G試驗對COPD合并侵襲性肺部真菌感染的診斷性能評價＊

張 樂，尹 寧

（新疆醫(yī)科大學(xué)第六附屬醫(yī)院檢驗科，新疆烏魯木齊 830002）

G試驗對COPD合并侵襲性肺部真菌感染的診斷性能評價＊

張 樂，尹 寧△

（新疆醫(yī)科大學(xué)第六附屬醫(yī)院檢驗科，新疆烏魯木齊 830002）

目的評價（1，3）－β－D葡聚糖檢測（G試驗）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并侵襲性肺部真菌感染（IPFI）診斷中的應(yīng)用價值。方法選取有IPFI高危因素的96例COPD患者，將患者分為IPFI組與非IPFI組。對納入研究者進(jìn)行G試驗，并同時留取患者痰液做傳統(tǒng)方法（痰涂片和真菌培養(yǎng)）的檢查。通過受試者工作特征曲線（ROC）計算G試驗和傳統(tǒng)方法的曲線下面積，比較兩項檢查的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值和曲線下面積。結(jié)果以20 pg/m L為臨界值，IPFI組的（1，3）－β－D葡聚糖濃度明顯高于非IPFI組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），G試驗的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為89.5%、89.6%、68.0%、97.2%。G試驗和傳統(tǒng)方法的ROC曲線下面積分別為0.942和0.790。結(jié)論G試驗較傳統(tǒng)方法簡便、省時且陽性率高，可作為COPD合并IPFI早期診斷指標(biāo)為臨床提供診療依據(jù)。

（1，3）－β－D葡聚糖； 慢性阻塞性肺疾病； 肺部真菌感染

隨著空氣污染加重，人口老齡化速度加快，慢性阻塞性肺疾病（COPD）患病率也逐年升高。據(jù)預(yù)測2020年COPD在全球主要疾病引起的病死率將由1990年的第6位上升至第3位。在中國，40歲以上的居民COPD患病率高達(dá)8.2%，在主要致死性疾病排名中僅次于腫瘤和腦血管疾病，位居第3位［1］。而這些COPD的患者本身免疫力低下，加之廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑及各種侵襲性操作的影響，其發(fā)生侵襲性肺部真菌感染（IPFI）的概率大大增加。IPFI的臨床癥狀不典型，傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)及痰涂片檢查陽性率低、時效性差，因而，如何能在真菌感染早期進(jìn)行診斷和干預(yù)成為其治療效果和預(yù)后是否良好的關(guān)鍵。本研究旨在比較（1，3）－β－D葡聚糖檢測（G試驗）與傳統(tǒng)檢測方法的診斷效能，探討G試驗在COPD合并IPFI中的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2013年3月至2014年4月在本院呼吸科病房住院的96例存在真菌感染高危因素的COPD患者，男51例、女45例，綜合分析患者的宿主因素、臨床特征、微生物檢查和組織病理學(xué)特征，根據(jù)IPFI的診斷標(biāo)準(zhǔn)與治療原則（草案）［2］將納入對象分為:確診、臨床診斷（不以G試驗陽性作為診斷標(biāo)準(zhǔn)）、擬診和非IPFI。其中，確診、臨床診斷及擬診患者作為IPFI組，非IPFI的患者作為非IPFI組。所有納入研究者在近期未給予抗真菌治療且排除其他部位真菌感染。IPFI組，19例，男11例、女8例，年齡50～83歲，平均（71.3＋8.2）歲；非IPFI組，77例，男40例、女37例，年齡49～90歲，平均（69.7±10.3）歲。兩組間年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

1.2 儀器與試劑 血漿（1，3）－β－D葡聚糖的檢測使用北京金山川科技發(fā)展公司生產(chǎn)的GKT－5 M SET動態(tài)真菌檢測試劑盒、T02智能恒溫儀、冰浴槽及MB80微生物快速動態(tài)檢測系統(tǒng)。痰涂片檢測真菌使用革蘭染色，痰真菌培養(yǎng)使用沙保羅培養(yǎng)基，以《全國臨床檢驗操作規(guī)程》［3］為標(biāo)準(zhǔn)，嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。1.3 方法 所有患者采集空腹靜脈血2 mL，采用MB－80微生物動態(tài)快速檢測系統(tǒng)檢測血漿（1，3）－β－D葡聚糖濃度，大于20 pg/mL為陽性。同時，留取痰液做傳統(tǒng)方法的檢查，標(biāo)本的留取及處理方法以《全國臨床檢驗操作規(guī)程》［3］為標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格執(zhí)行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。符合正態(tài)分布的計量資料以表示，組間比較采用t檢驗；IPFI組與非IPFI組G試驗結(jié)果為非正態(tài)分布，采用中位數(shù)及四分位數(shù)表示［M（P25～P75）］，其組間比較采用獨立樣本秩和檢驗；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。計算G試驗和傳統(tǒng)方法的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值，繪制受試者工作特征曲線（ROC）圖，根據(jù)兩種檢查的曲線下面積比較診斷效能。

