慢性粒細胞白血病的生物治療

袁小飛，高炳華

(河北北方學院附屬第一醫院血液科，河北張家口075000)

慢性粒細胞白血病(chronic myeloid leukemia，CML)臨床較常見，是造血干細胞的惡性克隆增殖性疾病。骨髓或外周血干細胞移植是CML治療的主要方案，但因供體的缺乏，加之移植手術風險較大，導致臨床治愈率偏低。腫瘤細胞的生物治療是以分子生物學、免疫學等前沿科學為基礎，通過調節或增強機體原本固有的內在防御機制，達到抑制或消除惡性腫瘤的目的，主要包括分子靶向治療、免疫治療、基因治療等。

1 發病的分子機制

CML主要表現為Ph染色體t(9;22)(q34;q11)細胞遺傳學的陽性特征，Ph染色體由位于第22號染色體bcr基因與第9號染色體的c-abl原癌基因易位，而形成表達P210bcr-abl融合蛋白的bcr-abl融合基因。研究［1-2］證實，P210bcr-abl融合蛋白的酪氨酸激酶活性(PTK)異常活躍，可降低細胞對骨髓基質的黏附性，引起造血細胞過度增殖，進而造成基質細胞、造血細胞、細胞內黏附分子介導的膜信號相互作用，引起細胞凋亡障礙。該融合蛋白上包含位于abl區的肌動蛋白結合區、DNA結合區、核定位信號區、SHZ和SH3結構域、酪氨酸激酶結構域等，這些功能結構域通過銜接蛋白分子相互作用，可激活NF-κB、PI3KAKT、Ras-Raf-MAPK等多條信號轉導通路，促進Bcl-XL蛋白表達，抑制促凋亡蛋白活性及線粒體釋放促凋亡蛋白，阻止DNA片段化和Caspase-3的活化，從而抑制細胞凋亡。

2 基因治療

2.1 通過基因轉染使腫瘤細胞抗原標志過度表達，而起到抗腫瘤作用 梁偉等［3］針對siRNA轉染K562細胞，研究了抑制甲基轉移酶(DNMT)對K562細胞中癌-睪丸抗原(CTA)表達的影響;正常情況下CTA在骨髓細胞及外周血細胞并無陽性表達，但在髓性白血病細胞中CTA可存在不同程度、種類的表達。朱雪姣等［4］在LipofectamineTM 2000介導下，對阿糖胞苷(Ara-C)的藥物敏感性與AMO-miR-21轉染及與Pdcd4(miRNA-21的靶基因)的關系進行研究，結果表明 AMO-miR-21、Ara-C聯合使用，可促進細胞凋亡，提高藥物敏感性。AMO-miR-21可顯著抑制miRNA-21表達，同時增強Pdcd4表達，表明AMO-miR-21可抑制miRNA-21表達，并參與Pdcd4的調控，從而促進細胞凋亡。JTV1基因是致癌基因C-myc的負性調控因子，同時具有促進腫瘤細胞凋亡的作用。吳燕等［5］將攜帶有JTV1基因的pcDNA3·1-JTV1載體轉染人K562細胞，觀察其對人白血病K562細胞系的影響。結果表明，JTV1基因表達上調后，可顯著降低K562細胞的增殖能力，并可升高G期細胞比例及mRNA水平，提示JTV1基因高表達能促進K562腫瘤細胞凋亡。

