蒙醫溫針療法對哮喘大鼠模型病理學改變的觀察△

秀 蘭 阿古拉

(1.北京中醫藥大學基礎醫學院在讀博士研究生，北京 100029;2.內蒙古民族大學附屬醫院，內蒙古 通遼 028001;3.內蒙古醫科大學，內蒙古 呼和浩特 010010)

支氣管哮喘，是一種發生頻率極高的呼吸系統疾病，這類慢性氣道炎癥由肥大細胞、T 細胞及嗜酸性粒細胞等多種細胞及其成分直接或間接參與的氣道慢性非特異性炎癥。支氣管哮喘是嚴重危害人民群眾健康的常見病，多發病。根據世衛組織統計，全球哮喘患者已經突破3 億以上人，且兒童的發病率較高，21 世紀中葉之后以老年人群中哮喘發病率亦呈上升趨勢。數十年來，對支氣管哮喘的治療進展緩慢，在現階段，溫針防治哮喘的臨床研報道日益增多［1］;我們在臨床上采用溫針治療哮喘，取得了較好療效。目前臨床多采用激素(地塞米松)可緩解哮喘臨床癥狀，目前認為地塞米松影響Eos(嗜酸性粒細胞)浸潤的主要機制為抑制Eos(嗜酸性粒細胞)的趨化和誘導Eos(嗜酸性粒細胞)凋亡。地塞米松可作為多種炎癥介質釋放的抑制劑，而其中許多介質可誘導Eos(嗜酸性粒細胞)的趨化，如PAF(血小板活化因子)、IL-5(白介素-5)等。上皮細胞是Eos(嗜酸性粒細胞)趨化因子的主要來源［2］，亦是激素的主要IE 細胞，其可使上皮細胞因子的表達顯著下降。而溫針治療的干預機理目前主要機制為抑制Eos(嗜酸性粒細胞)的趨化和誘導Eos(嗜酸性粒細胞)凋亡有關，溫針治療支氣管哮喘機理與激素治療哮喘相似，尚待今后進一步的研究。

1 材料與方法

1.1 實驗動物：由昆明醫學院動物實驗中心提供的體重(250 ～300)g 左右的健康大鼠，雌雄各半，共40 只。隨機分成正常對照組(空白組)，陽性對照組(模型組)，溫針組(治療組)，西藥組(地塞米松組)共4 組，每組各10 只。

1.2 材料

1.2.1 主要試劑：卵清白蛋(OVA)(美國Sigma 公司)，水合氯醛：天津市科密歐化學試劑有限公司;40%甲醛：廣州化學試劑廠;1%鹽酸：廣州化學試劑廠;1%稀氨水：廣州化學品試劑廠;二甲苯：天津市富宇精細化工有限責任公司;無水磷酸氧二鈉：廣州市番禹強化工廠;PBS 緩沖液：賽默飛世爾生物化學制品有限公司;自制10%中性緩沖福爾馬林固定液：10ml 40%甲醛溶液 + 90ml PBS 緩沖液(PH =7.2);其余試劑均化驗室提供。

1.2.2 主要儀器設備：醫用超聲霧化器(CSW)1AB 型霧化器，廣州汕頭光電子研究所生產)，玻璃鐘罩，注射器;JA1203N 型分析天平：上海精密科學儀器有限責任公司;電子天平，型號：BL150/cl;萊卡切片機Leica RM2135;光學顯微鏡Olympus U- PMTVC;尼康D90 單反攝像機(Nikon);MLY-Ⅰ型蒙醫療術溫針儀(內蒙古醫學院蒙醫藥學院研制，專利號ZL201120058078.0);特制蒙醫銀針(0.5mm×30mm，內蒙古元陽中蒙醫科技開發有限責任公司提供)。

1.3 實驗步驟

1.3.1 參照OVA 致敏法制備大鼠哮喘模型［2］，將40 只健康大鼠隨機分為空白組、陽性對照組(模型組)、溫針組(治療組)、西藥組(地塞米松組)，每組10 只。用10%的卵清白蛋白生理鹽水1ml 腹腔注射，2 周后將致敏大鼠放入半密閉的玻璃鐘罩內，以超聲霧化器噴1%的卵清白蛋白溶液霧化吸入20min，以大鼠腹肌出現明顯收縮(用力呼吸的標志)，呼吸頻率增快、鼻翼煽動為陽性，連續14 天，每天1次，。陽性對照組、溫針組，西藥組均按此方法復制哮喘大鼠模型。

1.3.2 穴位選擇：穴位的定位參照《蒙醫傳統療法》赫依穴、母肺穴、子肺穴分別取第1、4、5 胸椎上凹正中處。

1.3.3 實驗方法

1.3.3.1 空白組：不給予任何處理，至第30 天開始予蒸餾水2ml/只灌胃。

1.3.3.2 陽性對照組(模型組)：制備哮喘氣道重建模型，使大鼠處于致敏狀態14 天。自第15 天起幵始霧化吸入1%卵清蛋白生理鹽水溶液以激發支氣管哮喘，隔日1 次，每次激發時間為20 分鐘。

