分析微柱凝膠技術配血的影響因素

金薇

分析微柱凝膠技術配血的影響因素

金薇

目的研究分析微柱凝膠技術配血的影響因素。方法血辮中的樣本, 于患者未抗凝血樣進行交叉配血, 探討離心速度對配血影響時, 選用不同的離心機來進行探討；探討新生兒抗體影響時, 采取選擇和新生兒血型不同血液進行交叉配血。結果采用血辮中的標本, 由于其未能與抗凝劑充分混合, 假陽性率為86.67％(52/60)；患者血樣不抗凝, 配血假陽性結果為90.63％(87/96)；如果孵育時間由15 min縮短至5 min, 陽性標本的漏檢率為66.67％(8/12)；使用不配套的離心機配血結果假陽性率為23.81％(5/21), 假陰性率為25.00％(3/12)；有21.33％(32/150)的新生兒血清中抗體形成不完全, 采用異型血交配, 可呈現出“假配合”結果。結論配血時, 如果對孵育時間、離心力等進行調整, 會造成假陽性、假陰性等結果。這是由于血清內的纖維蛋白絲沒有完全的被消耗, 也可能是因為紅細胞凝集導致的, 讓患者的血液和供血者血液發生了不抗凝情況, 導致結果假陰或假陽, 給臨床配血帶來了影響。約有21.33％的新生兒血型抗體不完全, 因此臨床為新生兒進行輸血需要對其血型進行鑒定, 確保其安全性, 單純的從配血結果來進行判斷是不足夠的。

微柱凝膠技術；交叉配血；影響因素

本科采取鹽水配血法來進行交叉配血, 但是只能對血清的完全抗體進行檢測；后來有試驗了酶法以及抗人球法等方法, 從2010年開始選擇抗人球蛋白微柱凝膠技術進行配血。該方法臨床中的特點是特異性高、靈敏度好, 使用便捷, 有較長的保存期[1］, 其他的一些方法也能夠將血清的不完全抗體檢測出來, 但是仍然沒有微柱凝膠技術優秀。在本院長期的試驗下獲得了一些該方法的使用經驗, 現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 試劑來源：(西班牙)戴安娜微柱凝膠8孔抗人球蛋白卡和血型卡、(美)強生Ortho6孔柱凝集卡。樣本來源：本院血站的血樣共60份, 產科取新生兒臍血血樣150份, 本科室對不規則抗體陽性標本和常規配血標本分別采集了12份和96份。

1.2 實驗方法 ①實驗原理：將獻血者的紅細胞與患者的血清按比例和微柱凝膠混合, 陰性結果下, 不凝集的紅細胞會沉入底部。若是患者的血清內存在完全抗體, 對其進行37℃孵育能夠讓紅細胞表面的抗原和完全抗體凝結, 進行離心處理, 無法讓其通過微柱凝膠篩, 所以結果就表現為陽性,陽性的強度是和微柱凝膠內的顆粒分布情況有關系。不完全抗體經過孵育會產生凝集顆粒, 嚴重的還會出現凝塊。②操作：按照試劑說明書嚴格操作, 首先配制3％(V/V)紅細胞懸液。做血型檢查只需加10 μL3％(V/V)紅細胞懸液直接離心。如果配血需要先加10 μL紅細胞懸液, 再加40 μL血清,孵育15 min后離心, 最后觀察結果。

2 結果

2.1 供血血樣對結果的影響 取60份供血血袋上的配血“辮子”配制成3％(V/V)的紅細胞懸液配血, 發現有些微柱中散落著細沙樣的紅色顆粒可致使結果出現假陽性, 程度在(+～++), 這樣的占86.67％(52/60)。

2.2 患者血樣不抗凝對配血結果的影響：此次研究中共有87例患者的血樣結果存在以下情況, 經離心后, 柱上有紅顆粒或紅線, 造成了結果的不準確影響, 占90.63％(87/96)。

