染色體異常、染色體多態性與生殖異常的相關性分析

唐 芳，陶曉海，盧 航，屈艷霞，楊 燁，李雅文，左連東，陳桂蘭

(廣州市人口和計劃生育科學研究所，廣東 廣州 510410)

染色體異常、染色體多態性與生殖異常的相關性分析

唐 芳，陶曉海，盧 航，屈艷霞，楊 燁，李雅文，左連東，陳桂蘭

(廣州市人口和計劃生育科學研究所，廣東 廣州 510410)

目的 探討染色體異常、染色體多態性與不孕不育、不良妊娠等生殖異常的關系。方法收集本所近5年生殖異常(不孕不育和不良妊娠)患者150例，行外周血淋巴細胞培養及染色體制片，G顯帶分析。結果檢出染色體異常9例（克氏綜合征2例、特納綜合征2例、平衡易位2例、羅氏易位2例和倒位1例)，染色體異常發生率為6.0%；檢出染色體多態性32例，染色體多態性發生率為21.33%。其中，D/Gs+和1,9,16qh+是最主要的染色體多態類型。性染色體異常和性染色體多態性主要發生在不孕不育組；常染色體異常和常染色體多態性主要發生在不良妊娠組。結論染色體異常和染色體多態性是可能導致不孕不育及不良妊娠的重要原因，對生殖異常患者進行染色體檢查很有必要。

不孕不育；不良妊娠；染色體異常；染色體多態性

復發性流產、死胎等不良妊娠和不孕不育是婦產科常見疾病，其病因很多，包括內分泌因素、免疫因素、解剖因素、遺傳因素等[1-2]，其中染色體異常是一個很重要的遺傳因素。本文對廣州市人口和計劃生育科學研究所2009年1月至2014年6月收治的150例生殖異常患者的染色體檢查結果進行分析，報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 150例患者，其中不孕不育者48例，平均年齡(30.63±7.30)歲；不良妊娠者(包括自然流產、死胎、生育病殘兒等)102例，平均年齡(31.14±4.14)歲。男性84例，平均年齡(36.0±5.63)歲；女性66例，平均年齡(29.35±6.72)歲。

1.2 方法 采取所有患者的外周血2～3ml，將外周血無菌接種到培養瓶中，放入37℃培養箱內靜置培養，培養72 h后收集細胞、制作染色體片、染色體G顯帶(必要時加做C帶顯色)具體步驟見參考文獻[3]。每例患者平均計數30個核型，分析3～5個核型，異常核型則增加計數和分析核型的量。

1.3 統計學方法 所有數據采用SPSS16.0統計軟件進行統計學處理，計數資料的組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 染色體異常和染色體多態性的核型分布情況 150例患者中共檢出9例染色體異常和32例染色體多態性。其中不孕不育組檢出5例染色體異常，異常率為10.42%；不良妊娠組檢出4例，異常率為3.92%，兩組之間進行比較差異無統計學意義(χ2=2.441，P＞0.05)。不孕不育組檢出11例染色體多態性，多態性率為20.59%；不良妊娠組檢出21例染色體多態性，多態性率為20.59%，兩組比較差異無統計學意義(χ2=0.218，P＞0.05)。染色體異常的核型和染色體多態性的核型具體見表1。

表1 41例異常染色體異常和多態的核型分布情況

2.2 各種類型染色體多態性的檢出情況 32例染色體多態性患者中D/Gs+11例、1，9，16qh+10例、Y多態9例、Inv(9)2例。D/Gs+和1，9，16qh+是最主要的染色體多態類型。D/Gs+檢出率為7.33%，構成比為34.38%；1，9，16qh+檢出率為6.67%，構成比為31.25%。

2.3 兩組患者的常染色體異常和多態性與性染色體異常和多態性比較 不孕不育組性染色體異常和多態性總發生率為20.83%，不良妊娠組為3.92%，兩組比較差異有顯著統計學意義(χ2=11.03，P＜0.01)；不孕不育組常染色體異常和多態性發生率為12.50%，不良妊娠組為20.58%，兩組比較差異無統計學意義(χ2=1.45，P＞0.05)。