1.3.3.3 治療組(溫針組)：哮喘氣道重塑模型大鼠，于注射抗原液第15 天開始溫針刺激，每次溫針治療均在霧化前進行。穴位選取“赫依穴”“母肺穴”“子肺穴”，將大鼠固定后，用特制銀針(直徑0.5mm，長度3 cm)斜刺后，再接蒙醫溫針儀，電流強度為100mA，溫度為40℃，留針15min 隔日1 次，7 次1 療程，2 療程后取材檢驗。

1.3.3.4 西藥組(地塞米松組)：每次霧化前30 分鐘給予地塞米松0.5 mg/kg 腹腔內注射，其佘均同模型組。

1.3.4 取材：實驗結束后以10%水合氯醛(30mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠，每組均迅速解剖截取上肺部組織進行固定后送病理科做切片。

2 結 果

各組大鼠支氣管肺組織石蠟切片病理觀察結果表明［3］：光學顯微鏡下觀察發現，正常組(空白組)大鼠支氣管-肺組織各層結構清晰，黏膜層下未見明顯炎癥細胞和嗜酸性粒細胞浸潤。陽性對照組(模型組)［4］支氣管-肺組織黏膜層下有明顯炎癥細胞浸潤及嗜酸性粒細胞浸潤，黏膜層及黏膜下有水腫，少量充血。治療組(溫針組)和西藥組(地塞米松組)大鼠支氣管一肺組織結構較清晰，黏膜及黏膜下層充血、水腫明顯減輕，黏膜層下可見少量炎癥細胞及嗜酸性粒細胞浸潤。

3 討 論

支氣管哮喘從癥侯分析屬于蒙醫“赫依”性疾病范疇內［5］。是由于長期環境污染及氣候的驟變等誘因導致三素失去自有的生理平衡，既而、赫依(氣)的功能紊亂而發本病。治宜以調體素，行赫依(氣)為總則。以蒙醫學理論赫依(氣)具有主司心靈開竅、五官清晰、促發欲望，具有調節希拉與巴達干的功能活動的作用。而赫依(氣)的正常生理功能失調是本病的主要致病因素。

蒙醫溫針療術是一種行之有效的外治方法［6］，其結合現代電子技術研制而成的溫針儀，可以達到傳統蒙醫溫針的作用。通過體外穴位刺激后相關臟腑功能得以恢復。具有改善氣血循行、調節赫依、提高機體免疫功能，激發調動和增強機體的抗病能力很好的抗炎等作用。阿古拉［7］等研究的蒙醫溫針可對足腫脹炎癥模型大鼠明顯減輕作用，表明蒙醫溫針可明顯抗炎作用。

通過實驗，溫針組和西藥組大鼠支氣管一肺組織和模型組比較結構較清晰，黏膜及黏膜下層充血、水腫明顯減輕，黏膜層下面可見少量炎癥細胞和嗜酸性粒細胞浸潤，而溫針組的炎性細胞浸潤情況較西藥組(地塞米松組)更為減輕。說明我們釆用的溫針、及地塞米松(西藥)干預后均能使EOS(嗜酸性粒細胞)的浸潤明顯減輕，而溫針的作用更為明顯。目前認為地塞米松類影藥物響Eos(嗜酸性粒細胞)浸潤的主要機制為抑制Eos(嗜酸性粒細胞)的趨化和誘導嗜酸性粒細胞凋亡。地塞米松可作為多種炎癥介質釋放的抑制劑，而其中許多介質可誘導Eos(嗜酸性粒細胞)的趨化，如PAF(血小板活性因子)和IL-5(白介素-5)等。上皮細胞是Eos(嗜酸性粒細胞)趨化因子的主要來源，亦是激素的主要IE 細胞，其可使上皮細胞因子的表達明顯下調。而溫針治療支氣管哮喘機理有可能與激素治療哮喘相似，尚待今后進一步的研究。

［1］孫濱.哮喘的發病機理與治療進展［J］. 中華結核和呼吸雜志，1994，(4)：197

［2］劉旭，張愛玲. 血小板活化因子病理、生理學研究進展［J］.國際檢驗醫學雜志，2008，8，29(8)：710-712.

［3］陳永輝，王民集. 支氣管哮喘的中西醫診斷與治療［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2008，34.

［4］馬萍，邪杰，閆玉文. 過敏性支氣管哮喘動物模型研究現狀［J］.武警醫學院學報，2010，19 (8)：677-680.

［5］安官布，金玉等.蒙醫學概述［M］.赤峰：內蒙古科學技術出版社，1995，11：13-14.

［6］博·阿古拉. 蒙醫傳統療法大成〔M〕. 赤峰：內蒙古科學技術出版社，2000.62.

［7］阿古拉、吳七柱，等. 蒙醫溫針對炎癥大鼠抗炎鎮痛作用研究〔J〕中國民族醫藥雜志，2010，11(11)：41-43