四川煙草炭疽病的鑒定及防治技術研究

任文清，夏文明，張再剛，王鳳龍，孫惠青*

(1.四川省涼山州煙草公司會東分公司，四川會東 615200；2.中國農業科學院煙草研究所，山東青島 266101)

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四川煙草炭疽病的鑒定及防治技術研究

任文清1，夏文明1，張再剛1，王鳳龍2，孫惠青2*

(1.四川省涼山州煙草公司會東分公司，四川會東 615200；2.中國農業科學院煙草研究所，山東青島 266101)

[目的]鑒定四川煙草上的一種葉斑病害，并探討其防治技術。[方法]采用“柯赫氏法則”，對2012年在四川會東育苗溫室紅花大金元上發現的一種葉斑病害進行了鑒定，并研究了幾種藥劑對該病菌的防治效果。[結果]依據病害癥狀和病原形態特征確認為煙草炭疽病菌(ColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca)；75%百菌清600倍稀釋液、80%代森鋅800倍稀釋液、80%代森錳鋅800倍稀釋液、50%退菌特800倍稀釋液、50%福美雙500倍稀釋液對炭疽病有較好的防治效果。[結論]為煙草炭疽病的防治提供了參考。

煙草炭疽病；鑒定；防治

煙草炭疽病由半知菌六包盤孢(ColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca)引起[1]。煙草整個生育期均可發生，苗期發生普遍嚴重，發病初期葉片上發生水漬狀暗綠色小點，俗稱“雨斑”，嚴重時幼苗葉片病斑密布，成片爛掉，且大田期仍可繼續為害，嚴重影響煙草種植的經濟效益。除煙草外，炭疽病菌還侵染白菜、番茄、辣椒、茄子、瓜類、豆類等。煙草炭疽病菌在25～30 ℃的最適溫度下，潛育期僅48 h，水滴是病菌分生孢子傳播再侵染的重要條件，因此苗床低濕或大水漫灌、苗期多雨時病害發生重[2]。

煙草炭疽病在我國各煙區普遍發生，其中云南、湖南、江西等省發生較重，炭疽病菌的形態特征及防治的研究已有報道，但目前尚未見四川省關于炭疽病菌的研究報道[3-5]。2012年，在四川省會東縣育苗溫室中發現疑似煙草炭疽病的癥狀，葉片上病斑密度大，發病輕的苗床煙苗長勢衰弱，影響移栽。為確定引起該病害的病原菌，筆者從病害樣本中分離得到純培養物，采用“柯赫氏法則”測定其致病性，根據其形態學特征鑒定其病原，并對防治藥劑進行了篩選，以期為有效控制該病害提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料5種供試藥劑為50%退菌特(天津市興果農藥廠)、80%代森鋅(利民化工股份有限公司)、80%代森錳鋅(河北雙吉化工有限公司)、50%福美雙(河北萬特生物化學有限公司)、75%百菌清(海利爾藥業集團)。

1.2 方法

1.2.1病害調查及癥狀觀察。 2012年3～4月，在四川會東縣育苗溫室中烤煙紅花大金元上發生炭疽病，采集具典型特征的煙草葉片，觀察并記錄病害癥狀。

1.2.2病原菌的分離培養。發病葉片采自會東縣育苗溫室中烤煙紅花大金元，采用組織分離培養法。用手術刀切取病健交界處組織，用75%乙醇消毒10～15 s，無菌水洗滌3次，接到燕麥培養基上，25 ℃黑暗培養，定期觀察培養特征，并轉接在PDA培養基上，觀察培養特征。

1.2.3病原菌致病性檢測。待菌絲長滿PDA平皿且觀察到子實體時，用無菌水將其菌絲洗下，制備孢子懸液。接種前先用無菌注射器給葉片(烤煙紅花大金元)制造傷口，再將菌液涂抹在葉片上，26 ℃保濕培養，以不接菌為對照。記錄病癥病情，對接種發病的葉片再分離和鑒定。

1.2.4病原菌的形態鑒定。選取溫室自然發病和接種發病的具小黑點的病斑，挑取子實體制水玻片；將自然發病和經致病性測定后分離獲得菌株接種到PDA培養基上培養，觀察菌落形態，挑取菌絲制水玻片。顯微鏡下觀察菌絲形態、子實體形態及分生孢子形態特征。

1.2.5藥劑防治試驗。試驗設5個藥劑處理，即50%退菌特稀釋800倍、80%代森鋅稀釋800倍、80%代森錳鋅稀釋800倍、50%福美雙稀釋500倍和75%百菌清稀釋600倍。選取發病苗床，每藥劑處理設4次重復，每重復小區面積15 m2，以噴施等量清水為空白對照，小區隨機排列。將藥劑充分溶解于適量水中，進行葉面均勻噴霧，間隔7 d，噴施2次，期間澆水避免葉面噴灑，采用苗床潤濕法。末次藥后7 d調查病情指數，每小區采用5點取樣法，每點固定調查5～10株，記錄調查總葉數及各級病葉數，嚴重度分級應符合GB/T23222的規定。應用DPS軟件計算各藥劑處理防治效果，采用鄧肯新復極差法檢驗差異顯著性。

防治效果(%)(施藥前無基數)=(空白對照區病指-處理區病指)/空白對照區病指×100

2 結果與分析

2.1 病原菌的致病性在溫室中，用孢子懸液接種于健康紅花大金元葉片上，接種3 d開始觀察到直徑約1 mm暗綠色水漬狀小點，5 d后擴展為直徑2～5 mm的圓斑。中央灰白色，稍凹陷，邊緣明顯，呈赤褐色，稍隆起。10 d左右觀察到小黑點，即病菌的分生孢子盤，表現與溫室自然病株相同的癥狀，發病率100%(圖1)。對接種發病葉片進行再分離培養，獲得與接種病原菌形態一致的菌株。

