諶劍波,張麗君,吳 華,黎曉敏,吳建云(.西南大學動物科技學院,重慶北碚40075;.重慶市榮昌縣畜牧獸醫局,重慶榮昌40460;.重慶市北碚區農委,重慶北碚400700)
渝西地區母豬子宮內膜炎病原菌分離鑒定及耐藥性分析
諶劍波1,張麗君2,吳華3,黎曉敏1,吳建云1
(1.西南大學動物科技學院,重慶北碚400715;2.重慶市榮昌縣畜牧獸醫局,重慶榮昌402460;3.重慶市北碚區農委,重慶北碚400700)
母豬子宮內膜炎是一種母豬產后的常見病,可引起母豬發情不正常,或發情正常但屢配不孕。它是規模化養豬場母豬高淘汰率的重要疾病之一,給養豬業造成巨大經濟損失。調查[1]顯示,在養豬業中,約20%分娩母豬患有子宮內膜炎。渝西地區是我國重要的生豬生產區,子宮內膜炎在當地豬場也常有發生。我們收集了渝西地區部分規模化種豬場母豬子宮內膜炎病例進行細菌分離試驗,并進一步做了常用抗生素對分離細菌的敏感試驗,試驗結果可為渝西地區該病的臨床治療和預防提供理論與技術支持。
1.1試驗動物從渝西地區部分規模化種豬場選取具有相關臨床癥狀的疑似患病母豬,通過直腸檢查、子宮頸口黏液實驗室檢驗[2]等方法綜合確診為患子宮內膜炎的母豬。
1.2培養基與試劑營養肉湯、血清瓊脂、營養瓊脂、甘露醇培養基、麥康凱瓊脂等均按常規方法配制。
1.3藥敏試片青霉素、鏈霉素、慶大霉素、強力霉素、丁胺卡那霉素、氨芐青霉素、阿奇霉素、環丙沙星、諾氟沙星和氧氟沙星,均購自上海金穗生物科技有限公司。
1.4病料采集對26頭經臨床診斷為子宮內膜炎的母豬先使用溫水清潔陰部,再用0.1%新潔爾滅消毒。然后將滅菌輸精管伸入子宮頸,采集1~1.5 mL子宮分泌物,立即注入滅菌的小試管中,冷藏、密封待用。整個過程盡量保持無菌操作,并做好標記。
1.5細菌分離鑒定將采集的子宮分泌物接種肉湯培養液,37℃培養24 h,然后劃線接種于瓊脂平板,37℃培養24 h,挑選典型菌落涂片、染色、鏡檢。根據菌落形態、菌體大小和染色特征再進一步培養。最后將分離菌株低溫保存。
1.6藥敏試驗采用紙片瓊脂擴散法[3]測定常用抗菌藥物的敏感性。本試驗共測定了分離菌株對渝西地區常用的青霉素、鏈霉素、慶大霉素等10種抗菌藥物的敏感性。試驗時測量抑菌圈直徑,參照CSLI的抗菌藥物敏感性試驗解釋標準[4]進行結果判定。未列入評價標準的參考同類藥物標準進行判定。
2.1細菌的分離鑒定對26個子宮分泌物樣本進行細菌分離培養和鑒定,結果(見表1),共檢出7種共51個菌株。其中葡萄球菌23株,占45.1%;鏈球菌10株,占19.6%;大腸桿菌14株,占27.5%。從檢測結果來看,單一病原菌引起子宮內膜炎發病情況較少,而多種細菌混合感染的情況較為嚴重,共22例,占總感染數的84.6%。

表1 母豬子宮內膜炎病原菌分離鑒定結果
2.2藥敏試驗對渝西地區母豬子宮內膜炎的主要致病菌(葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌)進行藥敏試驗,結果(表2)表明,葡萄球菌對青霉素、氨芐青霉素、強力霉素耐藥;對丁胺卡那霉素、阿奇霉素、環丙沙星、諾氟沙星較為敏感;鏈球菌對青霉素、鏈霉素、氨芐青霉素耐藥;對慶大霉素、阿奇霉素、環丙沙星和氧氟沙星較為敏感;大腸桿菌對青霉素、氨芐青霉素耐藥;對慶大霉素、環丙沙星、諾氟沙星和氧氟沙星較為敏感。幾種主要致病菌對丁胺卡那霉素、環丙沙星、諾氟沙星等藥物敏感性較高,可作為渝西地區治療母豬子宮內膜炎的主要藥物。

表2 常用抗菌藥對主要致病菌藥敏試驗結果/%
3.1在分離出的菌株中,檢出率前3名的分別是金黃色葡萄球菌23株(45.1%),大腸桿菌14株(27.5),鏈球菌10株(19.6%)。這說明引起渝西地區母豬子宮內膜炎的主要病原菌是葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌,與以往其他地區報道[5-6]結果相近。但近年來,由于環境污染、抗生素濫用等原因,單一病原菌引起母豬子宮內膜炎已較少發生,而多種細菌混合感染的情況已較為普遍。
3.2由于臨床長期不合理使用抗菌藥物,導致病原菌對常用抗菌藥物已產生耐藥性,尤其對于以前常用的青霉素等藥物更為明顯。環丙沙星、諾氟沙星、氧氟沙星等喹諾酮類藥物因以前臨床使用較少,對于主要致病菌仍有較強的敏感性,可在今后的臨床工作中作為主要的治療藥物使用。同時,在臨床用藥時要注意藥物的合理使用或交替使用,不要隨意加大劑量,暫停已產生明顯耐藥性的藥物。
3.3對于母豬子宮內膜炎的防治,除了治療時選用較為敏感的抗菌藥物外,還可以考慮中西醫結合治療。據報道[7],采用中西醫結合治療可在保證療效的同時,減少藥物在動物體內的殘留。
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通訊作者:吳建云,E-mail:jianyun1973@163.com
作者簡介:諶劍波(1981-),男,實驗師,碩士,主要從事獸醫學相關實驗教學工作,E-mail:34670344@qq.com
基金項目:中央高校基本科研業務費專項資金項目(XDJK2-013L095)
收稿日期:2014-04-03
中圖分類號:S852.65+1
文獻標志碼:B
文章編號:0529- 6005(2015)10- 0046- 02