HPLC法測定理氣解郁丸中橙皮苷的含量
2015-01-22 05:21:53施明王業盈
中國民族民間醫藥·下半月 2014年3期
施明+王業盈
【摘 要】 目的：研究測定理氣解郁丸中橙皮苷的含量的方法。方法：采用高效液相色譜法，以甲醇-0.1%磷酸溶液（45∶55）為流動相；流速為1.0ml/min；檢測波長為283nm。結果：橙皮苷線性范圍為0～1.140μg，平均回收率為100.3%，RSD=2.6%。結論：采用高效液相色譜法測定理氣解郁丸中的橙皮苷含量，具有快速、結果準確、操作簡便的優點，可以用于理氣解郁丸的質量控制。
【關鍵詞】 理氣解郁丸；HPLC；橙皮苷
【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2014）06-0025-02
理氣解郁丸是南京同仁堂藥業有限責任公司研制的中藥新藥，由陳皮、木香、半夏、延胡索等十余味中藥組成，具有舒肝理氣，解郁的功能，用于胸肋脹悶，氣郁不舒。陳皮為其君藥，為有效控制藥品質量，采用高效液相色譜法測定該藥品中橙皮苷的含量。
1 儀器與試藥
日本島津高效液相色譜儀，LC-10AD泵，SPD-10A型檢測器，電子分析天平（北京賽多利斯天平有限公司）。橙皮苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號0709-9803）。理氣解郁丸（南京同仁堂藥業有限責任公司）。缺味陰性對照樣品：按照制劑工藝制備相應的缺味處方藥。色譜級甲醇（Fiser）、雙蒸水，其余試劑均為分析純。
2 方法與結果
2.1 色譜條件色譜柱 SinoChrom ODS-BP柱（5μm，4.6×250mm）；流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液（45：55）；流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；檢測波長：283nm。
2.2 溶液的制備
2.2.1 對照品溶液的制備取適量橙皮苷對照品，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.1mg橙皮苷的溶液，即得。
2.2.2 供試品溶液的制備取本品1g，研細，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇80ml，水浴加熱提取4小時。提取液水浴蒸干，殘渣用甲醇溶解，轉移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得[1]。
2.2.3 陰性對照品溶液的制備取缺陳皮的樣品，同供試品溶液的制備項下操作。
2.3 干擾試驗分別吸取對照品、供試品溶液、陰性對照溶液各5μl，按2.1項下的色譜條件分別進樣測定，結果陰性無干擾[2]。
2.4 線性考察精密吸取0、1、2、3、4、5ml橙皮苷對照品溶液，將其轉移至10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度[3]。分別吸取六個濃度的橙皮苷對照品溶液5μl，注入高效液相色譜儀測定其峰面積。以峰面積Y對進樣量X（μg）進行線性回歸，得Y=10.4381+2057.1554X，r=0.9997（n=6），其線性范圍為0～1.140μg。
2.5 精密度試驗取同一批次的樣品1.0g，精密稱定，按2.2.2項下的方法制備成供試品溶液，連續進樣6次，體積5μml，測定其峰面積[4]。計算RSD為1.35%，符合要求，表明該方法的精密度較好。
2.6 重現性試驗精密稱取6份同一批號的樣品，按照2.2.2項下的方法制成供試品溶液，進樣體積5μl，注入高效液相中測定其峰面積，計算得RSD為1.28%，符合要求。表明該方法的重現性較好。
2.7 穩定性試驗取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8h進樣，進樣體積5μl，注入高效液相中測定其峰面積，計算得RSD為2.25%，符合要求。表明供試品溶液在8h內比較穩定。
2.8 加樣回收率試驗取已知含量的樣品約0.5g，精密稱定，加入一定量的橙皮苷對照品，按2.2.2項下的方法制成供試品溶液，測定其峰面積。計算得平均回收率為100.3%，RSD為2.6%，均符合要求，說明該方法可以用于橙皮苷的含量測定。具體結果見表1所示。
2.9 樣品含量測定取三批理氣解郁丸樣品各1g，精密稱定，按2.2.2項下的方法制備成供試品溶液，測定橙皮苷的含量，結果見表2所示。
3 討論
本試驗考察了索氏提取、回流提取、超聲提取方法，結果表明索氏提取時間過長；回流提取雜質多、干擾大；超聲提取檢測周期短、無雜質干擾。提取溶劑的選擇，考察了甲醇、乙醇，結果甲醇提取完全，峰形好。
參考文獻
[1] 趙曉紅，楊瑩，申睿，等.HPLC測定復方豆蔻合劑中橙皮苷含量[J].中國實驗方劑學雜志，2013，19（11）：61-63.
[2]奚永蘭，徐富柱.高效液相色譜法測定乳寧顆粒中芍藥苷的含量[J].中國民族民間醫藥，2012，21（6）：42-43.
[3]雷虹，馮偉紅.HPLC法測定枳術膠囊中橙皮苷的含量[J].中國實驗方劑學雜志，2005，11（4）：5-6.
[4] 王亞莉，程龍.杜仲顆粒質量標準研究[J].中國民族民間醫藥，2011，20（5）：34-35.
