羊腸毒血癥的診斷

（黑龍江省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心 150069）

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羊腸毒血癥是魏氏梭菌（產(chǎn)氣莢膜梭菌D型）在腸道內(nèi)大量繁殖并產(chǎn)生毒素引起的急性傳染病。

1 綜合性診斷

流行病學(xué)的特點(diǎn)：病程短，死亡快，多為散發(fā)性。只有羊發(fā)病，死亡的多為營(yíng)養(yǎng)較好的，在青草生長(zhǎng)旺盛期發(fā)病多，易地放牧可減少發(fā)病。

臨床癥狀：體溫不高，出現(xiàn)咬牙、肌肉顫抖、痙攣、四肢抽搐、頭頸向后反張等神經(jīng)癥狀，常下痢。

病理解剖：皮下血管舒張明顯，肝臟腫大質(zhì)脆有時(shí)呈煮熟樣。膽囊脹大，腎臟軟化，心臟擴(kuò)張松弛，心內(nèi)、外膜常有出血斑點(diǎn)。肺臟淤血?dú)饽[，氣管、支氣管積有多量白色泡沫性黏液，脾不腫大。積有多量胸水、腹水，腸道有出血點(diǎn)等病變。

根據(jù)以上特點(diǎn)進(jìn)行綜合判定，即可初步確診為羊腸毒血癥。但在新發(fā)病地區(qū)或以上特點(diǎn)不完全具備的情況下，則必須采取有出血點(diǎn)的小腸黏膜做直接涂片，革蘭氏染色，可見(jiàn)多量的產(chǎn)氣莢膜梭菌。

為了迅速確診，可采用腸內(nèi)容物毒素中和試驗(yàn)，操作方法是采取新鮮尸體的小腸內(nèi)容物30～50 mL，加生理鹽水作適當(dāng)?shù)南♂專?jīng)離心沉淀后，吸取上清液給家兔靜脈注射，如家兔很快死亡便證明腸內(nèi)容物有毒素。再以此毒素分別與產(chǎn)氣莢膜梭菌的C型和D型抗毒素融合，因?yàn)樵\斷羊腸毒血癥主要是鑒別C型和D型故可省去B型抗毒素。經(jīng)過(guò)中和后再分別給家兔靜脈注射。如用D型抗毒素血清所中和的毒素不發(fā)生死亡，便證明是羊腸毒血癥。反之，則診斷為羊猝狙。根據(jù)當(dāng)?shù)貙?shí)驗(yàn)結(jié)果，將腸內(nèi)容物稀釋后用濾紙反復(fù)濾過(guò)，直至濾液呈半透明為止，給家兔靜脈注射亦可得到同樣的結(jié)果。

診斷羊腸毒血癥也可從腸內(nèi)容物中直接培養(yǎng)分離產(chǎn)氣莢膜梭菌，將少量腸內(nèi)容物接種于厭氣肉肝湯內(nèi)，置37℃溫箱培養(yǎng)3～4 h，待產(chǎn)氣莢膜梭菌生長(zhǎng)發(fā)育后，再接種于血液瓊脂平板，置厭氣培養(yǎng)罐內(nèi)培養(yǎng)3～4 d取出。鉤取產(chǎn)氣莢膜梭菌的典H落，再接種于厭氣肉肝湯培養(yǎng)72 h即可獲得本菌的純培養(yǎng)物。也可將此培養(yǎng)液離心沉淀后，吸取上清液給小鼠靜脈注射測(cè)毒，小鼠若于24 h內(nèi)死亡，便證明有毒。然后以此毒素分別與產(chǎn)氣莢膜梭菌的D型和C型抗毒素血清中和后，再給小鼠靜脈注射觀察結(jié)果。被D型抗毒素中和的毒素不致死小鼠，被C型抗毒素中和的毒素能致死的小鼠，便證明是羊腸毒血癥。反之，則為羊猝狙。用小鼠試驗(yàn)也可采用腹腔注射，僅死亡時(shí)間略有延長(zhǎng)。為了爭(zhēng)取時(shí)間也可在產(chǎn)氣莢膜梭菌為24 h培養(yǎng)液內(nèi)加入胰蛋白酶使毒素活化后，其毒力與72 h培養(yǎng)菌液所產(chǎn)毒素的毒力相同。

