Survivin的表達(dá)及相關(guān)臨床因素與胃癌預(yù)后的關(guān)系*

西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院腫瘤外科(西安710004)

惠文濤 黃 珊 昝 瑛 馬小斌 董 蕾△

·臨床病理·

Survivin的表達(dá)及相關(guān)臨床因素與胃癌預(yù)后的關(guān)系*

西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院腫瘤外科(西安710004)

惠文濤 黃 珊 昝 瑛 馬小斌 董 蕾△

目的：研究生存蛋白(Survivin)在胃癌組織中是如何進(jìn)行表達(dá)的和各臨床病理因素對其預(yù)后的影響。方法：利用免疫組化法檢測50例胃癌組織Survivin的表達(dá)以及“Kaplan-Meier單因素分析法”研究各臨床病理因素和胃癌組織存活長短之間的關(guān)系，應(yīng)用Cox比例風(fēng)險回歸模型對生存期的影響因素進(jìn)行回歸分析。結(jié)果：50例胃癌組織中Survivin陽性率為74%，單因素分析50例患者的生存時間與TNM分期 、Bormann分型、腫瘤侵潤深度和Survivin表達(dá)有關(guān)，Cox比例風(fēng)險回歸模型分析臨床分期、Bormann分型和Survivin是影響預(yù)后的最危險因素之一 。 結(jié)論：對胃癌預(yù)后存在威脅的因素包括：“Survivin、臨床分期以及Bormann分型”，并具有各自的獨立性。

生存蛋白(Survivin)屬于凋亡蛋白抑制因子家族，于二十世紀(jì)末發(fā)現(xiàn)。Survivin的功能包括：“調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂和抑制細(xì)胞凋亡”[1]。Survivin在大部分腫瘤組織中的表達(dá)都很高，以往資料顯示：“Survivin和腫瘤的發(fā)生發(fā)展、血管生成、預(yù)后息息相關(guān)”[2]。此次研究應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測了胃癌組織中Survivin是如何表達(dá)的，重點探討了包括Survivin表達(dá)在內(nèi)的臨床病理因素對胃癌預(yù)后的影響作用。

資料與方法

1 一般資料 隨機選取2007年2月至2009年11月期間的西安交通大學(xué)第二醫(yī)院50例進(jìn)行手術(shù)治療的胃癌病歷作為標(biāo)本，采用病理學(xué)相關(guān)知識進(jìn)行論證。50例標(biāo)本中男性35例，女性15例；年齡在29～72歲之間，中數(shù)年齡為49.36歲，并且50例標(biāo)本中的患者在術(shù)前均未進(jìn)行化學(xué)或放射療法。根據(jù)Edmondson分型標(biāo)準(zhǔn)：有18例是高分化，32例低分化或未分化，根據(jù)TNM臨床分期：早期有19例，晚期有31例，見附表。

2 方 法

2.1 定期隨訪、收集資料：定期隨訪所有作為標(biāo)本檢測的50例患者。生存期：把進(jìn)行手術(shù)的日期作為第一天，患者死亡時的日期或者2014年11月最后一次隨訪日期為最后一天，期間為生存期；如果在進(jìn)行末次隨訪時還存活著，規(guī)定此次生存期為截尾值。

2.2 研究凋亡抑制因子家族中Survivin是如何表達(dá)的，以及各臨床病理因素與胃癌生存期的關(guān)系。

2.3 選用的方法:Survivin染色選用“免疫組化Elivision兩步法”：“引進(jìn)美國Neomarker公司的濃縮型鼠抗人Survivin單克隆抗體，其濃度為1∶100；用PBS替代Survivin一抗以及已有的Survivin陽性表達(dá)的組織切片來進(jìn)行陰性和陽性的對比。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果的評定：Survivin染色成棕黃色，在其胞漿中發(fā)現(xiàn)。以組織切片的10%的陽性率為分界點：>10%被定義為陽性；小于10%則為陰性，指視野中看不到染色或者染色很弱。計算方法：隨機選取5個視野，單獨計算每個視野內(nèi)的染色情況—陽性細(xì)胞所占比例，取其平均值。

2.5 統(tǒng)計學(xué)方法：應(yīng)用“Kaplan-Meier單因素分析法”和“Cox比例風(fēng)險回歸模型”研究影響生存期的相關(guān)因素。