2 結(jié) 果

2.1 G試驗 以大于20 pg/m L為陽性診斷閾值，在96例研究對象中，G試驗陽性25例，其中IPFI組17例；G試驗陰性的71例中，有2例為IPFI組符合臨床診斷的患者。兩組間葡聚糖水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（Z＝85.00，P＜0.05），見表1。

2.2 G試驗與傳統(tǒng)方法的比較 G試驗的靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值分別為89.5%、89.6%、68.0%、97.2%，傳統(tǒng)方法的為63.2%、94.8%、75.0%、91.3%，ROC曲線下面積G試驗為0.942，大于傳統(tǒng)方法的0.790，見圖1。

3 討 論

近年來，IPFI的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，長期住院治療和多種侵襲性操作是其主要危險因素［4］。IPFI在侵襲性真菌病中占首位，感染的病原菌以白色念珠菌和曲霉菌最為多見［5］，其中白色念珠菌的病死率為30%～40%，曲霉菌的病死率高達(dá)50%～100%。目前認(rèn)為深部真菌感染時條件致病真菌在體內(nèi)被機體免疫系統(tǒng)破壞，真菌細(xì)胞壁中的葡聚糖抗原成分大量釋放入血，導(dǎo)致其檢測值升高［6］。傳統(tǒng)的診斷方法由于時效性差，一般需要5～7 d，且口咽部存在念珠菌及曲霉菌的定植，培養(yǎng)結(jié)果無法區(qū)分是定植還是感染，而G試驗檢測只需要2 h，遠(yuǎn)遠(yuǎn)早于真菌培養(yǎng)結(jié)果的報告時間。有研究表明G試驗檢測值可以區(qū)分出定植或感染，當(dāng)濃度超過20 pg/m L時作為肺念珠菌感染的依據(jù)［7］。此外，對真菌培養(yǎng)陽性者進(jìn)行血清（1，3）－β－D葡聚糖檢測，也可以區(qū)分出感染和定植。因而G試驗越來越受到廣泛關(guān)注，現(xiàn)已被歐洲癌癥研究治療及真菌研究組織（EORTC/MSG）認(rèn)定作為真菌感染的微生物學(xué)依據(jù)［8］。

本研究中，G試驗的靈敏度和特異度分別為89.5%、89.6%，日本的一項研究結(jié)果是83.3%和92.6%［9］。國內(nèi)很多研究的靈敏度和特異度也均在80%以上［10－12］，與本研究的結(jié)果相仿。相比而言，傳統(tǒng)方法的特異度較高，但其靈敏度只有63.2%，這與方法本身的陽性率較低有關(guān)。所以，在實際工作中可以將兩種方法聯(lián)合使用以提高診斷效率。

然而，G試驗也存在一定的局限性。除結(jié)核分枝桿菌和隱球菌不能被檢出外，經(jīng)過經(jīng)驗性或預(yù)防性抗真菌治療的患者也會出現(xiàn)假陰性的結(jié)果。本研究中77例非IPFI組的患者中有8例出現(xiàn)假陽性結(jié)果，考慮可能與標(biāo)本污染或使用了β內(nèi)酰胺類藥物有關(guān)。總而言之，G試驗是診斷IPFI的早期、快速、有效的方法，臨床醫(yī)生在發(fā)現(xiàn)有可疑真菌感染時就該早期監(jiān)測，并做相應(yīng)的培養(yǎng)及實驗室檢查以輔助診斷，同時根據(jù)患者的臨床表現(xiàn)、影像學(xué)特征等其他證據(jù)及早給予相應(yīng)治療，以期提高治愈率并最終降低病死率。

［1］Zhong N，Wang C，Yao W，et al.Prevalence of chronic obstructive pulmonary disease in China:a large，population－based survey［J］.Am J Respir Crit Care Med，2007，176（8）:753－760.

