阿米洛利與卡托普利對豚鼠肥厚性心力衰竭模型的影響

林雪霞，陳志良

（1.邢臺醫學高等專科學校生理教研室，河北 邢臺054000；2.冀中能源邢臺礦業集團總醫院手術室，河北 邢臺054000）

阿米洛利是一種保鉀性利尿劑，通過抑制Na＋-H＋交換使水鈉重吸收減少，增加尿量。除利尿效應外，阿米洛利還具備拮抗缺血再灌注損傷、抗心律失常、降低血小板聚集率藥理效應，已有實驗證明阿米洛利能抑制豚鼠冠狀動脈結扎術引起的左心室重構。卡托普利作為典型的的血管緊張素轉換酶抑制劑，長期廣泛用于高血壓治療，對預防左心室肥厚亦有效果，并可抑制豚鼠腎性高血壓引起的左心室肥厚模型產生的血小板聚集。本研究觀察聯合應用阿米洛利與卡托普利對不完全阻斷腹主動脈造就的豚鼠肥厚性心力衰竭（left ventricular hypertrophy，LVH）模型引起的左心室肥厚和血小板聚集的抑制效果，報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 豚鼠35只，成年健康雄性，體質量（272±28）g，購自河北省實驗動物中心，質量合格，證書編號SYXK（冀2008-0023）。聯合組（7只）：豚鼠行腹主動脈不完全阻斷術，術后第2周起灌服阿米洛利（5mg·kg-1·d-1）＋卡托普利（6mg·kg-1·d-1），連續4周；阿米洛利預防組（7只）：豚鼠行腹主動脈不完全阻斷術，術后第2周起灌服阿米洛利（5mg·kg-1·d-1）＋與卡托普利等體積蒸餾水，連續4周；卡托普利預防組（7只）：豚鼠行腹主動脈不完全阻斷術，術后第2周起灌服卡托普利（6mg·kg-1·d-1）＋與卡托普利等體積蒸餾水，連續4周；LVH對照組（7只）：豚鼠行腹主動脈不完全阻斷術，術后第2周起，灌服與阿米洛利＋卡托普利等體積蒸餾水，連續4周；假手術對照組（7只）：豚鼠開腹后縫合，術后第2周起，灌服與阿米洛利＋卡托普利等體積蒸餾水，連續4周。

1.2 腹主動脈不完全阻斷術 參照文獻方法，對豚鼠行腹部正中切口，分離出腎動脈近心端腹主動脈約1cm，將7號針頭緊貼在腹主動脈上，平行放置后將二者結扎在一起，而后將針頭抽出，使腹主動脈處于不完全狹窄狀態，術后給予青霉素50 000U／d，連續7d。術后3～5d豚鼠心肌出現肥厚，2～3周肥厚穩定。

1.3 觀測指標

1.3.1 左心室濕質量／體質量 動物處死前稱質量并記錄，采血處死開胸，取心臟，去除兩心房、右心室和大血管，用濾紙吸附水分，用電子天平稱量左心室濕質量，計算左心室濕質量／體質量。

1.3.2 血小板聚集率 采血時做豚鼠頸總動脈插管，血液放入3.8%檸檬酸鈉中，離心2次，分別分離出富血小板血漿和貧血小板血漿。按文獻方法，以4U／mL的Threonin和4μmol／L的ADP為誘導劑，用TYXN-91型血小板聚集儀測量血小板的聚集率。

1.4 統計學方法 應用SPSS19.0統計學軟件處理數據，計量資料以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用q檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

LVH組豚鼠左心室濕質量／體質量、血小板聚集率均較假手術對照組明顯增加（P＜0.01）；而阿米洛利預防組、卡托普利預防組、聯合組較LVH組左心室濕質量／體質量和血小板聚集率依次明顯降低，聯合組降低最多（P＜0.05或＜0.01），見表1。

