快速檢測技術在生鮮乳質量安全檢測中的應用

胡麗霞 李艷麗

河北省唐山市灤縣畜產品檢測中心，河北灤縣 063700

快速檢測技術在生鮮乳質量安全檢測中的應用

胡麗霞 李艷麗

河北省唐山市灤縣畜產品檢測中心，河北灤縣 063700

乳制品由于其自身營養成分豐富，對人類健康有益，越來越被更多人認可、消費，其自身質量安全與人民群眾健康息息相關，如何保證其質量安全成為人民群眾最關心的問題之一。快速檢測技術因其出具結果迅速，操作簡便，靈敏度高等優點而被廣泛應用于生鮮乳質量安全檢測中。本文著重描述了幾種快速檢測技術在生鮮乳質量安全檢測中的應用現狀和實際工作中的一些體會，供同行參考。

快速檢測技術；生鮮乳；質量安全；應用

隨著人民生活水平的提高，人民的膳食結構也由過去的以植物性食物供給的溫飽模式向以動物性食品為主的富裕模式轉變，乳制品等畜產品在飲食結構中所占的比例越來越大。有人對60歲以上的老人進行過調查，其日常飲食結構中，蛋白質攝入量不足，建議增加牛奶等含鈣豐富的食品攝入。而液態奶由于其飲用方便、營養價值高成為乳制品的最常見商品形式，生鮮乳作為乳制品生產廠家的基本原料，其質量的好壞對乳制品的質量起著至關重要的影響。如何保證其質量，多種檢測方法應需而生，如先進分析儀器檢測，或將生物學技術應用的蛋白質芯片、生物傳感器、基于抗原抗體特異性反應的酶聯免疫吸附實驗法及快速檢測卡等。本文著重介紹應用于生鮮乳質量安全檢測的幾種快速檢測方法。

1 生鮮乳質量可能存在的問題

目前，生鮮乳的質量可能存在以下問題。一是不法商人因擔心生鮮乳的蛋白含量不達標，而唯利是圖，向其中添加可以提高其蛋白含量的劣質物品，如三聚氰胺、氯化銨、尿素、皮革等非蛋白氮，或其他非奶物質。二是生鮮乳中含有對人體健康有害的物質，如養殖過程中用于治療疾病的獸藥殘留，為了取得理想檢測結果而人為向其中添加的其他有害物質，如堿類物質、硫氰酸根、β-內酰胺酶等。此外，還有由于飼養管理不規范而使生鮮乳中含有對人體有害的黃曲霉等有害物質。

2 幾種常見快速檢測方法比較

生鮮乳中摻假以提高蛋白含量的真假蛋白的檢測可用紫外分光光度法及近紅外光譜檢測法。三聚氰胺可用高效液相色譜法、液相色譜——串聯質譜方法、拉曼光譜分析法及酶聯免疫法和快速檢測卡來檢測。紫外分光光度法的實驗原理是利用乳與乳制品的蛋白質中有游離的酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸存在的緣故，在280 nm波長處有特征的最大吸收，且其吸收強度與樣品中蛋白質含量呈正比這個現象，280 nm波長處，用紫外分光光度計，通過吸光度值來測定真蛋白質量濃度。還有針對一些不法奶農或收奶站為牟取暴利在鮮乳中添加非奶物質如植物奶油等勾兌出與牛乳成分接近的假乳，以及通過劣質奶粉調制的還原乳來冒充生鮮乳的近紅外光譜檢測法。液相色譜法成本較高，所用儀器設備為高效液相色譜儀。本實驗方法的優點是前處理較簡單，約1 h即可得到實驗結果，且實驗結果準確性高，人為影響較小。液相色譜——串聯質譜這種新方法使得動物組織等復雜樣品的快速和有效分析更容易。這種檢測方法靈敏度高，并且非常耐用。拉曼光譜分析法是基于印度科學家C.V.拉曼（Raman）所發現的拉曼散射效應，對與入射光頻率不同的散射光譜進行分析以得到分子振動、轉動方面信息，并應用于分子結構研究的一種分析方法。該方法的優點是重現性良好，其檢測費用相對于液相色譜分析來說較低檢，設備操作相對簡捷，樣品無需制備，沒有前處理過程，出具結果快，適合質量安全監管部門和乳制品生產企業現場快速測定。酶聯免疫技術是三大經典標記免疫技術之一，是以酶標記抗體或抗原為主要試劑的一種標記免疫分析技術。基本原理是將酶與試劑抗原或抗體用交聯劑結合起來，此種酶標記抗原或抗體與標本中相應抗體或抗原發生特異反應，并牢固結合，在加入相應的酶的底物時，底物被酶催化生成呈色產物，在免疫組化染色時可指示待測反應物的存在和定位，在酶免疫測定中，則可根據呈色物的有無和呈色深淺作定性或定量觀察。由于此技術是建立在抗原抗體反應和酶的高效催化作用的基礎上，故而該技術具有檢測靈敏度高、特異性強、準確性好等特點。其所需儀器為酶標儀，即配套的試劑盒。不同生產廠家的試劑盒的檢測限有所區別，一般都低于國家相關標準。其優點是特異性高，成本較液相色譜儀低，也能達到定量檢測的目的，前處理較簡單，一次可進行多個樣品的檢測。其缺點是點板過程要求嚴格，各步驟之間銜接性強，前期抗體或抗原固相化不一致對實驗結果影響大。此外常用的快速檢測卡，其優點是無需其他任何特殊儀器，出具結果快，美中不足是只能定性不能定量，且實驗操作受外界環境，例如溫度影響較大。此外還有針對生鮮乳中的有毒有害物質的顯色法、沉淀法等。

3 生鮮乳中常見違禁物質的檢測方法

生鮮乳中常見的有害物質有三聚氰胺，可以采用液相色譜法、拉曼光譜法、酶聯免疫法和膠體金試劑卡來進行檢測。實際工作中常用快速檢測卡進行初篩，對于疑似陽性樣品可采用液相色譜法或酶聯免疫吸附實驗進行復檢。

生鮮乳中的β-內酰胺酶的快速檢測方法，有報道建立起了酶聯免疫法，且檢測限較低，重復性較好，前處理簡單。但是目前這項技術尚停留在實驗室研究階段還未商品化。實際工作中多采用快速檢測卡和杯碟法進只能定性檢測。

生鮮乳中的硫氰酸根的檢測有離子色譜法、酶聯免疫法等。離子色譜法由于其操作簡便，檢測成本低，可快速出具結果，較酶聯免疫法應用廣泛。

生鮮乳中皮革水解物的檢測方法有紫外分光廣度計法、顯色環法、氨基酸自動分析儀法等。由于紫外分光光度計法可用于定量檢測，但是其前處理復雜，需要在110℃左右水解過夜，在實際檢測中應用不廣泛常作為實驗室檢測的方法。而顯色環法前處理簡單，實驗程序簡單，短時間內可得出結果，有的廠家已將其制成商品推廣應用，效果不錯，但其也有不能定量的缺點。

生鮮乳中黃曲霉M1的檢測方法有酶聯免疫法和快速檢測卡法，這2種方法可配合使用，先用快檢卡初篩，再用酶標儀定量。至于生鮮乳中抗生素殘留的檢測方法有很多，可根據檢測目的不同選擇不同的檢測方法。例如乳制品生產企業可采用快速檢測卡對生鮮乳中的總抗生素量進行快速檢測。而酶聯免疫和儀器分析法可針對具體某一種或某一類抗生素進行定量檢測。

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2015-09-08

胡麗霞，女，1980年生，碩士，獸醫師。