敗血癥患者調節性T細胞與CD64指數的相關性分析

汪月強

(湖州市第一人民醫院，浙江湖州31300)

●醫學研究

敗血癥患者調節性T細胞與CD64指數的相關性分析

汪月強

(湖州市第一人民醫院，浙江湖州31300)

目的:檢測敗血癥患者血CD4+CD25+調節性T細胞(CD4+CD25+Treg)和CD64指數，探討二者的相關性。方法:采用流式細胞儀檢測敗血癥組及對照組的血CD4+CD25+Treg和CD64指數，同時測定白細胞數(WBC)和C-反應蛋白(CRP)的水平，并進行比較、分析。結果:(1)CD4+CD25+Treg、CD64、WBC、CRP敗血癥組明顯高于對照組;死亡組患者明顯高于生存組，差異均有統計學意義(P＜0．05);(2)生存組和對照組CD4+CD25+Treg、CD64兩項指標不同時間變化不明顯;(3)CD64指數與CD4+CD25+Treg呈正相關關系，有統計學意義(P＜0．05)。結論:連續、動態觀察敗血癥患者的CD4+CD25+Treg與CD64指數，有助于正確評估其發展方向和預后，為早期合理使用藥物提供支持。

敗血癥;CD4+CD25+調節性T細胞;CD64指數

近年來，有研究表明，敗血癥患者中性粒細胞CD64表達明顯高于局部感染和健康體檢的患者，不僅能作為診斷細菌感染的有效指標，還能夠反映病情嚴重程度及指導臨床用藥［1］。CD4+CD25+調節性T細胞(CD4+CD25+Treg)是一類具有免疫調節功能的細胞，在感染性疾病的免疫中發揮著重要作用。本研究通過檢測敗血癥患者血CD4+CD25+Treg和CD64指數水平，探討二者的相關性，旨在了解及其對敗血癥的作用，為臨床診治提供科學依據。

一、對象與方法

(一)對象。

本研究在筆者所在醫院進行，連續觀察2012年2月至2014年6月在本院治療的68例敗血癥患者。敗血癥的診斷均符合美國疾病感染控制中心推薦的原則，排除自身免疫性疾病、惡性腫瘤。患者在確診的當日起，連續觀察30天。分別于第1、3、7、14日收集相關資料并采集血液標本進行實驗室檢測。68例患者中，男37例，女31例，年齡(55．24± 16．51)歲。本研究按照患者的診斷明確后第30日是否仍生存分為生存組(42例)和死亡組(26例)。根據病例組的情況，選取具有可比性的同期在本院體檢的健康者50例組成對照組，其中男27例，女23例;年齡平均(57．13±15．27)歲。資料收集方式與病例組相同。對照組與病例組在性別、年齡方面差異無統計學意義(P＞0．05)。

(二)實驗室檢測。

于上述時間點抽取三組研究對象的靜脈血2ml，EDTAK2抗凝，測定C-反應蛋白(CPR)及白細胞計數(WBC)，同時分離單個核細胞，單個核細胞濃度為5×106/m l。

用流式細胞儀檢測CD25強陽性的CD4+T細胞(CD4+CD25+)特異性代表人CD4+CD25+Treg細胞;根據FS-SS設門淋巴細胞和粒細胞群，分別檢測淋巴細胞和粒細胞CD64平均熒光強度(MFI)，計算CD64指數。

(三)統計學方法。

統計處理借助SPSS 17．0進行操作，計量資料以均數±標準差表示，采用F檢驗和LSD進行統計學假設檢驗，以P＜0．05為有統計學意義。

二、結果

(一)三組各項指標比較。

WBC、CRP、CD64、CD4+CD25+檢測結果顯示，敗血癥患者明顯高于正常對照組，死亡組患者明顯高于生存組，差異均有統計學意義(P＜0．05)(見附表)。

附表 三組研究對象各項指標比較(±s)

附表 三組研究對象各項指標比較(±s)

