消銀解毒飲對銀屑病血熱證患者皮損組織中細胞因子及外周血中T細胞亞群含量影響

萬卉蕾

（河南省鄭州人民醫院醫務部，河南 鄭州 450003）

消銀解毒飲對銀屑病血熱證患者皮損組織中細胞因子及外周血中T細胞亞群含量影響

萬卉蕾

（河南省鄭州人民醫院醫務部，河南 鄭州 450003）

目的分析消銀解毒飲治療對銀屑病血熱證患者皮損組織中細胞因子含量及外周血中T細胞亞群含量的影響。方法選擇在該院接受治療的銀屑病血熱證患者78例作為研究對象，隨機分為對照組（接受常規內科治療）、觀察組（在內科治療基礎上加入消銀解毒飲治療），每組各39例。留取皮損組織標本及外周靜脈血，檢測組織細胞因子誘導型一氧化氮合成酶（iNOS）、低氧誘導因子1α（HIF-1α）、熱休克蛋白-60（HSP60）、熱休克蛋白-90（HSP90）、白介素-2（IL-2）及白介素-6（IL-6）蛋白表達量，外周血T細胞亞群水平等差異。結果觀察組患者接受治療后的皮損組織中iNOS與HIF-1α蛋白表達量明顯低于對照組患者（P＜0.05）。觀察組患者接受治療后的皮損組織中的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達水平明顯低于對照組（P＜0.05）。觀察組患者接受消銀解毒飲治療后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較對照組上升（P＜0.05）。結論消銀解毒飲應用于銀屑病血熱證患者中，可以有效抑制皮損組織中的相關細胞因子蛋白表達，優化T細胞亞群含量平衡，促進病情康復。

銀屑病；消銀解毒飲；細胞因子；T細胞亞群

銀屑病是臨床多見皮膚病，治療難度大且易復發，是目前臨床治療的難點，給患者的身心均帶來巨大傷害。銀屑病的發生發展與機體各類細胞因子水平紊亂、T淋巴細胞失衡等均關系密切。目前中醫治療銀屑病獲得了較大的進展，中醫理論認為銀屑病病機為陽盛內熱、氣郁化火、氣血流竄且發于肌膚，治療應以消毒散瘀、消風止癢為主[1]。消銀解毒飲是目前用于銀屑病治療的一類中成藥物，主要成分為金銀花、水牛角片、牡丹皮及全蝎，可以優化患者的全身微量因子水平及免疫水平[2]。本次研究主要分析消銀解毒飲治療對銀屑病血熱證患者皮損組織中細胞因子含量及外周血中T細胞亞群含量的影響，現匯報如下：

[28][32] 唐世平：《一個新的國際關系歸因理論——不確定性的維度及其認知挑戰》，《國際安全研究》2014年第2期，第3-41、8頁。

1 資料與方法

1.1一般資料

選擇2012年5月-2014年1月在本院確診并接受治療的銀屑病血熱證患者78例作為研究對象。納入標準：①3月內無系統性應用免疫抑制劑、糖皮質激素等；②不伴有其他內科疾病，各項常規及肝腎功能檢查指標正常；③患者在了解研究過程后簽署知情同意書。排除標準：①關節炎型、紅皮病型、膿皰型銀屑病；②1年內妊娠、哺乳患者；③伴嚴重心肺系統疾病、惡性腫瘤患者；④神經或者精神病患者。根據接受的治療方式不同隨機分為觀察組及對照組，每組各39例。觀察組患者中，男性21例，女性18例；年齡23～58歲，平均（41.82±8.22）歲。對照組患者中，男性20例，女性19例；年齡22～56歲，平均（40.09±7.58）歲。兩組患者的基線資料差異無統計學意義，P＞0.05，具有可比性。

1.2治療方法

對照組患者接受銀屑病常規治療，于患處外擦青鵬膏劑，每日2次。觀察組患者在常規治療基礎上加用消銀解毒飲（水牛角、金銀花、苦參及丹皮等），每日1劑，分早晚2次服用，以6周為1療程。

