長春市2013年手足口病病原學監測結果及分析

孫炳欣，許　爽，崔　薇，劉　紅，孫　宇，吳　靜*

(1.長春市疾病預防控制中心，吉林 長春130033;2.吉林省疾病預防控制中心，吉林 長春 130033)

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長春市2013年手足口病病原學監測結果及分析

孫炳欣1，許爽2，崔薇1，劉紅1，孫宇1，吳靜1*

(1.長春市疾病預防控制中心，吉林 長春130033;2.吉林省疾病預防控制中心，吉林 長春 130033)

摘要：目的了解2013年長春市手足口病流行的病原學及分布特征，為今后手足口病防治工作提供參考依據。方法用實時定量PCR(Real-time PCR)法對臨床診斷手足口病例標本進行核酸檢測。結果2013年1月-12月共采集病例標本376例手足口病例的標本，陽性率為68.94%，96.05%的病例在6歲以下，高發期在5月-9月。結論2013年長春市手足口患者以小于6歲的兒童為主，其主要病原是柯薩奇6型(CA6)，其次是腸道病毒71型(EV71)。

(ChinJLabDiagn,2015,19:0762)

手足口病( hand,foot and mouth disease,HFMD)通常是由腸道病毒引起的兒童急性傳染病，在人口密度較高的亞太地區廣泛流行[1，2]。其主要臨床特征為發熱和手、足、口腔和臀部等部位出現皮疹，患者主要為學齡前兒童。絕大多數HFMD患者預后良好，但少數嚴重的患者會出現腦炎、心肌炎、肺水腫和急性弛緩性麻痹等癥狀，個別危重患兒可導致死亡[3]。

手足口病的致病原因主要是由病毒引起，病毒主要是小RNA病毒科腸道病毒屬，包括柯薩奇病毒A(CVA)組的2,4,5,6,8,9,10,16型，柯薩奇病毒B(CVB)組的1,2,3,4,5型，腸道病毒71型(enterovirus 71,EV71)，埃可病毒(ECHO)等，其中以EV71及CA16最為常見[4]。目前根據國內手足口病監測結果的報道，各地均有非EV71非CA16型腸道病毒的檢出，但其型別和所占比例卻不清楚[5-7]。日本、芬蘭等國曾發生由非EV71非CA16腸道病毒引起的手足口病疫情，因此深入了解并日常監測這部分腸道病毒，對手足口病的防治具有重要意義。

2013年，長春市在手足口病常規監測的基礎上，對非EV71非CA16腸道病毒陽性標本送吉林省疾病預防控制中心病毒所進一步檢測分型，并對檢測結果進行分析。

1材料與方法

1.1　標本來源

2013年1月-12月長春市手足口病監測哨點醫院及長春地區各縣(市)區疾控中心采集的367例手足口病例的糞便，肛拭子，咽拭子標本。

1.2　方法

1.2.1標本的處理

糞便標本用含10%氯仿的生理鹽水處理，震蕩，2 000 rpm離心20 min后取上清進行RNA提取；其它標本充分震蕩后直接用于RNA提取。

1.2.2核酸提取

使用QIAGEN 公司的QIAamp○RViral RNA Mini Kit 試劑盒提取RNA。

1.2.3Real-time PCR反應

使用江蘇碩士生物科技有限公司的腸道病毒通用型/腸道病毒71型/柯薩奇A16型核酸檢測試劑盒，在QIAGEN Rotor-Gene Q Real-time PCR儀上對標本進行檢測同時分型。

1.2.4柯薩奇A6的檢測

對檢測結果為腸道病毒通用型陽性，腸道病毒71型與柯薩奇A16型陰性的標本一部分送吉林省疾病預防控制中心病毒所進一步分型檢測，檢測結果反饋給長春市疾病預防控制中心。另一部分標本使用江蘇碩士生物科技有限公司的柯薩奇A6型核酸檢測試劑盒，在QIAGEN Rotor-Gene Q Real-time PCR儀上對標本進行檢測。