2.2 通過誘導細胞凋亡、抑制細胞增殖、下調相關原癌基因表達來發揮抗腫瘤作用 劉媛媛等［6］研究Apolloon反義寡核苷酸的轉錄對K562細胞增殖和凋亡的影響。Apollon的BIR序列是其抑制caspase活性、抗凋亡的重要結構。Apollon特有的結構域UBC能夠加強Apollon的抗凋亡作用，研究者以脂質體作為載體，將Apollon錯義寡核苷酸、反義寡核苷酸通過脂質體導入白血病細胞株K562，通過流式細胞儀的檢測顯示，Apollon反義寡核苷酸可促進K562細胞凋亡，有效抑制K562細胞的增殖，Apollon錯義寡核苷酸則無明顯作用，提示應用反義寡核苷酸技術封閉Apollon表達，可促進白血病細胞凋亡，進而達到抑制腫瘤細胞增殖的目的。楊玉枝等［7］研究顯示，manumycin能夠下調K562細胞中survivin蛋白的表達，起到抑制細胞增殖的作用。manumycin是法尼酰基轉移酶的特異性抑制劑，可與FPP競爭性結合法尼酰基轉移酶，干擾細胞膜上Ras蛋白的功能及Ras基因的表達，啟動細胞凋亡通路，阻斷腫瘤細胞生長信號通路。

3 過繼免疫治療

過繼免疫治療(ACI)是指將具有介導抗腫瘤效應的免疫細胞直接或單位注入腫瘤內的治療手段，主要為細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)的移植治療，CIK細胞是具有細胞毒活性的殺傷性細胞，由多種細胞因子共同培養而成，殺瘤活性高，增殖能力亦較強［8］。馬杰等［9］研究刺激因子對 NK細胞增殖的影響時發現，添加IL-2、IL-15可使NK細胞有效活化和高效擴增，并可顯著提高K562細胞的殺傷作用，提示高純度的NK細胞對正常的淋巴細胞無明顯細胞毒活性，但對腫瘤細胞株具明顯的殺傷功能。

4 結語

隨著現代腫瘤學研究的不斷深入，抗癌治療將從細胞毒性藥物攻擊向非細胞毒性藥物調節進行轉變，在未來，生物、基因療法將成為抗癌治療的主流。ACI聯合分子靶向藥物可以實現協同效應，可能會對提高腫瘤患者生存時間及生存質量起到良好的效果［10］。

［1］J?R?S M，JOHNELS P，AGERSTAM H，et al.Expression of P190 and P210 BCR/ABL1 in normal human CD34(+)cells induces similar gene expression profiles and results in a STAT5-dependent expansion of the erythroid lineage［J］.Experimental Hematology，2009，37(3):367-375.

［2］ANDREU E J，LLEDóE，POCH E，et al.BCR-ABL induces the expression of Skp2 through the PI3K pathway to promote p27Kip1 degradation and proliferation of chronic myelogenous leukemia cells［J］.Cancer Research，2005，65(8):3264-3272.

［3］梁偉，徐蘭，楊榮秉，等.DNA甲基轉移酶基因干擾對K562細胞癌-睪丸抗原表達的影響［J］.現代生物醫學進展，2011，11(20):3801-3804，3808.

［4］朱雪姣，李育敏，谷景義，等.靶向抑制miRNA-21提高白血病K562細胞對阿糖胞苷的敏感性［J］.生命科學研究，2011，15(4):317-322.

［5］吳燕，劉北忠，王翀，等.JTV1對K562細胞增殖和凋亡的影響及其機制［J］.解放軍醫學雜志，2011，36(5):452-455.

［6］劉媛媛，賈秀紅，李建廠，等.Apolloon反義寡核苷酸對K562細胞增殖和凋亡的影響［J］.腫瘤防治研究，2011，38(6):636-638.

［7］楊玉枝，馬寧，許穎，等.Manumycin對人髓系白血病細胞株K562細胞的增殖抑制作用［J］.吉林大學學報:醫學版，2011，37(6):1098-1101.

［8］KIM H M，LIM J，YOON Y D，et al.Anti-tumor activity of ex vivo expanded cytokine-induced killer cells against human hepatocellular carcinoma［J］.International Immunopharmacology，2007，7(13):1793-1801.

［9］馬杰，趙衛東，張麗娜，等.不同刺激因子組合誘導NK細胞體外擴增及其功能的研究［J］.免疫學雜志，2011，27(6):510-513，518.

［10］張碧紅，吳燕峰，岑丹陽，等.IL-2和IL-15刺激臍血NK細胞對K562/Jurkat細胞的殺傷活性研究［J］.中國實驗血液學雜志，2011，19(2):358-362.