六安市某縣結(jié)核病細(xì)菌學(xué)檢測(cè)及耐藥相關(guān)因素分析

汪全治 馬功燕 金德兵 張家武 孟令宏

六安市某縣結(jié)核病細(xì)菌學(xué)檢測(cè)及耐藥相關(guān)因素分析

汪全治 馬功燕 金德兵 張家武 孟令宏

目的 了解六安市某縣結(jié)核病耐藥狀況及相關(guān)因素，為制訂全市耐藥結(jié)核病控制策略提供參考依據(jù)。 方法 隨機(jī)抽取我市轄區(qū)1縣(區(qū))，將2013年1月至12月所有登記肺結(jié)核病例作為研究對(duì)象，進(jìn)行痰涂片鏡檢、細(xì)菌培養(yǎng)、藥敏實(shí)驗(yàn)及菌種鑒定，并分析相關(guān)影響因素。 結(jié)果 結(jié)核分枝桿菌總耐藥率(單耐藥率)為25%(37/148)，耐多藥率為8.1%(12/148)，廣泛耐藥率為2.03%(3/148)；非結(jié)核分枝桿菌總耐藥率(單耐藥率)為100%(5/5) 耐多藥率為80%(4/5)，廣泛耐藥率為80%(4/5)；單因素及多因素分析顯示，復(fù)治是單耐藥及耐多藥結(jié)核病的危險(xiǎn)因素，20～50歲年齡是耐多藥結(jié)核病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。涂片陽(yáng)性率為16.27%(95/584)，痰培養(yǎng)陽(yáng)性率為26.20%(153/584)。 結(jié)論 六安市某縣結(jié)核病耐藥疫情形勢(shì)嚴(yán)峻，需加強(qiáng)對(duì)初治病例及青壯年病例的管理，提高其治療依從性和治療成功率，減少耐藥結(jié)核發(fā)生。同時(shí)需加強(qiáng)結(jié)核病的細(xì)菌學(xué)檢測(cè)工作，提高菌陽(yáng)肺結(jié)核和耐藥結(jié)核分枝桿菌的發(fā)現(xiàn)率。

結(jié)核；分枝桿菌； 耐藥；危險(xiǎn)因素

目前結(jié)核病仍然是危害人類(lèi)健康的重大傳染病之一， 結(jié)核,尤其是耐藥結(jié)核的防治已成為結(jié)核病預(yù)防控制中非常棘手的問(wèn)題。國(guó)內(nèi)有關(guān)結(jié)核分枝桿菌耐藥率的研究報(bào)道較多[1-5]，但有關(guān)耐藥影響因素的研究報(bào)道并不多見(jiàn)。為了解結(jié)核桿菌的耐藥現(xiàn)狀及影響因素，參考世界衛(wèi)生組織/國(guó)際防癆和肺病聯(lián)合會(huì)(World Health Organization/International Union A-gainst Tuberculosis and Lung Disease Federation，WHO/IUATLD)《結(jié)核病耐藥監(jiān)測(cè)指南》[6]，采用整群抽樣方法在六安市隨機(jī)抽取1個(gè)縣(區(qū))為耐藥監(jiān)測(cè)點(diǎn)，對(duì)2013年新登記的肺結(jié)核患者進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、藥敏實(shí)驗(yàn)及菌種鑒定，并進(jìn)行相關(guān)因素分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年監(jiān)測(cè)點(diǎn)內(nèi)所有新登記的肺結(jié)核患者相關(guān)信息及痰標(biāo)本，并進(jìn)行痰涂片鏡檢、細(xì)菌培養(yǎng)、藥敏實(shí)驗(yàn)及菌種鑒定。相關(guān)變量定義為①涂陽(yáng)肺結(jié)核：指痰涂片檢查呈陽(yáng)性的肺結(jié)核；②培陽(yáng)肺結(jié)核：指痰培養(yǎng)檢查呈陽(yáng)性的肺結(jié)核；③菌陽(yáng)肺結(jié)核：指涂片陽(yáng)性或培養(yǎng)陽(yáng)性的肺結(jié)核；④初治結(jié)核病：指從未進(jìn)行抗結(jié)核治療，或治療時(shí)間<1個(gè)月的患者；⑤復(fù)治結(jié)核病：指過(guò)去曾經(jīng)進(jìn)行過(guò)抗結(jié)核治療，或抗結(jié)核治療時(shí)間>1個(gè)月的患者；⑥單耐藥結(jié)核：僅對(duì)一種抗結(jié)核藥物耐藥；⑦多耐藥結(jié)核：對(duì)2種以上抗結(jié)核藥物耐藥(除外同時(shí)耐HR)；⑧耐多藥結(jié)核(MDR-TB)：至少同時(shí)對(duì)異煙肼和利福平耐藥；⑨廣泛耐藥結(jié)核(XDR-TB)：至少同時(shí)對(duì)異煙肼和利福平耐藥，還對(duì)任何氟喹諾酮類(lèi)藥物以及3 種注射藥(卡那霉素、阿米卡星和卷曲霉素) 中任意一種耐藥。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 涂片、培養(yǎng)和菌種鑒定方法按照中國(guó)防癆協(xié)會(huì)《結(jié)核菌檢驗(yàn)細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程》 進(jìn)行， 藥物敏感性檢測(cè)采用 WHO/IUATLD《耐藥監(jiān)測(cè)指南》推薦的1%比例法。對(duì)異煙肼(INH)、利福平(RFP)、乙胺丁醇(EMB)、卷曲霉素(CPM)、對(duì)氨基水楊酸鈉(PAS)、丙硫異煙胺(PTO)、鏈霉素( SM) 、卡那霉素(KM)、氧氟沙星(OFX)9 種抗結(jié)核藥物的藥物敏感性進(jìn)行測(cè)定。

