蒙醫灸療對失眠模型小鼠腦組織一氧化氮和一氧化氮合酶的影響

乎寶力格

（內蒙古民族大學附屬醫院，內蒙古通遼028007）

蒙醫灸療對失眠模型小鼠腦組織一氧化氮和一氧化氮合酶的影響

乎寶力格

（內蒙古民族大學附屬醫院，內蒙古通遼028007）

目的 探討施灸“赫依穴”“頂會穴”對睡眠紊亂模型小鼠腦組織中一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）的影響。方法 將36只小白鼠隨機分為空白對照組、模型組、治療組3組，每組12只，模型組與對照組反復定時腹腔內注射咖啡因致小鼠睡眠節律紊亂，治療組施灸“赫依穴”與“頂會穴”。觀察各組小鼠自發活動次數與站立數，檢測小鼠腦組織中NO含量與NOS活性。結果 各組小鼠站立次數與自主活動次數比較：治療組與空白對照組之間無統計學意義（P＞0.05）；與模型組比較空白組和治療組均有統計學意義（P＜0.05）。各組小鼠腦組織中NO含量和NOS活性比較：治療組與空白對照組之間無統計學意義（P＞0.05）；與模型組比較，空白對照組和治療組均有統計學意義（P＜0.05）。結論 蒙醫灸療對睡眠紊亂模型小鼠具有鎮靜催眠作用，其機制可能是通過阻抑NOS誘導產生過量的NO起到神經保護作用。

蒙醫灸療；鎮靜催眠；穴，赫依；穴，頂會

睡眠是生命所必須的過程，是人類健康不可缺少的部分。睡眠除了可以消除疲勞，使人體產生新的活力外，還與提高免疫力，抵抗疾病的能力有密切聯系，睡眠質量直接影響著人類生活質量的高低［1］。失眠癥是睡眠的始發與睡眠的維持發生了障礙，導致睡眠質量不能滿足個體生理需要而影響患者白天活動（比如注意力下降、疲勞、反應遲鈍等）的一種睡眠障礙綜合征。隨著現代生活節奏的加快和社會競爭壓力的加劇。失眠癥的發生率逐年增高，據報道［2－3］，2002年全球失眠調查顯示，我國失眠癥患者占普通人群的45.4%。因此失眠癥的防治與每個人的生活息息相關。

蒙醫灸療是通過在特定穴位上用艾條、艾柱、艾粒等灸具行熱刺激，達到預防、治療、保健康復作用的硬療法。灸療有溫通經脈、調和氣血、調理體質、增強抵抗力以防治疾病的作用。具有安全、經濟、療效肯定和無毒副作用等優點。對失眠癥、胃火衰敗、消化不良、浮腫、痞證、胃脘疼痛、慢性結腸炎、風濕類疾病、癤癰、炭疽、虛熱病、癔病、癲狂、健忘癥、抗防衰老等多種疾病療效顯著［4］。本實驗擬用蒙醫灸療法取有效腧穴“赫依穴”（位于第7頸椎棘突與第1胸椎棘突間隙窩中，即中醫大椎穴）、“頂會穴”（位于從兩眉正中往上劃一線，再從兩耳葉上緣正中往上劃一線，此二線在頭頂之交叉處便是，即中醫百會穴）作用于睡眠紊亂模型小鼠，并對其治療作用加以驗證，為進一步研究失眠的治療機制奠定基礎，為失眠病證的辨證施治提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料 動物：SPF級昆明種小白鼠，雌雄各半，體質量（20±2）g，由吉林大學實驗動物中心提供，動物合格證號為SCXK（吉）2011－0004。藥物：咖啡因，由內蒙古民族大學化學學院化學實驗室提供。主要儀器設備：AUW120D型島津電子天平（日本）；TTL－2C型超純水制備儀（北京同泰聯科技發展有限公司）；ZZ－6小鼠自主活動測定儀（成都泰盟科技有限公司）。紫外可見分光光度計（755B、上海清華），自粘式艾灸柱（商品名：神灸，蘇州東方艾絨廠出品）直徑4 mm，長1 cm，灸墊厚度2 mm。

1.2 方法 購買小鼠后在飼料充足、無干擾的睡眠條件下飼養7 d。稱重后隨機分為空白組、模型組、治療組共3組，每組12只。治療組與模型組：腹腔注射小劑量咖啡因（2.0 mg／kg），連續注射7 d；空白對照組：經腹腔注射生理鹽水（10.0 mL／kg），連續注射7 d；動物出現毛皮枯槁，舉肢、理毛、走動等次數明顯，不能安臥等外部特征，與文獻［5］報道一致，即造模成功。治療組：第8天起開始施灸，參照文獻［6－7］記載，剪去小鼠頂會穴、赫依穴周圍鼠毛，第1天頂會穴，第2天赫依穴依次進行施灸，時間5 min，每次行3艾柱，共施灸14 d。模型組和空白組第8天起按程序只抓取不施灸，連續14 d。

1.3 指標檢測 各組動物實驗第15天用自主活動測定儀測試10 min內動物的活動次數和站立次數。之后各組小鼠脫臼處死，即刻剝離出腦（除掉小腦）組織備用。腦組織中NOS活性與NO含量測定分別依據NOS、NO測定試劑盒使用說明書進行。