熱休克蛋白（heat-shock protein，HSP）是高度保守的“分子伴侶”，在細胞內參與了多個復雜的功能活動，HSP本身還可與受體結合發揮活化巨噬細胞、增強共刺激因子表達、促進多種細胞因子釋放的作用[6]。HPSs正常情況下不表達于血液及細胞表面，當病毒感染或者機械損傷發生是，其表達迅速上調并釋放到細胞外。銀屑病的疾病病理變化是角質形成細胞的過度增殖，而角質形成細胞的生長動力是皮損區具有生長分化調控作用的細胞因子異常表達[7]。銀屑病發病過程中免疫細胞協同發揮作用，分泌IL-2、IL-6等多種細胞因子，其作用于不同細胞并相互誘生，形成自我維持的惡性炎性循環。上述研究檢測了患者病損組織中的HSPs、IL-2、IL-6表達情況，結果顯示：治療前兩組患者的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達水平差異無統計學意義（P＞0.05），觀察組患者接受治療后的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達水平低于對照組（P＜0.05），可能與消銀解毒飲的有效成分切斷了HSP及炎癥因子級聯遞呈的過程，減少T細胞進一步活化產生的特異性細胞免疫相關。

病損活檢標本采用全蛋白提取試劑盒進行蛋白抽提，蛋白定量采用BCA蛋白濃度測定試劑盒，12%聚丙烯酰胺凝膠電泳后等量樣品上樣，隨后轉膜至硝酸纖維膜。采用磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffered solution，PBS）洗膜后，5%脫脂牛奶中封閉孵育iNOS、HIF-1α、HIF-1α、HSP60、HSP90、IL-2及IL-6第一抗體。PBS洗膜后二抗稀釋并孵育1 h；洗膜后檢測采用增強化學發光試劑盒。以β-actin蛋白作為內參，設置治療前對照組蛋白含量100，計算觀察組相應指標的蛋白表達含量相對值。

免疫學發病機制是銀屑病的研究熱點，目前已經有較多動物實驗證實：銀屑病模型皮膚病損中，存在T淋巴細胞浸潤，直接提示銀屑病是一個由T淋巴細胞介導的自身免疫性疾病。關于T淋巴細胞在銀屑病發病中具體發揮的作用，有學者認為是活化的T淋巴細胞遷移至病變部位，釋放大量細胞因子進而引發角質形成細胞的過度表達及異常分化[8]。上述研究對銀屑病患者接受治療前后的外周血T細胞亞群水平進行檢測，結果顯示治療前所有患者的外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平降低，而兩組患者組間差異無統計學意義（P＞0.05），提示銀屑病患者Th細胞變少。在對患者進行不同治療后再次檢測外周血T淋巴細胞水平發現：觀察組患者的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平較對照組上升（P＜0.05），提示經消銀解毒飲治療后患者的細胞免疫平衡得到一定程度恢復，是患者病情恢復的內在原因之一。

抽取所有入組患者外周靜脈血5 ml，置于肝素抗凝管中2 h內送檢，采用流式細胞儀檢測其中T細胞亞群水平。

1.5統計學方法

[1]田海剛,胡帥,尤立平,等.涼血解毒湯對尋常型銀屑病血熱證患者外周血Th17細胞相關細胞因子的影響[J].中日友好醫院學報, 2014,28(4):212-215.

2 結果

2.1iNOS與HIF-1α蛋白表達

根據《重慶市河道管理范圍內建設項目管理辦法（修訂）》的要求，市水行政主管部門負責4類項目的審查，其他涉河建設項目由各區縣水行政主管部門審批。各區縣水行政主管部門在進行涉河建設項目相關審查時，應當按照程序審批，不能越級越權審批。

治療前兩組患者的皮損組織中iNOS與HIF-1α蛋白表達量差異無統計學意義（P＞0.05），觀察組患者接受消銀解毒飲治療后的皮損組織中iNOS與HIF-1α蛋白表達量明顯低于對照組患者（P＜0.05），見圖1。

船舶設備不同于陸上應用的相關車輛設備，其在設備安裝中如設備安裝質量不合格，其在實際應用中存在修復難度高，危險性高，且造成的經濟損失高的現象。其中具體分析安裝振動，造成的安裝質量不合格也為常見的一類故障原因。因此從設備的安裝效果方面分析，船舶設備在組件安裝中應用減振措施，對于設備組件安裝質量合格性的保障，發揮了重要的作用。規避了設備在安裝中因振動等不良現象，造成的設備組件內部損壞，安裝誤差等不良現象。

針對南通鵬越紡織有限公司從2004年成立的背景，歷來的發展軌跡和現狀，發展中所存在的問題等方面，筆者分批次對南通鵬越紡織有限公司進行了客觀全面的調研和總結。其營銷現狀主要表現如下：

