2型糖尿病腎病不同時期尿Ⅳ型膠原含量的變化及臨床意義*

劉艾芹，金立民，張德魚，劉國平

(內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院腎內(nèi)科，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050)

糖尿病腎病(Diabetic nephropathy，DN)是糖尿病常見一種嚴(yán)重并發(fā)癥，是導(dǎo)致終末期腎病的重要原因之一［1］。因此，DN的早診斷、早治療對于逆轉(zhuǎn)損傷的腎功能具有重要意義［2］。研究顯示DN病理改變主要表現(xiàn)為細(xì)胞外基質(zhì)增多，造成腎小球硬化，進(jìn)而引起DN發(fā)生［3］。Ⅳ型膠原是一種重要細(xì)胞外基質(zhì)，可在腎組織內(nèi)積聚導(dǎo)致腎小球硬化［4］。有研究認(rèn)為Ⅳ型膠原水平的升高可反映腎損害的嚴(yán)重程度［5］。因此，對Ⅳ型膠原與DN關(guān)系的研究有可能為DN的早期診治提供新的思路。本文通過檢測和比較2型DN患者不同時期尿Ⅳ型膠原含量的變化，探討兩者間的關(guān)系，以期為DN的早期診斷指標(biāo)的選擇提供參考，現(xiàn)報告如下:

1 資料與方法

1.1 一般資料:選取2011年2月至2014年2月我院收治的2型糖尿病患者145例，其中男性83例、女性62例，年齡42－71歲，中位年齡(60.53±9.47)歲。所有患者均符合WHO關(guān)于2型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn);排除標(biāo)準(zhǔn):感染、腫瘤、痛風(fēng)、DM酮癥、低血糖昏迷者;有原發(fā)性肝、腎疾病;有內(nèi)分泌、腦血管纖維化、結(jié)締組織及血液系統(tǒng)病史者。根據(jù)UAER分為正常白蛋白尿組(U1組，44例)、微量白蛋白尿組(U2組，45例)和臨床白蛋白尿組(DN組，46例)。另選擇同期健康體檢者，設(shè)為正常對照組(N組，45例)，其中男性26例、女性19例，年齡41－70歲，中位年齡(60.47±9.33)歲。所有受試者或家屬均對本試驗簽署知情同意書。

1.2 研究方法:所有受檢者禁食8－10h后，于清晨取靜脈血，采用日立7010生化分析儀，分別測定血肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN);留24h尿液，記錄總尿量，加入用甲苯混勻后，取20mL置于－20℃冰箱保存。采用競爭性放射免疫法測定UAER、尿α1微球蛋白(α1－MG)和尿β2微球蛋白(β2－MG)水平，試劑盒由中國原子能科學(xué)研究院提供。Ⅳ－C采用一步夾心固相酶免疫法測定，具體方法某某文獻(xiàn)。比較各組尿Ⅳ－C水平變化，分析其與UAER、血肌酐及尿素氮等指標(biāo)的相關(guān)性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法:采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料采用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，兩組間兩兩比較差用q檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗，相關(guān)性采用直線相關(guān)分析，采用Person檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組間一般臨床資料和生化指標(biāo)比較:各組間例數(shù)和年齡等一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);DN組各項生化指標(biāo)均顯著高于正常組、微量組和對照組(P＜0.05);U2組α1－MG、β2－MG和 UAER 顯著高于U1組和對照組(P＜0.05)，而BUN僅顯著高于對照組(P＜0.05)，與 U1組無顯著差異(P＞0.05);U1組BUN、α1－MG和UAER顯著高于對照組(P＜0.05)，而Cr和β2－MG與對照組無顯著差異(P＞0.05)。見表1。

表1 各組間一般資料與實驗室資料比較

2.2 各組間尿Ⅳ型膠原含量比較:DN組、U1組、U2組和對照組Ⅳ－C水平分別為(288.31±92.45)μg/24h、(135.72±44.83)μg/24h、(81.59±23.61)μg/24h 和(69.87±13.43)μg/24h。DN 組顯著高于U1組、U 兩組和對照組(P＜0.05)，U2組顯著高于U1組和對照組(P＜0.05)，U1 組顯著高于對照組(P＜0.05)。

