蒙藥復方有效物質基礎研究與創新藥物研究新思路

薩礎拉

(內蒙古醫科大學蒙醫藥學院，內蒙古 呼和浩特 010110)

蒙醫藥學是祖國傳統醫藥學中的組成部分之一。它吸納并借鑒了印度醫學、藏醫學、中醫學理論的精髓，經蒙古族人民的長期醫療實踐，而逐步形成的具有民族特色、地域特性、獨特理論體系及臨床特點的民族醫學［1］。其中蒙藥學研究具有悠久的歷史，據記載蒙藥學已有2800 多年的發展史［2］。

蒙藥復方為蒙醫治療疾病的主要臨床應用形式，它的組方較中藥復方固定，且同樣按照君、臣、佐、使的組方原則，它是蒙醫辨證論治理論的具體體現。近年來，諸多學者從不同角度對蒙藥復方進行了研究，主要集中在化學成分分離、成分的質控、工藝、藥效及機制、臨床觀察研究等方面，而有關蒙藥復方有效物質基礎研究則較少。毋庸置疑，蒙藥復方中，起到藥效作用的有效物質無非是諸多化學成分。通過研究，探求蒙藥復方中有效物質(有效組分、有效成分)，可揭示蒙藥復方配伍規律及作用機制，優化制劑工藝，制定復方質量控制標準，進而研發物質、藥效及毒理、機制明確的創新藥物。因此，本文簡要回顧了蒙藥復方有效物質基礎研究的意義及概況，論述了蒙藥復方有效物質基礎研究的新思路。為蒙藥現代化與國際化趨勢，本文提出蒙藥復方有效物質基礎研究與創新藥物研究結合的觀點。

1 蒙藥復方有效物質基礎研究的意義

蒙藥復方是由多種單味藥組成的藥物組合體。蒙藥復方的藥效作用是通過該特定的組合體里化學成分群作用于機體所產生的，即這些化學成分群是復方發揮藥效作用的物質基礎。明確復方中有效物質基礎，就可解釋蒙藥復方中到底哪個成分在起到藥效作用，化學成分間是怎么相互協同而作用于人體的。探求蒙藥復方中有效物質(有效組分、有效成分)，才能對蒙藥進行有效的提取、純化、優化制劑工藝、制定復方質量控制標準，可揭示蒙藥復方配伍規律及作用機制，進而研發物質、藥效及毒理、機制明確的創新藥物。因此蒙藥復方物質基礎研究是蒙藥現代化研究的重要前提和基礎。

2 蒙藥復方有效物質基礎研究的現狀分析

目前蒙藥復方有效物質基礎的研究，多集中在以復方中某個成分或某些單味藥的有效成分為指標性成分，于體外水平上，對其進行提取分離、定性及定量分析，或將對其進行藥效跟蹤，證明其蒙藥復方有效。而將其蒙藥復方作為一個整體，以藥效/藥動(PK/PD)為指標，于體內，對其進行全面分析及藥效的追蹤，從而確定復方有效物質的研究還未見報道。

2.1 以蒙藥復方中有效成分為指標性成分進行分析研究：該研究是以蒙藥復方中某一成分為指標性成分，其中該指標性成分均是在組方單味藥成分的已有研究工作的基礎上，確定分析的指標性成分，采用多種分離及分析技術對其進行研究工作。如：馬強等人［3］采用反相色譜法，建立同時測定蒙藥復方述達格-4 中高良姜素、山奈素的含量測定方法，所建立的方法準確、可行、簡便，具有良好的重復性，可為蒙藥復方述達格-4 質量控制提供依據。楊婷等人［4］采用紫外可見分光光度法，建立了蒙藥復方協日嘎-4 中總酚酸的含量測定方法。結果所建立的方法簡便、靈敏、準確，可用于復方協日嘎-4 中總酚酸的含量測定。

另外，還有部分學者，考察蒙藥復方不同配伍后，于體外，對指標性成分含量的變化影響。巴根那等人［5］以蒙藥順氣湯主藥大黃總蒽醌為指標，設計4 種不同配伍組，采用分光光度法測定其水煎煮液中溶出的總蒽醌含量。結果顯示，全方下的總蒽醌含量要高出其他配伍組。董玉等人［6］采用液相色譜法和紫外分光光度法測定蒙藥森登-4 復方不同配伍中總黃酮和楊梅素的含量，通過對結果進行統計分析，研究森登-4 不同藥味組合與總黃酮和楊梅素含量之間的關系。結果表明，全方組中總黃酮和楊梅素的提取量較高，而梔訶組中兩者的提取量較低。森登-4 不同藥味配伍的總黃酮和楊梅素溶出具有顯著性差異。