2.2HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達

治療前兩組患者的皮損組織中HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達水平差異無統計學意義（P＞0.05），觀察組患者接受消銀解毒飲治療后的皮損組織中的HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達水平明顯低于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者的皮損組織中HSP60、HSP90、IL-2及IL-6蛋白表達水平比較（±s）

組別HSP60HSP90IL-2IL-6治療前治療前治療前治療前治療后觀察組99.28±0.3263.18±7.05101.72±4.1159.11±3.8698.64±1.7772.53±5.09103.28±4.0955.17±5.37對照組10091.27±6.2310090.87±5.7310092.53±3.0510091.61±4.93 t值0.177.290.267.180.366.390.259.83 P值0.3720.0130.2970.0150.4650.0190.3360.011治療后治療后治療后

2.3T細胞亞群水平

治療前兩組患者的血清T細胞亞群水平差異無統計學意義（P＞0.05），觀察組患者接受消銀解毒飲治療后的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平較對照組上升（P＜0.05），見表2。

“對！因為你走到下一條路，下個路口，只有下個山頭，你才知道它下面的選擇是怎么樣，這里的風景跟前面不一樣。有些機會是你以前想象不到的，但時間沒有變，工作還是沒有變。”緊湊的語速和敏捷的思維背后，我能感受到他的一絲疲憊。

銀屑病是臨床多見慢性復發性炎癥性皮膚病，角質形成細胞過度增殖及血管生成是該病最主要的病理生理學特征。銀屑病頑固性強、治療難度大、極易復發，給患者的身心均帶來巨大困擾。中醫學中銀屑病的發病機制主要為患者體內陰盛內熱、復感邪氣，導致氣郁化火、熱盛生風發于肌膚，治療應以消毒散瘀、清血清熱及消風止癢為主。消銀解毒飲主要成分為金銀花、重樓、牡丹皮、全蝎及赤芍等，在清熱解毒、涼血化瘀方面效果較好，可以用于銀屑病血熱證患者的治療[3]。

3 討論

目前各國學者研究或論證的能夠改變小行星軌道的技術手段包括動能撞擊、質量驅動、拖船、太陽光壓、引力牽引、激光燒蝕等[40-41]，這些技術手段通常需要幾年甚至幾十年的預警時間，僅適用于防御尺寸小、預警時間長的PHAs。各種可能的近地小行星防御技術，如圖13所示。

3.做鮮文化節目。以文化為根，挖掘具有地方元素的文化特色，是節目樣式的立足基礎。依托地方豐富的文化資源，融入時代的元素，做出鮮活的文化節目，不僅可以擴大文化的認同度，還可以提升節目品味，給受眾以視覺和精神的雙重享受。如鄂州綜藝頻道開辦的《鄂州文化長廊》欄目立足鄂州，全面展示鄂州歷史文化，有利于拓展市民的視野，豐富知識，增強歷史厚重感。

銀屑病患者角質形成細胞過度增殖、表皮肥厚加上細胞數目增多，導致其對氧的需求進一步增加，形成與局部氧供受損的矛盾。一氧化氮（nitrogen monoxidum，NO）是生物體內的重要信使分子及效應分子，由一氧化氮合成酶（nitric oxide synthase，NOS）催化生成。其中誘導型NOS（iNOS）正常情況下在組織內表達量最少，當細胞受到免疫或者炎癥感染時，iNOS表達量顯著增多并促使NO生成[4]。已經有研究證實NO在銀屑病的發生發展過程中發揮重要作用，故iNOS的水平可以間接且敏感的反映疾病嚴重程度。低氧誘導因子1α（HIF-1α）廣泛參與低氧誘導性應答，在低氧條件下可以參與眾多基因的表達，iNOS就是HIF-1α誘導的靶基因之一[5]。本次研究檢測了病損標本中的iNOS及HIF-1α表達情況，結果顯示：治療前兩組患者的皮損組織中iNOS與HIF-1α表達差異無統計學意義（P＞0.05），觀察組患者接受消銀解毒飲治療后，皮損組織中iNOS與HIF-1α蛋白表達水平大幅低于對照組患者（P＜0.05），提示消銀解毒飲可以抑制病損皮膚組織中的NO產生，遏制皮膚血管中血流量增加導致的氧供增加，阻斷銀屑病進一步進展的途徑。

1.3皮損組織中細胞因子含量

1.4外周血T細胞亞群含量

綜上所述，消銀解毒飲應用于銀屑病血熱證患者中，可以有效抑制皮損組織中的相關細胞因子蛋白表達，優化T細胞亞群含量平衡，值得在日后臨床實踐中推廣應用。

采用統計學軟件SPSS 20.0對所得數據進行統計學分析，計量資料采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

[2]夏夢,段行武,瞿幸,等.消銀解毒飲對銀屑病血熱證外周血淋巴細胞中IL-4、IFN-γ[J].背景中醫藥大學學報,2010,33(12):837-841.

