呼吸道感染苛養菌的分布及耐藥特點

楊曉波，周璐坤，張方瓊

（1.中國人民解放軍第二五三醫院檢驗科，內蒙古呼和浩特 010051；2.湖北秭歸縣人民醫院檢驗科，湖北秭歸 443600）

呼吸道感染苛養菌的分布及耐藥特點

楊曉波1，周璐坤1，張方瓊2

（1.中國人民解放軍第二五三醫院檢驗科，內蒙古呼和浩特 010051；2.湖北秭歸縣人民醫院檢驗科，湖北秭歸 443600）

目的了解該院呼吸道感染苛養菌的分布及耐藥性分析，更好地服務臨床，為臨床診療提供參考依據。方法該院2012年1月至2014年11月從呼吸道感染患者痰共分離培養得到173株病原菌，選用法國梅里埃公司的API鑒定系統進行鑒定；藥敏試驗使用K-B法，選用英國Oxoid公司的MH瓊脂、血瓊脂平板和藥敏紙片進行。結果在1 374株呼吸道感染患者痰培養中分離出苛養菌173株，其中未發現對青霉素中介或耐藥的肺炎鏈球菌。卡他莫拉菌、流感嗜血桿菌對四環素的敏感率達80%以上，然而對肺炎鏈球菌的耐藥率則高達80%；肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌對環丙沙星和左氧氟沙星的敏感率為100%；流感嗜血桿菌對第三代頭孢菌素的敏感率為100%。結論對于苛養菌的感染，臨床治療應根據藥敏試驗結果，合理選用抗菌藥物，以有效提高治愈率。

呼吸道感染； 苛養菌； 卡他莫拉菌； 肺炎鏈球菌； 流感嗜血桿菌； 耐藥性分析

苛養性菌是一類生長需要特殊營養物質的細菌，與許多感染性疾病有關，其分離培養較為困難，又稱為“難培養的細菌”。卡他莫拉菌、流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌都是臨床上較為常見的呼吸道感染的苛養菌，當機體免疫力低下時，可引起呼吸道相關性疾病，如肺炎、支氣管炎、急性中耳炎等，另外這些苛養菌還可以隨著血液循環侵入到組織內部，引發腦膜炎、菌血癥和心內膜炎等［1］。因此，對苛養性細菌的分離鑒定和藥敏試驗不僅是臨床迫切的需要，也是衡量臨床微生物實驗室技術水平的重要標志。筆者對本院2012年1月至2014年11月分離得到的173株苛養菌的臨床特點及耐藥性進行分析，旨在為臨床合理選用抗菌藥物提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年1月至2014年11月，本院臨床共對門診和住院的呼吸道感染患者的痰標本共1 374例進行分離培養，苛養菌共計173株，卡他莫拉菌53株，肺炎鏈球菌89株，流感嗜血桿菌31株。其中門診患者66例（4.8%），住院患者1 308例（95.2%）；男性共145例，女性共28例，平均年齡為76.8歲。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 門診患者在采集痰標本前先用清水或雙氧水（30.0 mL/L）漱口，住院患者需在晨起后先用清水和雙氧水（30.0 mL/L）漱口，然后進行深咳，棄用第一口痰，保留第二口痰，進行痰涂片鏡檢，合格標本的要求：白細胞大于25個/低倍鏡視野、鱗狀上皮細胞小于10個/低倍鏡視野或者鱗狀上皮細胞/白細胞小于0.4，或者是經過無菌毛刷刷取的痰標本。采集的標本應迅速接種到血瓊脂平板和巧克力瓊脂平板，放入35℃、5%CO2的培養箱孵育18～24 h，再進行常規分離培養。

1.2.2 細菌鑒定和藥敏試驗 按照《全國臨床檢驗操作規程》第三版對所有標本進行分離、培養，嚴格按照無菌操作技術規范，同時接種血瓊脂平板和巧克力平板。采用上海新苗 WJ-160A-Ⅲ型CO2培養箱，力康HFsafe-1200生物安全柜。將分純的菌株選用法國梅里埃公司的API鑒定系統進行鑒定；選用英國Oxoid公司的MH瓊脂、血瓊脂平板和藥敏紙片進行藥敏試驗，肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌的藥敏結果按照美國臨床實驗室標準化委員會（CLSI）2013年版標準判斷結果，卡他莫拉菌的藥敏結果按照CLSI的2010年M45-A2版標準判定結果。

