中藥抗腫瘤侵襲轉移機制的研究進展

李星卓，李蕊潔

(1.天津中醫藥大學，天津 300073；2.河北省遷安市人民醫院，河北 遷安 064400)

中藥抗腫瘤侵襲轉移機制的研究進展

李星卓1，李蕊潔2

(1.天津中醫藥大學，天津 300073；2.河北省遷安市人民醫院，河北 遷安 064400)

近年，大量研究表明，中藥及其提取物具有抑制腫瘤生長和侵襲轉移的生物學功效。中藥及其有效成分抑制轉移的作用機制主要包括調節體內免疫微環境，對腫瘤細胞的殺傷作用及對腫瘤轉移能力的抑制作用。現將近年來關于中藥及其有效成分抗轉移作用機制的研究綜之以述。

中藥；腫瘤侵襲轉移機制；綜述

侵襲轉移是惡性腫瘤的重要生物學特征之一，也是影響腫瘤患者生存期的主要原因。由于大多數腫瘤發病的隱蔽性，患者在前期并無癥狀或癥狀較輕，病情惡化就診時已經發生了局部侵潤轉移或廣泛的轉移。近年來的許多報道證明了中藥抗肺癌轉移的優勢，中醫治療腫瘤也已經由單純臨床報道進入到較為系統的臨床與實驗相結合的前瞻性研究，并且開始從分子機制揭示中藥抗肺癌轉移的機理。現將近期有關中藥及其有效成分抗腫瘤侵襲轉移機制的研究現狀綜述如下。

1 影響腫瘤轉移相關基因的表達

腫瘤的轉移是涉及多基因變化的一系列復雜過程，腫瘤細胞受其自身轉移基因及轉移抑制基因的調控，轉移基因的激活、轉移抑制基因的失活均可誘發腫瘤的轉移。已發現的腫瘤轉移相關基因有ras、myc、matl等，腫瘤轉移抑制基因有nm23、PTEN等[1]。

陳澤濤等[2]采用流式細胞儀檢測復方苦參注射液作用后的BEL-7402腫瘤細胞的細胞周期、凋亡率及bcl-2、CD44v6和nm23基因表達的變化，發現復方苦參注射液組CD44v6表達陽性細胞百分比率較對照組低，復方苦參注射液組nm23表達陽性率為97.85%明顯高于對照組的41.01%。結果表明，復方苦參注射液能夠明顯的抑制細胞體內CD44v6的表達，促進抑轉移因子nm23的表達，具有顯著的抑制腫瘤轉移的作用。羅曉慶等[3]建立昆明小鼠S180肉瘤細胞實體瘤模型，桂枝茯苓丸0.2 mL(10 g/d)灌胃給藥，環磷酰胺(CTX)腹腔注射，連續給藥10 d，采用ELISA法檢測各組小鼠血清中VEGF的含量，SABC免疫組化法檢測肉瘤組織中轉移抑制基因nm23H1表達及細胞粘附分子CD44的表達情況，結果顯示：與模型組相比，桂枝茯苓丸能顯著降低荷瘤小鼠血清中VEGF的含量(P<0.05)，并可促進轉移抑制基因nm23H1的表達，抑制粘附分子CD44的表達，與模型組比較，差異有統計學意義(P<0.05)。表明桂枝茯苓丸可抑制腫瘤轉移，其機制與促進轉移抑制基因nm23H1的表達，抑制粘附分子CD44的表達相關。

2 影響腫瘤轉移相關信號通路的傳導

轉錄因子NF-κB是在人類很多腫瘤中超表達，它在腫瘤的浸潤和轉移中起重要作用。NF-κB能促進腫瘤細胞和內皮細胞及基質的黏附、誘導腫瘤細胞產生蛋白酶降解細胞外基質、促進血管形成等[4]。AP-1信號轉導通路的活化與腫瘤的侵襲、轉移密切相關。AP-1的活化能促使下游的靶基因如MMP、整合素、CD44和VEGF等基因異常表達，參與細胞基質降解、異常黏附、轉移瘤新血管形成等多個侵襲轉移環節[5]。ERK是信號從細胞膜表面受體轉導至細胞核內的關鍵，ERK接受刺激信號后，發生磷酸化被激活，并穿過核膜作用于某些轉錄因子如AP-1、NF-κB等調節基因的表達，這些轉錄因子進一步調節它們各自靶基因的轉錄，引起與腫瘤轉移相關蛋白的表達或活性改變[6]。