1.4 統計學處理 用SPSS 17.0統計軟件處理數據，結果用均數±標準數（ˉx±s）表示，2組間資料比較采用單因素方差分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 對小鼠自主活動的影響 治療結束后用自主活動測定儀測10 min內動物的自發活動次數與站立次數。結果示：模型組與其他2組比較自發活動次數與站立次數明顯增多（P＜0.05）。治療組與空白組比較無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 治療后小鼠自發活動次數與站立次數的比較（ˉx±s，n＝12）次

2.2 對小鼠腦組織中NO含量與NOS活性的影響治療組與空白對照組比較差異無統計學意義，空白對照組和治療組與模型組比較差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 治療后小鼠腦組織中NO含量與NOS活性的比較（ˉx±s，n＝12）

3 討論

蒙醫學認為，人體之所以能夠維持正常的生理活動是因為體內具有3種能量和基本物質，即：赫依、協日、巴達干。這3種物質是人體生命的本源、根本，故稱之為三根。其中，赫依是人體維持健康和延年益壽的引導者，也是保持協日與巴達干兩根相對平衡的調節者。赫依具有輕、動、澀、涼、細、堅等6種特性，稱其為赫依的秉性。如果與赫依之6種特性相類似，誘發疾病的4個條件（氣候變化、飲食、起居、突發因素）過分時，致使赫依之特性偏盛而失去相對平衡狀態。因此，赫依具有思維并保持神志安定的功能。若赫依的功能正常，則人的神志、思辨能力、精神等就正常［8］。

蒙醫學認為赫依與血相搏是導致失眠的主要原因，心與白脈是主要病位。凡是悲傷過度、勞累、過于激動、出血過多等因素使赫依偏勝，客于心臟，或精神受到強烈刺激、暴怒等因素使赫依與血相搏，客于白脈，引起氣血運行失常而導致失眠。而施灸“赫依穴”與“頂會穴”具有抑制赫依，疏通赫依與血之運行之路、促進白脈傳導、寧心安神等功效。在臨床實踐中也證明了針灸“赫依穴”與“頂會穴”對赫依偏盛引起的疾病有較好的療效［8］。

現代研究［9－14］證實，一氧化氮（NO）含量與人的精神系統、神經系統等各系統有密切聯系。NO一方面是一種反應性極強的自由基，另一方面又兼有第二信使和神經遞質的作用，調節多種病理生理過程。而NO含量的變化主要取決于一氧化氮合酶（NOS）活力。NOS分為神經元型一氧化氮合酶（nNOS）、內皮型一氧化氮合酶（eNOS）和誘導型一氧化氮合酶（iNOS）等3個亞型。而nNOS主要存在于神經細胞內，因此，探討大鼠腦組織中NO、NOS與失眠的關系具有一定的臨床意義。

本課題通過施灸睡眠紊亂模型小鼠“赫依穴”與“頂會穴”，觀察小鼠一般生存狀態、自發活動、站立次數，檢測腦組織中NO含量和NOS活性指數，初步探討了蒙醫灸療鎮靜作用及其機理。結果顯示，施灸“赫依穴”與“頂會穴”可改善睡眠紊亂小鼠一般生活狀態［15］；經統計：模型組與其他2組比較自發活動次數和站立次數明顯增多（P＜0.05），NO含量和NOS活性增高（P＜0.05）；空白組與治療組比較自發活動次數和站立次數差異無統計學意義（P＞0.05），NO含量和NOS活性差異無統計學意義（P＞0.05）。證實了頂會穴與赫依穴主治夜不安眠、白晝嗜眠的記載［2］，驗證了蒙醫灸療的鎮靜催眠作用及其機理。其作用機理可能是通過阻抑腦組織中NOS誘導產生過量的NO，起到神經保護作用。

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Effect of moxibustion of Mongolian medicine on nitricoxide and nitric oxide synthase in brain tissue of mice model of insomnia

HU BAO Li Ge
（Affiliated Hospital of Inner Mongolia University for Nationalities，Tongliao 028007，Neimenggu Province，China）

Objective To investigate the Moxibustion“point，Heyi”“point，Dinghui”on sleep disorder mice brain tissues of NO and NOS effect．Methods The 36 mice were randomly divided into blank control group，model group，treatment group three groups，12 rats in each group，model group and control group repeated intraperitoneal injection of caffeine in mice induced by the timing of sleep rhythm disorder，the treatment group Moxibustion“Heyi point”and“Dinghui point”．The mice were observed the times of spontaneous activities and stand number，NO content and NOS activity in brain tissue of mice were detected in．Results compared mice the number of standing and independent activity times：there is no significant difference between treatment group and blank control group（P＞0．05），compared with the model group，the blank group and the treatment groups were significantly different（P＜0．05）；the comparison of NO content and NOS activity in brain tissue of mice in each group：there was no significant difference in between treatment group and blank control group（P＞0．05），compared with the model group，blank control group and the treatment groups were significantly different（P＜0．05）．Conclusion Moxibustion of Mongolian medicine has sedative and hypnotic effects on sleep disturbance model mice，may be induced to produce excessive NO by inhibiting NOS，play a neuroprotective effect．

moxibustion of Mongolian medicine；sedative and hypnotic；point，Heyi；point，Dinghui

R285.5

A

2095－6258（2015）03－0457－03

2014－12－06）

10．13463／j．cnki．cczyy．2015．03．007

內蒙古民族大學青年基金（MDX2009069）。

乎寶力格（1978－），女，碩士，主治醫師，主要從事蒙醫傳統療術學研究。