［2］中華內(nèi)科雜志編輯委員會.侵襲性肺部真菌感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)與治療原則（草案）［J］.中國實用內(nèi)科雜志，2006，45（21）:1748－1751.

［3］葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程［M］.3版.南京:東南大學(xué)出版社，2006:725－730.

［4］Presterl E，Parschalk B，Bauer E，et al.Invasive fungal infections and（1，3）－beta－D－glucan serum concentrations in long－term intensive care patients［J］.Int J Infect Dis，2009，13（6）:707－712.

［5］William F，Wright DO，MPH，et al.（1－3）－β－D－Glucan Assay:a review of its laboratory and clinical application［J］.Labmedicine，2011，42（11）:679－685.

［5］Wright WF，Overman SB，Ribes JA，et al.（1－3）－β－D－Glucan Assay:a review of its laboratory and clinical application［J］.Lab Med，2011，11（42）:679－685.

［6］Mohr JF，Sims C，Paetznick V，et al.Prospective survey of（1→3）－beta－D－glucan and its relationship to invasive candidiasis in the surgical intensive care unit setting［J］.J Clin Microbiol，2011，49 （1）:58－61.

［7］Richards EP，Mohammadi S，F(xiàn)orrest GN.1－3β－D－glucan:From Diagnosis to Prognosis［J］.Curr Fungal Infect Rep，2013，7（1）: 15－20.

［8］Wingard JR.Have novel serum markers supplanted tissue diagnosis for invasive fungal infections in acute leukemia and transplantation［J］.Best Pract Res Clin Haematol，2012，25（4）:487－491.

［9］Yoshida K，Shoji H，Takuma T，et al.Clinical viability of Fungitell，a new（1→3）－β－D:－glucan measurement kit，for diagnosis of invasive fungal infection，and comparison with other kits available in Japan［J］.J Infect Chemother，2011，17（4）:473－477.

［10］鮑禎，張慶憲，焦鵬飛，等.G試驗檢測在慢性阻塞性肺疾病合并侵襲性肺部真菌感染患者中的診斷價值［J］.中國實用醫(yī)刊，2014，41（6）:46－47.

［11］左向華，陳建魁，于農(nóng)，等.侵襲性真菌感染患者1，3－β－D葡聚糖檢測的臨床價值［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2010，31（3）:220－221.

［12］李光迪，王應(yīng)芳，施鑫鶴，等.血清（1－3）－β－D－葡聚糖在深部真菌感染診斷中的應(yīng)用［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2010，20（20）:3244－3246.

The performance evaluation of G test on patients with invasive pulmonary fungal infections complicated with chronic obstructive pulmonary disease＊

Zhang Le，Yin Ning△
（Clinical Laboratory，the Sixth Hospital Affiliated to Xinjiang Medical University，Urumchi，Xinjiang 830002，China）

ObjectiveTo evaluate the value of（1，3）－β－D－glucan（G test）in the diagnosis of invasive pulmonary fungal infection （IPFI）in patients with chronic obstructive pulmonary disease（COPD）.Methods96 COPD patients with high risk of IPFI were enrolled in the study，and were divided into IPFI group and non－IPFI group.The G test were performed on those people while the traditional methods sputum smear and fungal culture were also performed.The（1，3）－β－D－glucan concentrations of IPFI group and non－IPFI group were compared，and then the areas under receiver operating characteristic curve（ROC）were calculated.The sensitivity，specificity，positive predictive value，negative predictive value，and the area under ROC of the two methods（G test and traditional methods）were compared.ResultsThe sensitivity，specificity，positive predictive value，negative predictive value of G test were 89.5%，89.6%，68.0%，97.2%，respectively，when 20 pg/mL was the critical value.Areas under curve were 0.942 for G test，and 0.790 for traditional method.ConclusionThe detection of（1，3）－β－D－glucan might be faster and with higher positive rate than traditional method，and could be used for the early diagnosis of IPFI，provide reference for the treatment.

（1，3）－β－D－glucan； chronic obstructive pulmonary disease； pulmonary fungal infection

10.3969/j.issn.1673－4130.2015.10.017

A

1673－4130（2015）10－1360－02

2015－03－10）

新疆醫(yī)科大學(xué)科研創(chuàng)新基金立項項目（XJC2012152）。 作者簡介:張樂，女，檢驗技師，主要從事臨床微生物學(xué)與檢驗的研究。△

，E－mail:yinningyyd＠126.com。