表1 各組豚鼠左心室肥厚和血小板聚集率比較（n=7，±s）

表1 各組豚鼠左心室肥厚和血小板聚集率比較（n=7，±s）

＊P＜0.01與假手術對照組比較 ＃P＜0.05與LVH組比較△P＜0.05與阿米洛利預防組比較 ☆P＜0.01與卡托普利預防組比較（q檢驗）

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3 討 論

左心室肥厚是心臟外周阻力增加的適應性反應，既有明確的生理意義，亦有重要的病理意義。左心室肥厚包括心肌肥大和心肌間質增殖2個基本過程。本研究采用豚鼠腹主動脈不完全狹窄后外周阻力增加制造心力衰竭模型，術后豚鼠左心室濕質量／體質量較假手術組有顯著增加，表明造模成功。而本研究預防性給予阿米洛利和卡托普利，使左心室濕質量／體質量顯著低于LVH組并相對接近假手術對照組，證明阿米洛利和卡托普利可有效抑制一定程度左心室肥厚的形成。心肌肥厚時循環系統組織內Ca2＋濃度增加［1-2］，而Ca2＋能夠參與多種肥厚因子如Ang-Ⅱ發生的致肥厚作用。阿米洛利能夠抑制Na＋-H＋交換，進而減少Na＋-Ca2＋交換，還可阻滯L-型Ca2＋通道［3］，降低心肌細胞和血管平滑肌細胞內Ca2＋超載。卡托普利可使血液和心肌內的Ang-Ⅱ含量下降，并阻滯電壓門控Ca2＋通道，降低Ca2＋內流［4］，從而降低細胞內 Ca2＋負荷，達到預防心肌肥厚的作用。本研究結果顯示，阿米洛利和卡托普利聯合用藥后左心室濕質量／體質量較阿米洛利組和卡托普利組均低。表明阿米洛利和卡托普利在抑制心肌肥厚方面還存在協同作用。

本研究結果還顯示，阿米洛利組和卡托普利組均比LVH組血小板聚集率低。表明阿米洛利和卡托普利均可顯著降低血小板聚集率。其作用機制可能是通過抑制血小板的Na＋-H＋交換來抑制Ca2＋內流［5-6］，使血小板胞內 Ca2＋濃度下降［7-9］，從而抑制血小板聚集［10］。本研究聯合用藥后血小板聚集率較阿米洛利組和卡托普利組均低的現象可看出，阿米洛利和卡托普利在抑制血小板聚集率方面亦存在協同作用。

總之，Na＋-H＋交換抑制劑阿米洛利與血管緊張素轉換酶抑制劑卡托普利都能夠預防外周阻力增加引起的心肌肥厚和血小板聚集，并存在協同效應。這為臨床上聯合用藥治療相關疾病提供了一定理論依據。

［1］ Liu XR，Liu Q，Chen GY，et al.Down-regulation of TRPM8in pulmonary arteries of pulmonary hypertensive rats［J］.Cell Physiol Biochem，2013，31（6）：892-904.

［2］ Sah R，Mesirca P，Mason X，et al.Timing of myocardial trpm7 deletion during cardiogenesis variably disrupts adult ventricular function，conduction，and repolarization［J］.Circulation，2013，128（2）：101-114.

［3］ Storm P，Klausen TK，Trulsson M，et al.A unifying mechanism for cancer cell death through ion channel activation by HAMLET［J］.PLoS One，2013，8（3）：e58578.

［4］ Shin HJ，Takeda M，Enomoto A，et al.Interactions of urate transporter URAT1in human kidney with uricosuric drugs［J］.Nephrology（Carlton），2011，16（2）：156-162.

［5］ Cerecedo D，Martínez-Vieyra I，Alonso-Rangel L，et al.Epithelial sodium channel modulates platelet collagen activation［J］.Eur J Cell Biol，2014，93（3）：127-136.

［6］ Gupta S，Sharma B.Pharmacological modulation of Ⅰ （1）-imidazoline andα2-adrenoceptors in sub acute brain ischemia induced vascular dementia［J］.Eur J Pharmacol，2014，723：80-90.

［7］ Priya SS，Rekha MR，Sharma CP.Pullulan-protamine as efficient haemocompatible gene delivery vector：synthesis and in vitrocharacterization［J］.Carbohydr Polym，2014，102：207-215.

［8］ Mollace V，Muscoli C，Dagostino C，et al.The effect of peroxynitrite decomposition catalyst MnTBAP on aldehyde dehydrogenase-2nitration by organic nitrates：role in nitrate tolerance［J］.Pharmacol Res，2014，89：29-35.

［9］ Zhou W，Abdusalam E，Abliz P，et al.Effect of Cydonia oblonga Mill.fruit and leaf extracts on blood pressure and blood rheology inrenal hypertensive rats ［J］.J Ethnopharmacol，2014，152（3）：464-469.

［10］ Jasi?ska-Stroschein M，Orszulak-Michalak D.The current approach into signaling pathways in pulmonary arterial hypertension and theirimplication in novel therapeutic strategies［J］.Pharmacol Rep，2014，66（4）：552-564.