2.2 病原菌的形態病原菌在燕麥培養基及PDA培養基上25 ℃黑暗培養7 d，菌落直徑為35 mm，邊緣白色，中間灰白色，有黑色小點，即分生孢子盤，其上著生剛毛黑色，直或稍彎曲，基部稍膨大，向頂端漸尖，大小55～400 μm，具1～3個隔膜。菌絲灰白色，無分隔。分生孢子長圓筒形，兩端鈍圓，單胞，無色，含有2個油球，大小10～80 μm。(圖2)。根據病害癥狀并結合病原菌形態特征分析結果，可以明確該病害的病原菌為煙草炭疽病(ColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca)。

2.3 不同藥劑對煙草炭疽病的防治效果由表1可知，末次藥后7 d，清水對照的病情指數為45.25，與清水對照相比，4種試驗藥劑的病情指數顯著降低，對煙草炭疽病的防效分別為63.73%、71.95%、68.58%、66.76%和64.05%，能有效控制苗床炭疽病的發展。

3 討論

煙草炭疽病于1922年由巴西首次報道，世界各國均有發生。該病菌主要隨病殘體在土壤及糞肥中越冬，亦能以分生孢子沾附于種子表面或以菌絲在種子內部越冬，成為苗床期的主要初侵染源。以分生孢子隨雨水沖濺傳播，水滴是再次侵染的重要條件，分生孢子在葉面具水膜的情況下萌發侵染[6]。大田排水不良，亦可導致成株發病，影響煙葉產量和質量。

表1 不同藥劑處理對煙草炭疽病的防治效果

注：同列數據后不同大、小寫字母分別表示處理間在0.01、0.05水平差異顯著。

煙草炭疽病在溫室中易于辨認，大田期易與氣候性斑點病混淆，均在葉片上產生褐色小斑點。炭疽病斑圓形或近圓形；初期暗綠色水漬狀，后期潮濕可產生黑色小粒點(分生孢子盤)，以此區分于氣候斑。

苗床期是煙草炭疽病的易發期，低濕、隱蔽及大水漫灌利于病害擴展，且病苗在移栽后遇雨水也易造成持續為害。因此，該病的防治關鍵期是苗床期。合理定苗，及時通風控制苗床濕度，以減少病原菌侵染機會。發病初期及時噴藥保護，可選用75%百菌清600倍稀釋液、80%代森鋅800倍稀釋液、80%代森錳鋅800倍稀釋液、50%退菌特800倍稀釋液、50%福美雙500倍稀釋液和58%甲霜靈錳鋅500倍稀釋液交替使用。每隔7～10 d噴灑一次，連續2～3次[7]，能有效控制病害發生，減輕為害。

[1] 朱賢朝，王彥亭，王智發.中國煙草病害[M].北京：中國農業出版社，2001:5-9.

[2] 歐高才.煙草苗期炭疽病發生規律及防治研究[J].湖南農業科學，1997(4):41-42.

[3] 張黎明.煙草炭疽病的發生及其防治研究進展[J].江西農業學報，2011,23(8):90-92.

[4] 李東升，張一揚.煙草炭疽病的形態特征和致病性研究[J].湖南農業科學，2009(5):98,100.

[5] 楊泮川.云南煙草炭疽病形態生理研究[J].云南農業大學學報，1992,7(4):199-205.

[6] SHEN S H，GOODWIN P，HSIANG T.Hemibiotrophic infection and identity of the fungus，Colletorichumdestructivum，causing anthracnose of tobacco[J].Mycol Res，2001,105(11):1340-1347.

[7] 朱友勇，王云月，竇友萍，等.甲霜靈錳鋅對煙草炭疽病的毒力及防治研究[J].煙草科技，1993(1):44-45.

Identification and Control of Tobacco Anthracnose in Sichuan

REN Wen-qing1，XIA Wen-ming1, ZHANG Zai-gang1，SUN Hui-qing2*et al

(1. Huidong Branch Company of Liangshan Tobacco Company, Huidong, Sichuan 615200; 2. Tobacco Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Science, Qingdao, Shandong 266101)

[Objective] The aim was to identify a leaf spot disease occurred in seedbed on ‘Honghuadajinyuan’ in Sichuan Province in 2012 and explore its control technology. [Method] A leaf spot disease occurred in seedbed on ‘Honghuadajinyuan’ in Sichuan Province in 2012 was identified by Koch’s Rule, and control effects of several regents on it were studied. [Result] The pathogen was identified asColletotrichumnicotianaeAverna-Sacca according to symptom on tobacco leaf and pathogen shape. The fungicides trial in greenhouse showed that the five fungicides like 75%Chlorothalonil 600 times, 80% Zineb 800 times, 80% Mancozeb 800 times, 50% Tuzet 800 times and 50% Thiram 500 times could control this disease. [Conclusion] The results provide reference for control of tobacco anthracnose.

Tobacco anthracnose; Identification; Control

國家煙草專賣局項目(110200902065)。

任文清(1966-)，男，四川閬中人，助理農藝師，從事煙草栽培研究。*通訊作者，副研究員，碩士，從事煙草植保研究。

2014-12-15

S 435.72

A

0517-6611(2015)04-128-03