1.2.3 質控菌株 采用流感嗜血桿菌ATCC49247，肺炎鏈球菌ATCC49619標準菌株進行質控，質控合格方可進行藥敏試驗。

1.2.4 β-內酰胺酶檢測 采用頭孢硝噻吩紙片定性檢測流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌的β-內酰胺酶。

1.3 統計學處理 采用Whonet5.6系統進行統計學分析。

2 結 果

2.1 細菌分布 2012年1月至2014年11本院痰標本中共分離173株苛養菌，其中卡他莫拉菌53株，肺炎鏈球菌89株，流感嗜血桿菌31株。各年度苛養菌的分布情況詳見表1。

2.2 藥敏試驗 卡他莫拉菌、肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌對15種抗菌藥物的藥敏試驗結果見表2。檢測出產β-內酰胺酶的卡他莫拉菌41株，流感嗜血桿菌9株。

3 討 論

呼吸道感染（RTI）是一種常見多發病，高居門診就診患者人數的首位［2］。苛養菌主要引起RTI，通常以冬季帶菌率較高，發病也增多。據統計，我國每年有近5億人感染呼吸系統疾病，7歲以下兒童平均每人每年患急性呼吸道感染3～4次［3］。呼吸道感染是抗菌藥物使用頻率最高、用量最多的疾病。對于肺部重癥感染的患者，至關重要的是從痰培養中及時找出病原菌，使臨床快速準確地選擇抗菌藥物，能夠對患者進行有效的治療。

本次分析結果如表2所示，在1 374株呼吸道感染患者痰培養中分離出苛養菌173株，其中肺炎鏈球菌對萬古霉素的敏感率100%，并且未發現對青霉素中介或耐藥。卡他莫拉菌、流感嗜血桿菌對四環素的敏感率達80%以上，然而對肺炎鏈球菌的耐藥率則高達80%；肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌對環丙沙星和左氧氟沙星的敏感率為100%，喹諾酮類藥物適合成人使用，但由于其腎毒性作用不適合用于兒童；流感嗜血桿菌對第三代頭孢菌素和利福平的敏感率為100%。對阿莫西林/克拉維酸的敏感率為90.0%，較之氨芐西林的敏感率（68.5%）提高了21.5%左右，這與國內相關文獻報道基本相近［4-6］。另外，卡他莫拉菌對紅霉素和阿奇霉素的敏感率為100.0%。卡他莫拉菌產β-內酰胺酶率高達77.3%，β-內酰胺酶的產酶率不斷增高，在1976年前，世界上并無產β-內酰胺酶流行菌株的報道，然而20世紀80年代后期，英國報道90.0%的卡他莫拉菌產β-內酰胺酶。在中國臺灣有97.8%的產酶菌株的報道［7］。RTI疾病治療的關鍵在于及時地明確致病菌和合理使用抗菌藥物。然而，由于濫用抗菌藥物，導致患者菌群失調，耐藥菌株逐年增多，耐藥菌感染逐漸成為除癌癥、心腦血管疾病和AIDS外威脅人類生命健康的第四大醫學問題［8］。

目前，本院仍然存在以下問題：由于臨床對微生物學檢驗的重要性認識不足，導致留取標本的合格率低；對于回報的檢驗結果，臨床總以個人的“標準”加以衡量，受控于經驗性用藥的理念，致使耐藥菌株不斷增多的問題更加棘手，還時常被能夠選擇的抗菌藥物較少而困擾；相應的檢驗設備和科研條件不足等，以上都是限制本院病原學診斷發展的重要影響因素。綜上所述，苛養菌引起的呼吸道感染，臨床治療應按照《抗菌藥物臨床應用管理辦法》，根據藥敏試驗結果，合理使用抗菌藥物，以有效提高治愈率［9-12］。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2015.17.049

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1673-4130（2015）17-2566-02

2015-04-08）