2.2 在病理模型下，以藥效為指標，追蹤蒙藥復方有效物質基礎。本研究即根據臨床療效，建立合理的病理模型，確定一種或多種藥效作用的觀測與評判指標，然后對復方及各有效組分(有效成分)進行活性追蹤。如：宋葆華等人［7］采用D-半乳糖所致衰老模型大鼠，灌服德都紅花-7 味散42 天，測定大鼠肝線粒體內丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、還原型谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)含量。結果顯示：德都紅花-7 味散能抑制肝線粒體內MDA 的生成，恢復SOD 的活力。德都紅花-7味散能提高衰老模型大鼠肝線粒體抗氧化能力，改善線粒體能量代謝，具有抗衰老作用。趙多明等人［8］將健康成年大鼠隨機分為3 組：假手術組、缺血再灌注模型組、白脈散組。術前灌胃給藥7d，末次給藥30min 后，采用改良的線栓法制作大鼠大腦中動脈閉塞再灌注(MCAO)模型。蘇醒后對其神經功能進行評分，缺血2h 再灌注24h 后觀察病灶處病理學變化，測定腦勻漿上清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、還原型谷胱甘肽含量、一氧化氮合酶(NOS)活性等。結果與模型組比較，蒙藥復方白脈散組病灶處皮層神經元腫脹壞死有所減輕，腦勻漿上清SOD 活性和GSH 含量明顯升高，MDA 含量顯著降低，T-NOS、iNOS、cNOS 活性均明顯降低，蒙藥復方白脈散對大鼠局灶性腦缺血有明顯的保護作用，其機制可能是通過有效的拮抗自由基損傷，提高腦組織抗氧化能力來實現的。如上研究只是證明了蒙藥復方的有效性，但是并沒有探究復方中發揮藥效的物質基礎。

3 關于蒙藥復方有效物質基礎研究的新思路

3.1 建立蒙藥復方血中各移行成分血清指紋圖譜，分析其“類藥成分”。1989年，日本學者田代真一提出了“血清藥物化學”的概念［9］。在此基礎上，1994年日本學者鹿野美弘和我國王喜軍、王莎莎等人發表了有關茵陳蒿的血中移行成分及藥代動力學研究、口服遠志提取物后血清及膽汁中活性成分分析的研究論文，使血清藥物化學的工作被真正付諸實踐。而蒙藥復方血清藥物化學研究仍停留在起步階段。

依據“血清藥物化學”的理念，我們可以建立蒙藥復方血中各移行成分血清指紋圖譜，在全面分析蒙藥復方入血成分、分析其“類藥成分”(類藥成分即有效物質的前體，疑似有效物質)。應用血清藥物化學進行研究時，現在多是對復方整體和各個單味藥的體內外成分進行對比分析研究，找出了移行成分、來源生藥及其代謝產物，這能為復方有效物質基礎的研究奠定基礎［10］。

3.2 在特定病理模型下，分析蒙藥復方各成分體內藥動學過程(PK)，考察復方中各成分間的協同作用及機制。在中藥復方化學研究(有效物質基礎研究)中，由于研究角度不同，國內外學者，都有很多種不同的思路和方法。其中，付建華、劉建勛［11］等認為中藥復方有效物質基礎是中醫“證”與病相結合的有效成分，其研究思路是在中醫藥理論與現代藥理論共同指導下，以臨床療效為基礎，建立動物、器官和細胞模型深入研究，最終闡明中藥復方有效物質基礎。筆者在已發表論文中也已強調：在研究復方有效物質基礎時，病理模型的重要性［12］。因此，蒙藥復方有效物質基礎研究也同樣在合理的病理模型下進行各項研究。