為了迅速得出診斷結(jié)果，在當(dāng)?shù)貤l件下可用廣口瓶，內(nèi)置60℃的適量溫水，水溫若低于60℃，瓶?jī)?nèi)溫度會(huì)迅速下降。將培養(yǎng)管放入，每6～8 h換1次溫水，可代替溫箱做細(xì)菌培養(yǎng)。在沒(méi)有厭氣培養(yǎng)罐的情況下，取鉑環(huán)菌液連續(xù)劃線接種3支血液瓊脂斜面，將培養(yǎng)管換用翻口膠塞密閉，然后用帶針頭的注射器通過(guò)膠塞抽盡試管內(nèi)的空氣，隨即于針眼處涂以凡士林后，置入廣口瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)。經(jīng)培養(yǎng)后，在接種的第二管和第二管斜面上，即可看到有溶血環(huán)的產(chǎn)氣莢膜梭菌的單個(gè)菌落。鉤取單個(gè)菌落接種于厭氣肉肝湯內(nèi)，即可得到純粹培養(yǎng)。用此方法比較簡(jiǎn)單，不需要特殊設(shè)備，因?yàn)槭窃诋?dāng)?shù)夭僮鳎粌H可以縮短時(shí)間，而且能夠比較容易地分離到強(qiáng)度菌種。

2 鑒別診斷

羊猝狙：本病的腸內(nèi)容物含有C型產(chǎn)氣莢膜梭菌毒素，而腸毒血型則含有D型產(chǎn)氣莢膜梭菌的毒素。故采用毒素和抗毒素中和試驗(yàn)方法，可把兩種疫病區(qū)分開(kāi)。這兩型產(chǎn)氣莢膜梭菌的抗毒素，除對(duì)本病腸內(nèi)容物毒素有中和能力，無(wú)交互中和能力。

羊快疫：本病將有菌血癥，可從血液中分離出腐敗梭菌。在肝被膜的觸片中，可見(jiàn)腐敗梭菌呈線條樣的長(zhǎng)鏈，這種特征是腸毒血癥所沒(méi)有的。

炭疽：在流行地區(qū)除羊發(fā)病外，牛、馬、駱駝、豬亦多同時(shí)發(fā)病。在臨床上有明顯的體溫反應(yīng)，結(jié)膜多呈藍(lán)紫色，死后天然孔出血，脾臟異常腫大，鏡檢血液涂片可看到具有莢膜的呈竹節(jié)狀的炭疽桿菌。采取皮膚或臟器做炭疽沉淀反應(yīng)檢查，呈陽(yáng)性反應(yīng)。

巴氏桿菌病：本病的病程多在1天以上，不如腸毒血癥死亡迅速。在臨床上表現(xiàn)體溫高，皮下組織有出血性膠樣浸潤(rùn)。在后期多呈明顯的肺炎癥狀，在涂片中可看到兩級(jí)著色的巴氏桿菌。

肉毒梭菌病：在流行地區(qū)除羊發(fā)病外，牛亦多同時(shí)發(fā)病，有時(shí)馬、驢也有發(fā)病。本病的病程多在1天以上，在臨床表現(xiàn)為吞咽困難和四肢麻痹。腸內(nèi)容物含有肉毒梭菌毒素，用其濾液靜脈注射家兔可迅速引起死亡。但不能被產(chǎn)氣莢膜梭菌各型抗毒素所中和，而能被肉毒梭菌各型抗毒素所中和，以中和后的毒素注射小鼠，可鑒別出肉毒梭菌感染的菌型。

羊腸毒血癥的診斷

趙曉春，李 鵬，王寧寧