1 674例新生兒耳聾基因篩查結果分析

黃美瓊，葛晶晶，張廣清，劉冬霞

（廣東省清遠市婦幼保健院檢驗科，廣東清遠 511515）

1 674例新生兒耳聾基因篩查結果分析

黃美瓊，葛晶晶，張廣清，劉冬霞

（廣東省清遠市婦幼保健院檢驗科，廣東清遠 511515）

目的分析新生兒耳聾易感基因分子流行病學特征。方法對1 674例新生兒進行聽力及耳聾易感基因篩查，分析其流行病學特征。結果1 674例新生兒中，檢出耳聾易感基因異常37例，其中176 del 16突變2例，299 del AT雜合突變5例，235 del C突變16例，IVS7－2A＞G雜合突變9例，2168A＞G突變1例，538C＞T雜合突變2例，1494C＞T突變2例，陽性率為2.21%。結論聽力篩查聯合耳聾易感基因篩查能夠從分子水平發現有可能存在聽力損傷的新生兒，為早期發現、預測耳聾的發生及制定干預措施提供了有利的參考。

新生兒； 耳聾基因； 聽力篩查

先天性聽力損失是常見的新生兒出生缺陷，早期發現聽力障礙是預防因聽力下降影響兒童語言發育的重要途徑［1－2］。常規體檢很難在患兒1歲以內發現聽力障礙，導致錯過最佳的干預和康復時機。有研究顯示，國外新生兒聽力損失發病率達0.1%～0.2%［3］，國內為0.3%～0.5%［4］。遺傳性因素是引起先天性聽力損失的重要因素之一。隨著耳聾基因研究的深入，發現70%的遺傳性耳聾屬于非綜合征性耳聾，按遺傳模式又被分為常染色體遺傳、X染色體連鎖遺傳及線粒體遺傳［5］。本研究對1 674例新生兒耳聾易感基因篩查結果進行分析。現將研究結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2014年4～11月于本院產科病房出生的新生兒1 674例，男914例、女760例，男、女比例為1.20∶1。

1.2 方法 在產婦及其家屬同意并簽署知情同意書后，在新生兒出生后第3天，進行新生兒聽力篩查；采用含有聽力篩查信息和血樣采樣信息的新生兒耳聾基因采樣卡，采集新生兒微量足跟血，對4個耳聾易感基因的9個位點進行篩查，包括SLC26A4（IVS7－2A＞G、2168A＞G），GJB3（538C＞T）、GJB2 （35 del G、176 del 16、235 del C、299 del AT）、線粒體DNA 12S r RNA（1555A＞G、1494C＞T）。選擇耳聾基因采樣卡直徑為0.2 mm的血斑，經去離子水洗滌，自然干燥后，抽提DNA，聚合酶鏈反應擴增目的基因，堿性磷酸酶處理擴增產物，采用基質輔助激光解吸/電離飛行時間質譜技術進行質譜檢測，采用SpectroREAD軟件對測序結果進行對比，確定基因型。

2 結 果

2.1 新生兒耳聾易感基因篩查結果 1 674例新生兒接受耳聾易感基因篩查，37例表現為異常，其中176 del 16突變2例，299 del AT雜合突變5例，235 del C突變16例，IVS7－2A＞G雜合突變9例，2168A＞G突變1例，538C＞T雜合突變2例，1494C＞T突變2例，陽性率2.21%，見表1。2.2 新生兒聽力及易感基因聯合篩查結果分析 1 674例新生兒中，1 522例耳聾易感基因篩查及聽力篩查均未見異常，易感基因篩查及聽力篩查均異常11例，見表2。聽力篩查雙耳未通過51例，其中235 del C雜合突變2例，IVS7－2雜合突變1例；左耳未通過42例，基因篩查均未發現異常；右耳未通過33例，其中235 del C雜合突變1例；雙耳均通過的新生兒中，有33例兒童易感基因異常。