1.3 質(zhì)量控制 本實(shí)驗(yàn)研究建立了嚴(yán)格的室內(nèi)質(zhì)控制度， 在實(shí)驗(yàn)研究中每批新的羅氏培養(yǎng)基和標(biāo)準(zhǔn)藥物都用標(biāo)準(zhǔn)結(jié)核分枝桿菌 H37RV 菌株檢測(cè)， 并接受省參比實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)控(QC)測(cè)試， 以評(píng)價(jià)檢查結(jié)果的科學(xué)性和準(zhǔn)確性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用EpiData 3.1軟件雙錄入建立數(shù)據(jù)庫(kù)，并行一致性檢驗(yàn)。數(shù)據(jù)分析使用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件。對(duì)可能影響耐藥的因素進(jìn)行單因素分析。讓所有可能影響耐藥的研究因素進(jìn)入非條件logistic 回歸模型, 應(yīng)用向前步進(jìn)法(似然比)篩選影響耐藥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況 本次研究共納入病例584例，男性463例，女性121例；年齡16～93歲，中位年齡65歲。

2.2 涂片及培養(yǎng)情況 涂片陽(yáng)性率為16.27%(95/584)，痰培養(yǎng)陽(yáng)性率為26.20%(153/584)。涂片靈敏度56.9%(87/153)，特異度98.1%(423/431)，涂片假陰性率(漏診率)為43.14%(66/153)，涂片假陽(yáng)性率(誤診率)為1.86%(8/431)。見(jiàn)表1。

2.3 不同菌株耐藥分析 初治或復(fù)治結(jié)核病患者分離菌株中結(jié)核分枝桿菌占96.7% (148 /153) ，非結(jié)核分枝桿菌占3.3% (5 /153) 。其中結(jié)核分枝桿菌總耐藥率(單耐藥率)為25%(37/148)，多耐藥率為12.2%(18/148)，耐多藥率為8.1%(12/148)，廣泛耐藥率為2.03%(3/148)。非結(jié)核分枝桿菌總耐藥率(單耐藥率)為100%(5/5)，多耐藥率為100%(5/5)，耐多藥率為80%(4/5)，廣泛耐藥率為80%(4/5)。

表1 肺結(jié)核病例痰涂片與痰培養(yǎng)結(jié)果(例)

2.4 不同抗結(jié)核藥耐藥分析 不同抗結(jié)核藥耐藥率順位由高到低均依次為鏈霉素19.6%(30/153)、異煙肼16.3%(25/153)、利福平12.4%(19/153)、左氧5.9%(9/153)。詳見(jiàn)表2。

表2 不同抗結(jié)核藥耐藥情況 [例(%)]

2.5 單耐藥影響因素分析

2.5.1 影響因素單因素分析 單因素χ2分析顯示：是否復(fù)治病例及不同分枝桿菌型別病例是單耐藥的影響因素。性別、是否重癥、痰涂片結(jié)果、年齡在耐藥組與非耐藥組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表3。

表3 單耐藥影響因素χ2分析

2.5.2 單耐藥影響因素多因素分析 選擇所有可能影響單耐藥的研究因素進(jìn)入非條件logistic回歸模型, 應(yīng)用向前步進(jìn)法(似然比)篩選影響單耐藥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。見(jiàn)表4。復(fù)治病例是影響單耐藥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，MTB是保護(hù)因素。

表4 單耐藥影響因素logistic回歸分析

2.6 耐多藥影響因素分析2.6.1 耐多藥危險(xiǎn)因素單因素分析 單因素χ2分析顯示：是否復(fù)治病例、重癥及不同分枝桿菌型別病例是耐多藥的影響因素。性別、細(xì)菌分型、痰涂片結(jié)果、年齡耐藥組與非耐藥組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表5。

2.6.2 多因素分析 多因素logistic回歸分析顯示，復(fù)治病例及25～50歲是影響耐多藥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，MTB是保護(hù)因素。見(jiàn)表6。

表5 耐多藥影響因素χ2分析

3 討論

目前我國(guó)肺結(jié)核病的診斷仍以細(xì)菌學(xué)檢查為主，痰中檢查見(jiàn)抗酸桿菌為確診肺結(jié)核直接可靠的依據(jù)[1,2]。痰涂片檢查，以其成本低廉、準(zhǔn)確率高、時(shí)間快、符合成本效益等優(yōu)點(diǎn)，特別被發(fā)展中國(guó)家視為診斷結(jié)核病的主要手段。但相關(guān)的文獻(xiàn)[5]報(bào)道，痰涂片敏感性低，尤其排菌量少的肺結(jié)核患者不易被檢出。本研究提示，與痰涂片相比，痰培養(yǎng)具有較高的敏感性，可大大提高菌陽(yáng)肺結(jié)核患者發(fā)現(xiàn)和降低誤診率。