藥動學(Pharmacokinetics，PK)是借助動力學原理，研究血中成分的體內吸收、分布、代謝和排泄的動態變化規律及其體內時量、時效關系的學科。此前，在分析血清中蒙藥復方的“類藥成分”的基礎上，對其進行藥動學研究，分析蒙藥復方各成分體內藥動學過程。通過分析藥動學參數，評價復方中各成分間的協同效應，找到復方中各成分間的關系，從而繼續深入研究成分間的協同效應機制，如：以細胞膜上的各種藥物轉運體或代謝酶系為切入點，研究揭示成分間的協同效應機制［13-16］。但是在研究復方體內過程中，也受諸多因素的制約，多可檢測的有效成分在復方中的含量低，其血、尿和組織中的濃度更低，以至于難以檢測，要求檢測方法有足夠的靈敏度;與被檢測物在化學結構相似的類似物多樣，多種藥味的配伍影響，生物樣品中的內源性雜質、降解產物、被吸收入血的其它成分等，均可能干擾被測成分的分離，也增加了生物樣品測定的方法學難度。

3.3 在特定病理模型下，根據藥動學時間點進行藥效學追蹤(PD)，考察復方中各成分間的協同作用及機制采用特定的病理模型，根據藥代曲線結果，選擇不同藥效時間點，分別應用藥效學實驗，對其復方進行藥效學追蹤，為PK/PD關聯性分析提供PD 數據。本研究成功的關鍵在于活性指標的選擇。因此，應密切結合整體、組織器官、細胞和分子生物學等多個水平建立藥效篩選體系，根據藥動學時間點對復方進行藥效學追蹤。

3.4 建立藥動/藥效(PK/PD)模型，對其進行關聯性分析，確定蒙藥復方中有效物質。藥動學(Pharmacokinetics，PK)和藥效學(Pharmacodynamics，PD)是按時間同步進行的兩個密切相關的動力學過程，前者著重闡明機體對藥物的作用，后者描述藥物對機體的作用。二者結合有助于闡明藥物濃度-效應-時間的關系，定量的反映藥物濃度與效應的關系。PK/PD 模型自1979年建立以來被廣泛應用于化學藥物理論研究和臨床應用領域，還為發現其真正的有效物質基礎，新藥創制奠定了基礎。PK/PD 模型的一般研究步驟為：①選取合適的藥動學指標進行藥動學研究，闡明體內藥物濃度隨時間的變化規律;②選取合適的藥效學指標，判斷藥效作用產生的部位和方式，并獲得相應的效應隨時間變化的規律;③了解效應室中藥物濃度與效應之間的定量轉換關系，獲得定量轉換公式;④將轉換公式與原藥動學模型的效應室聯系起來，構成統一的PK/PD 模型。求得動學與藥效學參數，進行血藥濃度與藥效間定量關系的預測。對于蒙藥復方，多成分多靶點PK/PD 模型的建立，復方多成分多靶點的PK/PD 數據量龐大，數據間關系復雜，如何整合這些繁雜的數據得到復方的藥動學特征，并建立模型，與效應指標形成關聯成為研究的難點。今年來研究人員將人工神經網絡應用于PK/PD 模型的建立為解決這一問題而開辟了新的道路。

4 蒙藥復方有效物質基礎研究與創新藥物研究的結合

蒙醫治療疾病的優勢與特色主要是通過蒙藥復方來體現的。目前蒙藥復方還滯留在原始制劑，粗提制劑的水平上，研發出有效物質明確、藥效毒理及機制明確、安全可控的蒙藥復方是蒙藥現代化及創新的必要途徑。因此，本文提出蒙藥復方有效物質基礎的研究與創新藥物研究結合的觀點。

蒙藥復方原始制劑及粗提制劑治療某一病癥時，是諸多化學成分群協同效應的結果，但并非全部化學成分都在起到藥效作用。如果按照本文研究蒙藥復方有效物質基礎研究的新思路，探明復方中治療病癥的某一有效組分或有效成分，研制出創新藥物，既不違背蒙醫基礎理論，又能剔除復方中雜質或無用成分，從而優化，簡化復方中的有效物質，使藥效作用更加突出明確。得到明確的復方有效物質，可對其進行工藝優化、新劑型的研發、建立科學的安全性及質量控制評價體系。以上每個環節，對于蒙藥復方均是一種創新，只有這樣的創新藥物才可與其他民族藥物一同進入現代化及國際化進程。

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