3 討論

生殖異常患者的的常見染色體異常包括克氏綜合征、特納綜合征、平衡易位、羅氏異位、倒位等。本文150例患者中發現9例染色體異常，異常率為6.0%，高于一般人群染色體異常發生率(0.6%)[4]，可能與選擇的分析對象有關。不孕不育患者組檢出5例染色體異常(2例克氏綜合征、2例為特納綜合征、1例X染色體倒位)。克氏綜合征(47，XXY)患者在青春期前癥狀不明顯，難以檢查出，成年后患者多因小睪丸、無精子癥、不育而就診。2例特納綜合征(1例46，X，i(X)、1例46，XY[96]/45，X[4])中前者社會性別為女性，臨床表現為身材矮小、生殖器與第二性征不發育等；后者社會性別為男性，臨床表現為無精子癥。X染色體倒位[46，Y，inv(X)(p21；q31)]，臨床表現為男性少、弱精癥。不良妊娠史患者組檢出4例染色體異常(2例平衡易位、2例羅氏易位)。平衡易位表型正常，但與正常人婚配后，理論上形成18種配子(1種正常，1種平衡異位攜帶者，其余16種為三體、單體、部分單體等不平衡個體)，當配子為三體、單體、部分單體等不平衡個體時，臨床表現多表現為自然流產和胎兒畸形[5]。非同源羅氏易位攜帶，其表型正常，但與正常配子結合的子代中有1/6正常，1/6為攜帶者，其余4/6為不平衡合子，不平衡合子將流產或死胎[5]。

染色體多態性主要表現為異染色質的變異，過去人們通常認為異染色質無特殊功用，也無表型效應。但近年的研究表明，染色體多態性不但有臨床效應而且極可能與生殖異常等密切相關[6-7]。本文發現染色體多態32例[1，9，16qh+10例、Inv(9)2例、D/Gs+11例、Y多態9例]，多態率為21.33%，高于人群中染色體多態的發生率(2.6%)[4]。不孕不育組11例，不良妊娠組21例，兩組比較發生率差異無統計意義(P＞0.05)。說明與染色體多態相關的生殖異常臨床表現既可以是不孕不育也可以是不良妊娠。D/Gs+和1，9，16qh+是最主要的染色體多態類型。D/Gs+是核仁組織者區(NOR rRNA)高度重復的結果。有研究報道rRNA基因的增多可使染色體結構功能發生改變，引起D/G組隨體區聯合，致染色體不分離和重排機會增多、形成染色體異常的配子和合子，導致早期胚胎發育異常引起流產、不孕或生育畸形兒[8]。次縊痕增加(qh+)主要發生在1、9、16號染色體，次縊痕異染色質區是易發生自發和誘發斷裂的部位，它的增加或減少也可能影響到主縊痕區的CKC，從而在減數分裂時引起染色體的不分離，導致胎兒染色體異常而流產。男性主要表現為不育，女性主要表現為多次流產[9]。本文檢出Y多態9例，Y染色體由常染色體區和Y特異區組成，在Y特異區包含著眾多重要的與性別決定及精子發生有關的基因，它的結構改變會嚴重影響精子的發生[10]。關于inv(9)與流產的關系一直爭議比較大。文獻報道9號染色體臂間倒位在人群中的發生率為1.00%～1.65%[11]，本文的inv(9)發生率與文獻報道一致。但是本文只檢出2例inv(9)，可能需要增加分析的對象。文獻報道這種多態導致生殖異常的機理可能有：①攜帶者在配子形成中形成特有的倒位環，有2/4的機會生成不平衡的配子，與正常配子結合后產生遺傳物質不平衡個體，遺傳效應取決于重復和缺失片段的長度以及所含基因的致死效應[5]。②9號染色體的pter-q12段為松弛素(RLX)基因所在，在生育調節中起重要作用。倒位使q12遠端發生位置效應，使RLX基因作用減弱致精子發生障礙，導致少、弱精子癥和畸形精子[12-13]。

一般生殖異常患者女性染色體異常和多態率多高于男性，本文男性患者24例，發生率為28.57%；女性異常17例，發生率為25.75%，男性多于女性。可能與本所的患者來源密切有關。本文性染色體異常和多態性共檢出14例，主要發生在不孕不育組。常染色體異常和多態性共檢出27例，主要發生在不良妊娠組。因此常染色體異常和多態性、性染色體異常和多態性在生殖異常的臨床表現上存在差異。

綜上所述，不孕不育、不良妊娠患者應進行染色體檢查，且男女雙方均應檢查，有助于查找病因。染色體多態性有臨床效應而且極可能與生精障礙、流產、胚胎停止發育等生殖異常等密切相關。

[1]趙 花,苗竹林,韋相才.復發性流產的病因分析及治療新進展[J].臨床醫學,2013,33(2)：104-108.