表6 耐多藥影響因素logistic回歸分析

結(jié)核病耐藥水平能夠反映一個(gè)地區(qū)結(jié)核病控制水平。一般來(lái)說(shuō)，耐藥率較低地區(qū)的結(jié)核病控制較好，反之，則較差。本研究結(jié)果表明，六安市苯縣結(jié)核病單耐藥率低于吉林、南京等地報(bào)道[6,7]，與寧波、重慶等相一致[8,9],耐多藥率低于吉林、重慶[6，9]，高于四川[10]。

耐藥率從高到低依次為鏈霉素、異煙肼、利福平、左氧。不同文獻(xiàn)報(bào)道的耐藥順序大不相同[11-13]， 在初治、復(fù)治患者中亦不相同，但多數(shù)學(xué)者報(bào)道前3位藥物為異煙肼、鏈霉素、利福平。

文獻(xiàn)[9，14,15]報(bào)道，復(fù)治病例耐藥率高于初治病例，本研究的單因素及多因素分析顯示，復(fù)治病例單耐藥率及耐多藥率均明顯高于初治病例，提示復(fù)治是耐藥和耐多藥產(chǎn)生的一個(gè)危險(xiǎn)因素。

較多的研究認(rèn)為，年齡與耐藥的發(fā)生率相關(guān)[15，16]。本研究發(fā)現(xiàn)，25～50歲年齡組的患者耐多藥率高于其他年齡組，與上述文獻(xiàn)報(bào)道相一致。作為社會(huì)主要?jiǎng)趧?dòng)力的中青年組耐藥率較高， 給個(gè)人、家庭乃至整個(gè)社會(huì)的經(jīng)濟(jì)發(fā)展都帶來(lái)了沉重的負(fù)擔(dān)。另一方面也提示，低年齡組耐藥率低說(shuō)明耐藥菌株近期傳播在下降。而另一項(xiàng)來(lái)自白俄羅斯的研究[17]認(rèn)為，<35 歲者更容易發(fā)生耐藥。

本研究還發(fā)現(xiàn)，非結(jié)核分枝桿菌雖然在結(jié)核病臨床診斷病例中所占比例不大(5/584)，文中5例病例痰涂片及培養(yǎng)均顯示陽(yáng)性，但5例藥敏結(jié)果顯示為多耐藥、耐多藥及廣泛耐藥結(jié)核，而菌種鑒定為非結(jié)核分支桿菌，目前“國(guó)家結(jié)核病防治十二五規(guī)劃”要求只有省及以上結(jié)防機(jī)構(gòu)才開(kāi)展菌種鑒定工作，提示將菌種鑒定工作納入縣級(jí)結(jié)防機(jī)構(gòu)常規(guī)檢查具有重要意義。

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(2015-04-07收稿 2015-06-26修回)

Culture of mycobacterium tuberculosis and analysis of factors related to drug resistance in acounty of lu′an

WangQuanzhi,MaGongyan,JinDebing,etal

Lu′anCenterforDiseaseControlandPreventionofAnhuiProvince,Lu′an237000,China

Objective To explore the situation and related factors of drug resistance in tuberculosis (TB) patients in lu′an, and to provide evidence for the strategy developing of prevention and control of TB. Methods A county of lu′an was selected by random sampling, and all registered pulmonary TB patients from Jan 2013 to Dec 2013 were enrolled in the study, receiving such laboratory examinations as sputum smear, bacterial culture, drug sensitive test and strain identification. Univariate and multivariate analysis were performed on the related factors of drug resistance. Results A total of 148 TB patients infected with mycobacterium TB were included, and the total drug resistant rate, extensive resistant rate and multi-drug resistant rate of mycobacterium TB were 25% (37/148), 4.58% (3/148), 8.1%(12/148), respectively. On the other hand, the total drug resistant rate, extensive resistant rate and multi-drug resistant rate of non-mycobacterium TB were 100% (5/5), 80% (4/5) and 80% (4/5). Univariate and multivariate analysis showed that, receiving more than once TB treatment was risk factors of mono-resistant and multi drug resistant TB, and 20-50 years old was likely to be a independent risk factor of multi drug resistant TB. The smear positive rate was 16.27% (95/584), and the culture positive rate was 26.20% (153/584). Conclusion The high prevalence of drug resistance has been a major challenge for TB control in lu'an. To strengthen the control of untreated and young patients, as to increase the treatment compliance and treatment success rate, reduce the occurrence of drug resistance to TB, is critically important. Meanwhile, to intensify the bacteriology detection of TB is necessary, thereby increasing detective rate of drug resistance and culture positive pulmonary TB.

Tuberculosis; Mycobacterium; Drug resistance; Risk factor

237000 安徽省六安市疾病預(yù)防控制中心

10.3969/j.issn.1000-0399.2015.08.020