結(jié) 果

1 胃癌組織中Survivin表達(dá) Survivin蛋白在胃癌細(xì)胞漿中高表達(dá)，通過免疫組化染色可在其胞漿中看到棕黃色染色、陽性細(xì)胞于胃癌組織內(nèi)分布不密集。其中，在50例胃癌組織標(biāo)本中，32例發(fā)現(xiàn)為Survivin陽性，及其陽性率達(dá)到74%；正常胃組織為陰性。胃癌組織Survivin的陽性率顯著高于正常肝組織(P<0.001)。

2 通過“Kaplan-Meier單因素分析法”對Survivin各臨床病理檢測指標(biāo)與生存時間之間關(guān)系的研究 選取的病歷中其生存時間和臨床分期、Bormann分型、腫瘤侵潤深度和Survivin表達(dá)有關(guān)，患者的性別、年齡，組織學(xué)分型，組織分級，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)等因素與其預(yù)后沒有關(guān)系。

3 通過“Cox比例風(fēng)險回歸模型”研究探討與生存期有關(guān)的因素 其結(jié)果顯示：在所有影響因素中，最為重要的是臨床分期、Bormann分型以及Survivin表達(dá)(P<0.05)，因此，能夠說明TNM分期、Bormann分型和Survivin表達(dá)是對胃癌預(yù)后有威脅作用的獨立性因素。

討 論

Survivin所屬家族是凋亡抑制蛋白家族。有關(guān)資料顯示：胃癌細(xì)胞分化能力逐漸降低、細(xì)胞瘤體積日益增大、分期不斷延長推遲等導(dǎo)致了細(xì)胞凋亡率和增殖率都在不斷升高，但凋亡率卻一直小于增殖率[3]。細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)系統(tǒng)的紊亂是細(xì)胞增殖凋亡失衡的主要原因[4]。有研究顯示：Survivin基因表達(dá)的異常能夠提高胃癌的增殖率；提示Survivin基因表達(dá)能夠降低胃癌細(xì)胞的凋亡率。根據(jù)相關(guān)報道所稱，Survivin表達(dá)的好低分布依次可為：癌組織>癌旁組織>正常組織[5]。這種現(xiàn)象和其他研究的結(jié)果基本相同：Survivin在胃癌組織中的陽性率顯著大于其在正常胃組織中的陽性率。Survivin在胃癌組織中比在正常胃組織中陽性率的高表達(dá)，表明：Survivin可能與胃癌的發(fā)生有關(guān)[6，7]。胃癌組高表達(dá)的Survivin是胃癌腫瘤的顯著特征、重要標(biāo)志，有利于進(jìn)行胃癌的篩查和診斷[8]。

通過“Kaplan-Meier單因素分析法”可知，影響生存時間的因素包括：TNM分期、Bormann分型、腫瘤浸潤深度和Survivin表達(dá)，與患者的性別、年齡、組織分級，組織學(xué)分型，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移個數(shù)等因素?zé)o關(guān)。本文對胃癌預(yù)后的有關(guān)因素采取了單因素和多因素研究。通過利用COX模型多因素研究顯示：對胃癌存在威脅作用的因素有Survivin的表達(dá)、TNM分期、Bormann分型,并具有各自的獨立性。

[1] Altieri DC. The case for survivin as a regulator of microtubule dynamics and cell-death decisions [J].Curr Opin Cell Biol,2006 ,18(6):609-15.

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[3] Zhang R, Wang T, Li KN,etal. A survivin double point mutant has potent inhibitory effect on the growth of hepatocellular cancer cells[J].Cancer Biol Ther,2008,7(4):547-54.

[4] 張運貴,黃詠梅,張樹民. E-cadherin、Survivin在胃癌及癌旁組織中的表達(dá)及臨床意義研究[J]. 中華臨床醫(yī)師雜志，2013,7(19):8670-8674.

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[7] 李一鑫,張 楠,陶 林,等. 胃癌患者VEGF、VEGFR2高表達(dá)的臨床病理學(xué)意義及其在胃癌進(jìn)展與生存預(yù)后中的作用[J]. 世界華人消化雜志，2014,22(29)：4406-4414.

[8] 宗 杰,王 巖,徐建明,等. 影響晚期胃癌患者療效和預(yù)后的相關(guān)因素分析[J]. 臨床腫瘤學(xué)雜志，2012,17(8):721-725.

(收稿：2015-03-28)

*陜西省社會發(fā)展科技攻關(guān)項目(20145SF-221)

胃腫瘤 病理學(xué)，臨床 @Survivin 預(yù)后

R735.2

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.08.079

△通訊作者：西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院消化科