施書強等[7]在體外培養的胰腺癌BxPC-3細胞中加入不同濃度的大黃素，應用Cell Counting Kit-8法檢測細胞增殖情況，劃痕實驗和Matrigel細胞侵襲實驗分別測定胰腺癌細胞體外遷移和侵襲能力，凝膠電泳遷移率實驗(EMSA)檢測胰腺癌細胞中NF-κB活性表達水平的變化，結果顯示大黃素可呈濃度依賴性抑制BxPC-3細胞生長、遷移和侵襲，其機制與抑制NF-κB活性表達水平相關。多玥荷等[8]建立人結腸癌裸鼠皮下移植瘤模型，觀察不同劑量西黃丸對裸鼠致瘤的影響，并采用免疫組化法檢測增殖細胞p-ERK1/2蛋白的表達情況，結果顯示西黃丸可抑制移植瘤生長，并且可以降低p-ERK1/2蛋白的表達，得出結論，西黃丸的一流機制與調節ERK/MAPK通路相關。趙健雄等[9]觀察了扶正抑瘤顆粒對食管癌、胃癌患者腫瘤組織細胞周期、凋亡率和NF-κB水平的影響，結果服藥組較對照組NF-κB水平明顯升高，因此認為扶正抑瘤顆粒可提高腫瘤細胞NF-κB的表達而抑制腫瘤轉移。

3 抑制腫瘤血管生成

腫瘤血管生成是腫瘤細胞侵襲轉移的必要條件。腫瘤細胞的生長、增值所需的營養主要來源于血液供應，沒有新生血管的形成，腫瘤細胞生長收到抑制，難以形成新的轉移灶。新生血管可為腫瘤組織提供充足的營養，同時又為腫瘤細胞進入循環系統，發生血行擴散提供了條件。研究表明，血管內皮生長因子(VEGF)，堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)在多種腫瘤中均有表達，VEGF、bFGF在多種腫瘤的血管新生中起著尤為重要的作用，與多種惡性腫瘤的侵襲轉移有密切的相關性[10]。因此，抑制血管生成是抗腫瘤轉移的重要方法和有效途徑。

陳慧彬等[11]建立C57BL/6j小鼠Lewis肺癌實體瘤模型，分別給予扶正散結湯拆方藥物灌胃，及順鉑腹腔注射，連續用藥14d后處死，將瘤體剝離常規固定、脫水、包埋切片，免疫組化SP法檢測腫瘤組織中VEGF、ES、MMP-2的表達情況，結果顯示，各給藥組肺轉移結節數量均低于模型組(P<0.05)，順鉑及各配伍組分組均較模型組VEGF、MMP-2的表達降低，ES表達量升高，其中解毒組(白花蛇舌草、半枝蓮)VEGF表達量最低(P<0.05)，而順鉑組不具任何優勢，最后得出結論，扶正散結湯拆方配伍四法聯用具有更好抗腫瘤轉移效果，與順鉑相當，其機制與扶正散結湯可降低VEGF的表達，抗腫瘤微血管生成相關。也有研究證實[12]，丹參中脂溶性成分丹參酮Ⅰ可劑量依賴性抑制腫瘤壞死因子TNF-α誘導的內皮細胞VEGF合成以及VEGF誘導的血管生成。吳秋玲等[13]也通過動物實驗證實了中藥水蛭、斑蝥對腫瘤的轉移有一定的抑制作用，其作用機理之一是抑制血管的生成，其機制是通過降低VEGF、MMP-9的表達，降低腫瘤組織的微血管密度(MVD)以及抑制血管內皮細胞的增值來實現的。

4 影響腫瘤細胞的粘附運動

腫瘤細胞的黏附運動包括腫瘤細胞之間的同質性黏附、腫瘤細胞與基底膜和毛細血管內皮細胞之間的異質性黏附，細胞黏附在腫瘤細胞的侵襲運動中起雙重作用，一方面腫瘤細胞必須先從原來黏附的原發灶上脫離，才能發生侵襲轉移；另一方面，腫瘤細胞黏附于基質和血管內皮細胞，并進入血循環造成血行轉移。因此，增加腫瘤細胞之間的同質性黏附，降低腫瘤細胞與基底膜和毛細血管內皮細胞之間的異質性黏附，是抑制腫瘤細胞轉移和侵襲的一種有利措施[14]。介導黏附行為的細胞黏附分子主要包括整合素家族、鈣黏蛋白家族、選擇素家族、免疫球蛋白超家族及其他類型的黏附分子(如CD44、FAK)等[15]。

