histopathologic type(Z=2.069，P=0.039), lymph node metastasis(Z=3.382，P=0.001), and depth of invasion(Z=2.185，P=0.029).Conclusion: FAPα may take part in invasion and metastasis of cervical cancer.

10.13705/j.issn.1671-6825.2015.03.017

*河南省科技攻關項目 142102310538

R737.33