翌日，小蟲陪姑媽把款交了，玉敏將那款鉆戒小心翼翼地包好。花奴開玩笑說，玉敏這回真的做了個大單，提成厚厚的。玉敏說這次是特價，沒有提成哦。一店美女嘆息，說喝不上酒了。玉敏將鉆戒盒放進一個漂亮的手提袋里，回家讓小蟲送給姑媽。小蟲送去時，姑媽在搓麻將，一邊抓牌一邊對小蟲說，你直接給你姑父送去吧，不然他要把我吃了。

[3]CZARNOWICKIT,MALAJIAND,SHEMERA,et al.Skin-homing and systemic T-cell subsets show higher activation in atopic dermatitis versuspsoriasis[J].J Allergy Clin Immunol,2015,136 (1):208-211.

[4]張凱輝,段行武.“消銀解毒飲”對銀屑病血熱證外周血淋巴細胞調控作用研究[J].世界中醫藥,2015,10(6):863-866.

[5]CAMPANATIA,ORCIANIM,CONSALESV,et al.Characterization and profiling of immunomodulatory genes in resident mesenchymal stem cells reflect the Th1-Th17/Th2 imbalance of psoriasis[J]. Arch Dermatol Res,2014,306(10):915-920.

[6]李勇堅,張桂英,肖嶸,等.HIF-1α與iNOS在銀屑病皮損中的表達及其與血管生成的關系[J].中南大學學報,2010,35(9):952-956.

[7]JACKS SM,TAYLORBR,ROGERS RP 3RD,et al.Rapid deterioration in a patient with primary aggressive cutaneous epidermotropic CD8+cytotoxic T-cell('Berti')lymphoma after administration of adalimumab[J].J Am Acad Dermatol,2014,71(3): e86-e87.

[8]VOLPE E,PATTARINIL,MARTINEZ-CINGOLANIC,etal. Thymic stromal lymphopoietin links keratinocytes and dendritic cell-derived IL-23 in patients with psoriasis[J].J Allergy Clin Immunol,2014,134(2):373-381.

Assessment of Cytokinesin skin lesions and T cell subsets content in peripheral blood after Xiaoyinjiedu Drink on patients with blood-heat syndrome of Psoriasis

Hui-lei WAN
(Department of Medical Services,Zhengzhou People's Hospital,Zhengzhou, Henan 450003,P.R.China)

【Objective】To assess Cytokinesin skin lesions and T cell subsets content in peripheral blood after Xiaoyinjiedu Drink on patients with blood-heat syndrome of Psoriasis.【Methods】78 cases of Patients with bloodheat Syndrome of Psoriasis In our hospital were chose as subjects and randomly divided into control group(received conventional medical treatment),observation group(combined with Xiaoyinjiedu Drink treatment),with 39 cases in each group.Specimens from skin lesions and peripheral blood samples to detect tissue factor inducible nitric oxide synthase(iNOS),hypoxia-inducible factor 1α(HIF-1α),heat shock protein-60(HSP60),heat shockprotein-90 (HSP90),interleukin-2(IL-2),interleukin-6(IL-6)protein expression,peripheral blood T cell subsets level.【Results】Observation group patients'iNOS and HIF-1α protein expression after treatment were significantly lower than control group patients(P＜0.05).Observation group patients'HSP60,HSP90,IL-2 and IL-6 protein expression levels were significantly lower than control group(P＜0.05).Observation group patients'CD3+,CD4+,CD4+/CD8+levels after treatment were higher than control group patients(P＜0.05).【Conclusion】Psoriasis patients with Xiaoyinjiedu Drink treatment,can effectively suppress the expression of cytokines in skin lesions,optimize T cell subsets content balance,promote disease recovery

Psoriasis;Xiaoyinjiedu Drink;Cytokines;T cell subsets

R758.63

B

1005-8982（2015）28-0062-04

2015-02-21