注:采用LSD進行兩兩比較，a:與對照組比較，P＜0．05;b:與生存組比較，P＜0．05

項目對照組生存組死亡組F P WBC(109/L)7．18±1．26 13．27±6．55a19．07±7．49ab53．698 0 CPR(mg/L)4．07±1．55 24．28±10．27a72．27±25．47ab21．004 0 CD64指數1．01±0．23 1．89±0．45a2．48±0．88ab5．263 0．008 CD4+CD25+(%)4．12±1．56 5．88±1．88a8．03±2．29ab4．988 0．023

(二)動態觀察。

第1天，敗血癥組CD4+CD25+Treg、CD64均明顯高于對照組;隨后生存組二者均呈下降趨勢，而死亡組二者均上升，對照組兩項指標不同時間變化不明顯(見圖1、圖2)。

圖1 三組研究對象CD4+CD25+水平變化

圖2 三組研究對象CD64指數變化

(三)相關性分析。

經Pearson相關分析，CD64指數與WBC、CRP及CD4+CD25+Treg均呈正相關關系，均有統計學意義，相關系數分別為:r=0．724，P=0．035、r=0．875，P=0．002、r=0．653，P =0．000。

三、討論

越來越多的研究表明，感染患者血中性粒細胞表面CD64升高，CD64反應感染程度有較高靈敏性和特異性。CD4+CD25+Treg可特征性地表達CD25，可產生廣泛的免疫抑制效應，例如可調節抗炎介質水平，影響免疫細胞(中性粒細胞等)凋亡和增殖等［2］。本實驗研究，旨在分析敗血癥患者的機體的免疫狀況，進而了解患者的治療效果及預后情況，從而為制定預見性的防治措施提供了新的視角。

敗血癥是感染的嚴重并發癥，在其發生和發展過程中，炎癥損害及機體的免疫功能均起著關鍵作用。CD4+CD25+Treg細胞在感染過程中發揮著對細胞免疫的抑制作用。本實驗結果發現:敗血癥患者血中CD4+CD25+Treg高于對照者，提示患者體內免疫抑制功能增強;同時，死亡組的CD4+CD25+Treg高于生存組，可以認為死亡組患者體內的免疫抑制功能更強，機體有效殺死入侵微生物功能的丟失和對感染抵抗力下降。

目前研究結果證實中性粒細胞表面CD64是細菌感染尤其是全身感染早期敏感指標，且隨著疾病嚴重程度的增強而增強。本實驗結果發現，CD64指數與WBC、CRP及CD4+CD25+Treg均呈正相關關系;連續觀察發現，隨著疾病的進展，生存組CD4+CD25+Treg、CD64指數明顯回落，直至接近正常水平，而死亡組兩項指標卻持續升高。從免疫學角度看，說明了敗血癥患者炎癥的嚴重狀態與免疫抑制存在明顯相關性。

綜上所述，敗血癥患者機體CD4+CD25+Treg升高，存在一定免疫抑制，與炎癥的嚴重程度呈正相關關系;CD4+CD25+Treg與CD64指數呈正相關關系，連續、動態觀察CD4+CD25+Treg與CD64指數，可了解敗血癥的發展情況，并有助于正確評估其發展方向和預后，為早期合理使用藥物提供支持，并盡可能減少抗生素的濫用。

［1］萬歲桂，鄭程程，韓旭，等．中性粒細胞CD64指數在血液病合并細菌感染診斷中的價值［J］．中國實驗血液學雜志，2014，22 (3):797-800．

［2］陳鑫．CD4+CD25+調節性T細胞在嚴重燒傷等應激狀態下對免疫系統的影響［J］．重慶醫學，2012，41(16):1647-1649．

R515．3

B

1002-1701(2015)03-0129-02

2014-10

汪月強，男，本科，主管技師，研究方向:臨床檢驗工作。

10．3969/j．issn．1002-1701．2015．03．067