2結果

2.1　Real-time PCR檢測結果

2013年共對367例手足口病例標本進行病原學檢測，有253例核酸檢測為陽性，總陽性率為68.94%。在253例核酸檢測陽性病例中， CA6型陽性158例，占陽性檢出的62.45%； EV71型陽性58例，占陽性檢出的22.92%；CA16型陽性20例，占陽性檢出的7.91%；其它型別腸道病毒陽性17例，占陽性檢出的6.72%。

2.2　腸道病毒型別與手足口病重癥的關系

367例手足口病病例中，18例為重癥患者，無死亡病例。18例重癥患者中，6例感染EV71，6例感

染CA6，1例感染CA16，還有5例感染其他型別腸道病毒。

2.3　病例的時間分布

2013年我們對長春地區手足口病進行了全年監測，經檢測結果顯示5月份病例數急劇增多，6月-8月份達到高峰，10月份病例數明顯降低。從時間分布上分析長春地區2013年手足口病高發期在5月-9月份(見圖1)。

圖1　2013年長春市手足口病原體檢測結果的時間分布

2.4　病例的年齡分布

在送檢手足口病病例中，陽性病例的最小年齡為8個月，最大年齡為11歲。患者年齡主要集中在0歲-6歲，此年齡段病例數為243例，占病例總數的96.05%(243/253)(見表1)。

表1　病原體檢測結果的年齡分布

2.5　病例的性別比例

采集的367例手足口病例中，男性225例，女性142例，男女比例1.58∶1。在核酸檢測陽性的253例患者中，男性151例，女性102例，男女比例1.48∶1(見表2)。

表2　病原體檢測結果的性別分布

3討論

從長春市2013年手足口病病原體檢測結果可以看出，其主要病原體是柯薩奇6型(CA6)，其次是腸道病毒71型(EV71)和柯薩奇16型(CA16)。長春市2012年手足口主要病原是CA16，其次是EV71，還有非CA16、非EV71型腸道病毒核酸陽性的檢出[8]。而長春市2011年1月-8月手足口病主要病原體是EV71，其次是CA16[9]。根據近三年長春市手足口病主要病原體的檢測結果，說明CA6型腸道病毒已成為引起長春市手足口病除EV71型或CA16型病毒之外的又一主要病原體。2005年日本曾報道CA6和CA10的流行[10]。2008年新加坡手足口病暴發期間，檢測到的主要流行病原體為EV71，其次為CA6和CA10[1]。2010年對上海部分地區440例手足口病的標本檢測，結果顯示引起手足病的腸道病毒主要為 EV71和CA16，其次為CA6和CA10[11]。目前，國內引起手足口病的主要腸道病毒為EV71和CA16，關于CA6型腸道病毒引起手足口病流行的報道較少，長春市2013年手足口病檢測結果提示我們應加強對非EV71和非CA16型尤其是CA6型腸道病毒的監測。同時，應深入研究長春市手足口病的病原譜和主要病原體的分子流行病學特征，為手足口病的預測、預警和防治提供準確依據。

從手足口病發病時間看，2013年5月-9月份手足口病患者數量明顯高于同年的其它月份。與2012年發病時間上相同[7]。分析CA6和EV71陽性病例的月份分布，發現CA6和EV71在流行月份上略有不同，EV71主要流行在5-8月，而CA6主要流行在5-9月。分析原因一方面可能由于長春市每年這幾個月的氣候條件較利于病毒生長繁殖，另一方面CA6可能存在較強的傳播性。

結合臨床特征來看，引起18例手足口病重癥感染主要病原體是EV71和CA6，其次是其他腸道病毒型和CA16。提示我們除EV71外，CA6和其他型別的腸道病毒也能引起手足口病重癥。感染CA6引起手足口病的臨床癥狀值得關注。