[2]何 娟.739例有不良孕產史及不育不孕患者外周血染色體分析[J].中國婦幼保健,2011,26(22)：3435-3437.

[3]張 璘,張曉紅,任梅宏,等.401例染色體多態性引起生殖異常分析[J].中國優生與遺傳雜志,2010,18(10)：34-36.

[4]趙 振.孕中期羊水染色體檢測及妊娠結局分析[J].臨床血液學雜志,2012,25(6)：360-362.

[5]高雪峰.胎兒染色體結構和數目異常的遺傳咨詢和處理決策[J].中國實用婦科與產科雜志,2013,29(8)：614-618.

[6]王小榮,鄧劍霞,李津津.染色體多態性與臨床效應及生殖關系的探究[J].遺傳,2007,29(11)：1362-1366.

[7]Guo T,Qin Y,Gao X,et al.The role of male chromosomal polymorphism played in spermatogenesis and the outcome of IVF/ICSI-ET treatment[J].Int JAndrol,2012,35(6)：802-809.

[8]段程穎,王麗娟,王 挺,等.染色體多態性與臨床生殖效應的研究[J].生殖與避孕,2009,29(10)：643-647.

[9]Rieder CL,Salmon ED.The vertebrate cell kinetochore and its roles during mitosis[J].Trends in Cell Biol,1998,8(8)：310-318.

[10]Lemaitre C,Braga MDV,Gautier C,et al.Footprints of inversions at present and past pseudoautosomal boundaries in human sex chromosomes[J].Genome Biol Evol,2009,1：56-66.

[11]夏家輝,李麓云.染色體病[M].北京：科學出版社,1989：275.

[12]巫新春,曹云霞,叢 林,等.50對自然流產史夫婦染色體分析[J].中華醫學遺傳學雜志,2006,23(1)：112-113.

[13]Mierla DANA,Veronica STOIAN.Association of pericentric inversion of chromosome9 and infertility in romanian population[J]. Maedica(Buchar),2012,7(1)：25-29.

Correlation between abnormal chromosome,chromosome polymorphism and reproduction abnormality.

TANG Fang,TAO Xiao-hai,LU Hang,QU Yan-xia,YANG Ye,LI Ya-wen,ZUO Lian-dong,CHEN Gui-lan.The Population and Family Planning Science Research Institute of Guangzhou,Guangzhou510410,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo analyze the relationship of abnormal chromosome,chromosome polymorphism with infertility,adverse pregnancy.MethodsOne hundred and fifty patients with reproductive abnormalities were collected in the recent five years.Then the peripheral blood were cultured and the cells were collected for chromosome preparation,G banding,karyotype analysis.ResultsNine cases were detected with chromosomal abnormality (including2 cases of Klinefelter syndrome,2 cases of Turner syndrome,2 cases of balanced translocation,2 cases of Robertsonian translocation,and1 case of inversion),and the abnormal rate was6.0%.Among the150 cases,32 were detected with chromosome polymorphism,with the polymorphism rate of21.33%.Abnormality and polymorphism of sex chromosome mainly influenced infertility rate,and the abnormality and polymorphism of euchromosome mainly influenced adverse pregnancy rate.ConclusionAbnormalities and polymorphism of chromosome is an important reason of infertility and adverse pregnancy.It is necessary to perform chromosome examination for patients with reproductive abnormalities.

Infertility;Adverse pregnancy;Abnormal chromosome;Chromosome polymorphism

R711.6

A

1003—6350（2015）16—2379—03

2014-10-16)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.16.0858

廣東省人口和計劃生育委員會科研項目(編號：2012256)；廣東省科技廳科技基礎條件建設項目(編號：2010B060100014)

陳桂蘭。E-mail：chenguilan108@163.com