2.3 Ⅳ－C與DN主要檢測生化指標(biāo)相關(guān)性Ⅳ－C與Cr、α1－MG、β2－MG、BUN 和UAER 的相關(guān)系數(shù)分別達(dá)到 r=0.32、r=0.55、r=0.48、r=0.51 和 r=0.61。除與Cr相關(guān)系數(shù)未達(dá)到顯著外，其余相關(guān)系數(shù)均達(dá)到顯著水平(P＜0.05)。

3 討論

糖尿病腎病(DN)是糖尿病患者嚴(yán)重的慢性微血管并發(fā)癥，嚴(yán)重危及患者生命［6］。有研究顯示，傳統(tǒng)的DN早期診斷多以Cr、BUN、UAER及尿微球蛋白檢查為主，然而這些生物標(biāo)志物檢查均存在著一定的不足，如:Cr、BUN水平易受飲食、民族、年齡等較多因素的影響［7］，作為DN患者腎功能損傷的診斷指標(biāo)特異性較差，且其在機(jī)體中的蓄積程度只與腎小球濾過率有關(guān)，不能準(zhǔn)確地反映腎小管損傷及壞死情況［8］。此外，血UAER和尿微球蛋白，只有在腎功能損傷后才能被檢測出變化，而在微量蛋白蛋尿進(jìn)一步發(fā)展之后，DN已經(jīng)進(jìn)入不可逆的進(jìn)展期［9］。

DN基本病理改變?yōu)槟I小球系膜細(xì)胞增殖、腎小球基底膜增厚、細(xì)胞外基質(zhì)增多和腎小球硬化［10］。Ⅳ型膠原(Ⅳ－C)是腎臟基底膜致密層的主要成分，以非纖維網(wǎng)狀的膠原蛋白形式存在，其主要功能之一是起支持作用［11］。有學(xué)者通過測定尿Ⅳ－C濃度，發(fā)現(xiàn)在糖尿病微血管病變早期，Ⅳ－C水平即出現(xiàn)升高，隨著微血管病變加重，Ⅳ－C亦隨之增高［12］。此外，還有研究發(fā)現(xiàn)在高糖環(huán)境中培養(yǎng)的系膜細(xì)胞Ⅳ－C合成及其mRNA水平增加，其機(jī)制可能由于膠原蛋白糖化使腎小球基底膜膠原合成增加，而且培養(yǎng)的系膜細(xì)胞使腎小球基底膜膠原合成增加，培養(yǎng)的系膜細(xì)胞原的分解可能減少，結(jié)果導(dǎo)致腎小球基底膜增厚，最終導(dǎo)致DN的發(fā)生［13］。田小平等［14］研究認(rèn)為2型糖尿病腎病患者Ⅳ－C＞18.96ng/mL應(yīng)高度懷疑早期DN的可能性。韋玉和等［15］研究認(rèn)為Ⅳ型膠原可作為DN早期診斷的參考指標(biāo)之一，在正常白蛋白尿期可能有前瞻性的應(yīng)用價值。

本研究發(fā)現(xiàn)DN組Ⅳ－C水平顯著高于其它組，且Ⅳ－C水平隨著UAER的升高而升高，這說明DN患者和正常人群間Ⅳ－C水平存在差異。UAER是目前DN診斷的主要指標(biāo)，其水平高低能預(yù)示DN的進(jìn)展;α1－MG、β2－MG反映DM腎小管損害的敏感指標(biāo)，提示DM、DN患者存在Ⅳ型膠原代謝異常。進(jìn)一步對Ⅳ－C水平與DN臨床早期診斷常用指標(biāo)α1－MG、β2－MG、BUN和UAER間相關(guān)系數(shù)分析發(fā)現(xiàn)，與四者間的相關(guān)系數(shù)均達(dá)到顯著水平，這說明2型DM患者Ⅳ－C在微量蛋白尿出現(xiàn)時就明顯升高，提示血清Ⅳ－C與尿微量白蛋白一樣可以作為腎功能損傷和早期DN標(biāo)志。

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