從不同年齡患者的檢測結果來看，主要以6歲以下兒童為主，發病數占總發病數的96.05%，其中1-3歲兒童發病數最高。男性發病數高于女性。這與長春市2012年檢測結果一致[7]。說明6歲以下兒童最易感染手足口病，是腸道病毒主要的易感人群。應加大對該類人群的監測力度，做到早發現、早隔離、早治療。同時應加強手足口病防病知識的宣傳教育，建立良好的個人衛生習慣，從而采取有效的預防措施，以避免手足口病的大規模流行。

參考文獻：

[1]Wu Y,Yeo A,Phoon MC,et al.The largest outbreak of hand,foot and mouth disease in Singapore in 2008:The role of enterovirus 71 and coxsackievirus A strains[J].Int J Infect Dis,2010,14(12):1076.

[2]Monto Ho,MD,Eng-Rin Chen,et al.An Epidemic of Enterovirus 71 Infection in Taiwan[J]．N Engl J Med,2003，41(13):929.

[3]翁育偉,嚴延生.腸道病毒EV71型研究進展[J].中國人獸共患病學報[J].2014,30(1):79.

[4]Blomqvist S,Klemola P,Kaijalainen S,et al.Co-crcirculation of coxsackieviruses A6 and A10 in hand,foot and mouth disease outbreak in Finland[J].J Clin Virol,2010,48(1):49.

[5]廖亦紅,陳長河,何云,等.2011年-2012年龍巖市手足口病標本病毒檢測結果分析[J].中國衛生檢驗雜志,2013,23(16):3263.

[6]邱惠芳,劉丹,劉青,等.浦東新區2012年手足口病檢測結果分析[J].海軍醫學雜志，2013,34(3):176.

[7]姚光海,郭軍,王丹,等.貴州省2013年上半年手足口病病原監測分析[J].中國衛生檢驗雜志，2014,24(3):428.

[8]崔薇,劉紅,孫炳欣,等.長春市2012年手足口病病原學監測結果及分析[J].中國實驗診斷學，2013,17(9):1721.

[9]喬鳳娟，劉紅，劉漢芬.實時熒光PCR技術檢測手足口病EV71與CA 16病毒核酸[J].中國衛生工程學.2011,10(3):253.

[10]Yamashita T,Ito M,Taniguchi A,et al.Prevalence of coxsackievirus A5，A6，and A10 in patients with herpangina in Aichi Prefecture [J].Jpn J Infect Dis,2005，58(6):390.

[11]張曉玲,俞慧菊,余耀,等.2010年上海部分地區440例手足口病病例的病原譜及分子流行病學分析[J].微生物與感染,2011,6(4):214.

關鍵詞：手足口病；PCR；CA6；EV71

The analysis of the etiological surveillance results of Hand-foot-mouth Disease in Changchun in 2013SUNBing-xin1,XUShuang2,CUIWei1,etal.(1.ChangchunCentreforDiseaseControlandPrevention,Changchun130033；2.JiLinProvinceCentreforDiseaseControlandPrevention)

Abstract:ObjectiveTo grasp the etiological characteristics and the distribution of HFMD in Changchun,and to provide a basis for further prevention and control of HFMD.MethodsSpecimens collected from clinically diagnosed HFMD cases were tested by real-time PCR.Results376 specimens were collected from January to December and the positive rate was 68.94%.96.05% of the cases were under 6 years old and the incidence peak occurred during May and September.ConclusionHFMD occurred mostly at the children under 6 years old.The major pathogen of HFMD was CA6,followed by EV71 in Changchun during 2013.

Key words:Hand foot mouth disease;PCR;CA6;EV71

(收稿日期：2014-05-06)

作者簡介：孫炳欣(1979-)，女，研究生，長春市疾病預防控制中心主管檢驗技師，從事病毒監測工作。

文獻標識碼：A

中圖分類號：R72

文章編號：1007-4287(2015)05-0762-03

*通訊作者

基金項目：吉林省衛生廳立項課題(2010ZC025)