2.3 孵育時間影響配血結果 將不規則抗體陽性標本12例進行孵育, 有4例在5 min的時候有陽性結果, 其余在15 min的時候也出現了陽性結果, 表明有8例漏檢, 漏檢率達到了66.67％(8/12)。

2.4 離心機的影響 將不規則抗體12份以及陰性配血樣本21份進行了試驗, 使用Ortho的卡和戴安娜離心機, 有3例不規則抗體陽性標本出現了假陰反應, 而使用戴安娜配血卡和Ortho離心機, 則21例陰性樣本中有5例出現了假陽結果,兩種方式的影響率都比較大, 假陽性率為23.81％(5/21)。

2.5 新生兒血型對配血結果的影響 新生兒臍血血樣150例,有21.33％(32/150)正反定型不相符。其中20例進行相反血型交叉配血(即A型配B型, B型配A型), 結果18例為陰性,其余2例弱陽性。

3 討論

微柱凝膠技術是目前使用較多, 比較先進的一種配血技術, 該技術因為出現比較晚, 所以還沒有完全的普及, 但是將來必然會是傳統試管法的替代方法, 為了在實際使用的時候, 不出現假陰和假陽反應, 需要對該技術的使用進行研究分析, 探討其影響因素, 保障輸血的安全性。處理不當會讓患者的血細胞出現假陽或假陰反應, 血液沒有獲得較好的抗凝, 出現了凝集現象, 這樣就導致了顆粒無法通過微柱而發生假陽性。

實驗使用戴安娜和Ortho兩種卡, 博唯優離心機, 前1 min將速度設定為1000 r/min, 后面4分組均為1500 r/min, 每次的離心時間定為5 min, 戴安娜離心機不變速, 離心10 min[2］。不同卡使用的離心條件也不相同, 臨床中不能夠將不同廠家的微柱凝膠卡進行混用, 這樣會給配血結果帶來較大的影響,在進行卡式配血的時候, 應該要和配套的離心機一同使用。在平時的使用中, 為了節約時間, 將孵育時間進行縮減, 這樣會給假陰帶來很大的發生幾率, 所以臨床中不能單純的求快, 即便是急診實驗也應該根據流程步驟。

臨床中對新生兒血型進行鑒定的問題需要特別的關注,正定型時, 紅細胞的抗原性弱會在檢驗的時候漏檢, 反定型因抗體而滯后也會增加錯誤幾率, 因此進行新生兒血型鑒定的時候必須細致、嚴謹, 相關人員的責任心要強。本科室曾經就有過血型錯誤的情況, 醫生誤操作將A型寫成B型, 進行復查時就發現了問題, 使用B型血交叉配血結果為陰性,為了進行驗證, 選取了5個其他的B型血樣本進行交叉配血,結果均為陰, 最后進行了24例相反血型交叉配血試驗, 結果4例陰性。此后對該現象進行了研究分析, 根據150例新生兒的反定型試驗發現, 正反定型的不符合率為21％, 與其他關于該情況的研究報道相一致[3］。因此, 臨床中對于新生兒在進行交叉配血試驗的時候應該要慎重, 避免造成輸血的風險。

目前臨床中進行配血的時候, 大多數都是用卡式配血,該方式簡單易行, 但是卻也有很多的因素會對結果帶來大的影響, 所以在享受其帶來了方便和快捷之時也不能忘了這些影響因素, 在進行配血的時候對其注意, 積極的排除, 讓配血結果準確, 給臨床輸血提供參考和安全。

[1]舒象武.應用微柱凝膠抗球蛋白技術進行交叉配血.中國現代醫學雜志,2003,13(13):116-118.

[2]Dittma K, Procter JL, Cipolone K, et al. Comparison of dats using traditional tube agglutination to gel coulumn and affinity coulumn procedures. Transfusion,2001(41):1258-1262.

[3]李勇, 楊貴貞.人類紅細胞血型學實用理論與實驗技術.北京:中國科學技術出版社,1999:251-276.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.02.153

2014-10-14］

150036 黑龍江省醫院