蔣士卿等[16]建立C57BL/6j小鼠Lewis肺癌實體瘤模型，益肺清化膏不同劑量灌胃給藥，環磷酰胺(CTX)腹腔注射，連續給藥15天，采用熒光定量PCR法觀察益肺清化膏對肺癌侵襲轉移過程中粘附分子E-cad、CD44、CD44v6相應基因mRNA表達水平的影響，結果顯示，E-cad的表達水平以高劑量中藥組為首，其表達與對照組的表達水平存在非常顯著的差異(P<0.01)，與CTX組比較存在顯著的差異(P<0.05)，CD44的表達水平高、低劑量中藥組均呈低表達狀態，其表達與對照組的表達水平存在顯著的差異(P<0.05)，與CTX組比較存在顯著的差異(P<0.05)，表明益肺清化膏具有抑制腫瘤生長以及拮抗腫瘤轉移的作用，其抗腫瘤作用的機制，考慮與提高E-cad的表達水平，從而增加腫瘤細胞間的粘附能力，降低腫瘤細胞脫落進入周圍組織和血管的機率，同時，益肺清化膏尚可以降低CD44、CD44v6的表達水平，可能通過減弱腫瘤細胞與血管內皮和ECM間的異質粘附，降低腫瘤向基質侵襲，影響腫瘤細胞的遷移和運動能力，或可能通過影響癌細胞的骨架構象和分布，從而影響癌細胞的運動能力來發揮抗腫瘤的目標。也有研究證實[17]，轉筋草提取物體外對乳腺癌細胞MDA-MB-231、肺腺癌細胞A549趨化運動具有明顯抑制作用，其機制與調節整合素與相應配體的活性相關。孫海濤等[18]也通過研究證實了鱉甲煎丸抑制腫瘤轉移的機制與下調CD44v6及VEGF的表達相關。

5 調節體內免疫微環境

惡性腫瘤的發生、發展與患者自身的免疫微環境密切相關。宿主的免疫監控可以清除循環中絕大多數腫瘤細胞，腫瘤細胞進入血液循環后，只有極少數能夠逃脫宿主免疫細胞如NK細胞、巨噬細胞的殺傷，到達遠處組織形成新的轉移灶，中性粒細胞也能加速腫瘤細胞從循環中的清除，只有不到0.1%的細胞能黏附于遠處毛細血管內皮并侵襲穿過基質膜而在遠處組織形成轉移灶[19]。腫瘤細胞往往通過自分泌，與周圍的組織相互作用，在腫瘤周邊組織形成一種相對的“免疫赦免”環境，使轉移灶中的腫瘤細胞能夠逃避機體免疫的攻擊，并在機體免疫低的情況下生長和擴張并出現臨床癥狀[20]。因此，調節腫瘤患者自身的免疫微環境是抑制腫瘤轉移的有效途徑。

陳同強等[21]以S180肉瘤細胞為腫瘤模型探討了香菇多糖(Lentinan)的抗腫瘤活性，以香菇多糖1mg/kg對荷瘤小鼠隔日給藥，給藥7次后小鼠胸腺指數、脾指數明顯增加，腫瘤重量明顯降低。袁建國等[22]建立昆明鼠S180實體瘤模型，蟲草多糖(CP)不同劑量灌胃給藥，環磷酰胺(CTX)腹腔注射，連續給藥5次，CP抑瘤率最高達45.71%。聯合用藥組與之相比抑瘤率提高6.84%，并且可明顯拮抗胸腺重量降低。這表明香菇多糖能顯著提高荷瘤小鼠的脾臟和胸腺質量，進而提高機體免疫力。

6 展望

近年來，隨著科研工具和技術的逐步發展，以腫瘤細胞為基礎的腫瘤轉移分子模型研究在大量開展，以腫瘤細胞轉移關鍵基因為靶點的藥物也在不斷開發，眾多中藥及其有效成分的抑瘤作用也被發現，并通過實驗研究明確了其部分抗腫瘤轉移的機制。然而腫瘤轉移的機制頗為復雜，我國的中藥資源也十分豐富，進一步篩選開發高效、低毒、廣譜的抗轉移藥大有可為。

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李星卓(1985-)，男，天津，研究生，研究方向：風濕疾病的中西醫臨床研究。

R73

A

1007-2349(2015)08-0083-03

2015-06-08)