3 討 論

耳聾是最常見的感覺性疾病，遺傳和多種環境因素都有可能導致耳聾的發生，其中遺傳因素所致耳聾約占50%～60%。遺傳性耳聾是一種特別的遺傳異質性疾病，與多種耳聾基因突變有關［6－7］。遺傳型耳聾有多種不同的類型，目前已發現40多耳聾基因會導致不同程度的耳聾。新生兒聽力篩查已經普及，也是早期發現、診斷聽力障礙的重要方法［8］，然而，單純聽力篩查無法及時發現藥物性耳聾、遲發型耳聾等出生時未出現聽力下降的新生兒，存在漏診風險［9－10］。因此，在新生兒聽力篩查的基礎上，開展耳聾基因篩查，分析易感基因突變的流行病學特點，明確遺傳性耳聾高危人群，并實施有效的干預，對降低耳聾發病率有重要意義。

GJB2基因編碼的Cx26蛋白廣泛分布于耳蝸支持細胞及結締組織，235位點C堿基純合性缺失，會導致移碼突變，導致無功能的Cx26蛋白的產生，影響鉀離子回流入內淋巴液的循環受阻，引起Corti器鉀中毒，導致感音神經性耳聾［11－12］。國內研究顯示，235 del C在耳聾致病性突變中占78.79%［13］。SLC26A4基因編碼的Pendrin蛋白主要表達于內耳淋巴管、橢圓囊、內淋巴囊與球囊斑相連的非感覺上皮細胞，介導氯離子的轉運，維持內淋巴液的離子平衡［13］。氯離子轉運障礙可導致內淋巴液成分改變，損傷感覺上皮細胞，滲透壓及成分的改變導致膜迷離結構的改變，進而引起前庭水管及耳蝸結構改變導致耳聾的發生，主要表現為大前庭水管綜合征（LVAS）［14］。線粒體DNA突變與感音神經性耳聾關系密切，其中12S rRNA A1555G突變已被證實是氨基糖苷類抗菌藥物導致的非綜合征型感音神經性聽力損失（SNHL）的發病分子基礎［15］。趙輝等［16］在母系遺傳的SNHL中新發現了C1494T突變，該突變與A1555G突變都能導致對氨基糖苷類抗菌藥物致聾易感。本研究對1 674例新生兒進行了9個常見耳聾易感基因位點篩查，結果顯示37例表現為異常，其中以235 del C突變發生率最高，IVS7－2A＞G雜合突變次之，易感基因篩查總異常率為2.12%。

綜上所述，聽力篩查聯合耳聾易感基因篩查，能夠從分子水平發現有可能存在聽力損傷的新生兒；對遺傳性耳聾高危患兒進行定期聽力檢查，為早期發現、預測耳聾的發生及制定干預措施提供了有利的參考，對藥物引起的耳聾高危患兒的終生用藥提供指導，對降低耳聾發病率有重要意義。

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Screening analysis of deafness gene in neonatus

Huang Meiqiong，Ge Jingjing，Zhang Guangqing，Liu Dongxia
（Department of Clinical Laboratory，Maternal and Child Health Hospital of Qingyuan，Qiangyuan，Guangdong 511515，China）

ObjectiveTo analyze the molecular epidemiology characteristic of neonatal deafness susceptibility genes.MethodsHearing screening and deafness susceptibility genes screening were performed in 1 674 cases of newborn to analyze the epidemiological characteristics.ResultsAmong 1 674 cases of neonatus，37 cases were with deafness susceptibility gene abnormalities，including 2 cases of 176 del 16 mutations，5 cases of 299 del AT heterozygous mutation，16 cases of 235 del C mutation，9 cases of IVS7－2A＞G heterozygous mutations，1 case of 2168A＞G mutation，2 cases of 538C＞T heterozygous mutation，2 cases of 1494C＞T mutation，and the positive rate was 2.21%.ConclusionHearing screening combined with deafness susceptibility gene screening could detect possible hearing loss children from molecular level，providing favorable reference for the early detection，predict and interventions.

newborn； deafness gene； hearing screening

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.10.034

A

1673－4130（2015）10－1398－02

2015－01－14）

黃美瓊，女，副主任技師，主要從事臨床免疫學檢驗研究。