（收稿日期：2014.01.15）
【摘 要】 目的：研究測定理氣解郁丸中橙皮苷的含量的方法。方法：采用高效液相色譜法，以甲醇-0.1%磷酸溶液（45∶55）為流動相；流速為1.0ml/min；檢測波長為283nm。結果：橙皮苷線性范圍為0～1.140μg，平均回收率為100.3%，RSD=2.6%。結論：采用高效液相色譜法測定理氣解郁丸中的橙皮苷含量，具有快速、結果準確、操作簡便的優點，可以用于理氣解郁丸的質量控制。
【關鍵詞】 理氣解郁丸；HPLC；橙皮苷
【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2014）06-0025-02
理氣解郁丸是南京同仁堂藥業有限責任公司研制的中藥新藥，由陳皮、木香、半夏、延胡索等十余味中藥組成，具有舒肝理氣，解郁的功能，用于胸肋脹悶，氣郁不舒。陳皮為其君藥，為有效控制藥品質量，采用高效液相色譜法測定該藥品中橙皮苷的含量。
1 儀器與試藥
日本島津高效液相色譜儀，LC-10AD泵，SPD-10A型檢測器，電子分析天平（北京賽多利斯天平有限公司）。橙皮苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號0709-9803）。理氣解郁丸（南京同仁堂藥業有限責任公司）。缺味陰性對照樣品：按照制劑工藝制備相應的缺味處方藥。色譜級甲醇（Fiser）、雙蒸水，其余試劑均為分析純。
2 方法與結果
2.1 色譜條件色譜柱 SinoChrom ODS-BP柱（5μm，4.6×250mm）；流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液（45：55）；流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；檢測波長：283nm。
2.2 溶液的制備
2.2.1 對照品溶液的制備取適量橙皮苷對照品，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.1mg橙皮苷的溶液，即得。
2.2.2 供試品溶液的制備取本品1g，研細，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇80ml，水浴加熱提取4小時。提取液水浴蒸干，殘渣用甲醇溶解，轉移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得[1]。
2.2.3 陰性對照品溶液的制備取缺陳皮的樣品，同供試品溶液的制備項下操作。
2.3 干擾試驗分別吸取對照品、供試品溶液、陰性對照溶液各5μl，按2.1項下的色譜條件分別進樣測定，結果陰性無干擾[2]。
2.4 線性考察精密吸取0、1、2、3、4、5ml橙皮苷對照品溶液，將其轉移至10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度[3]。分別吸取六個濃度的橙皮苷對照品溶液5μl，注入高效液相色譜儀測定其峰面積。以峰面積Y對進樣量X（μg）進行線性回歸，得Y=10.4381+2057.1554X，r=0.9997（n=6），其線性范圍為0～1.140μg。
2.5 精密度試驗取同一批次的樣品1.0g，精密稱定，按2.2.2項下的方法制備成供試品溶液，連續進樣6次，體積5μml，測定其峰面積[4]。計算RSD為1.35%，符合要求，表明該方法的精密度較好。
2.6 重現性試驗精密稱取6份同一批號的樣品，按照2.2.2項下的方法制成供試品溶液，進樣體積5μl，注入高效液相中測定其峰面積，計算得RSD為1.28%，符合要求。表明該方法的重現性較好。
2.7 穩定性試驗取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8h進樣，進樣體積5μl，注入高效液相中測定其峰面積，計算得RSD為2.25%，符合要求。表明供試品溶液在8h內比較穩定。
2.8 加樣回收率試驗取已知含量的樣品約0.5g，精密稱定，加入一定量的橙皮苷對照品，按2.2.2項下的方法制成供試品溶液，測定其峰面積。計算得平均回收率為100.3%，RSD為2.6%，均符合要求，說明該方法可以用于橙皮苷的含量測定。具體結果見表1所示。
2.9 樣品含量測定取三批理氣解郁丸樣品各1g，精密稱定，按2.2.2項下的方法制備成供試品溶液，測定橙皮苷的含量，結果見表2所示。
3 討論
本試驗考察了索氏提取、回流提取、超聲提取方法，結果表明索氏提取時間過長；回流提取雜質多、干擾大；超聲提取檢測周期短、無雜質干擾。提取溶劑的選擇，考察了甲醇、乙醇，結果甲醇提取完全，峰形好。
參考文獻
[1] 趙曉紅，楊瑩，申睿，等.HPLC測定復方豆蔻合劑中橙皮苷含量[J].中國實驗方劑學雜志，2013，19（11）：61-63.
[2]奚永蘭，徐富柱.高效液相色譜法測定乳寧顆粒中芍藥苷的含量[J].中國民族民間醫藥，2012，21（6）：42-43.
[3]雷虹，馮偉紅.HPLC法測定枳術膠囊中橙皮苷的含量[J].中國實驗方劑學雜志，2005，11（4）：5-6.
[4] 王亞莉，程龍.杜仲顆粒質量標準研究[J].中國民族民間醫藥，2011，20（5）：34-35.
（收稿日期：2014.01.15）
【摘 要】 目的：研究測定理氣解郁丸中橙皮苷的含量的方法。方法：采用高效液相色譜法，以甲醇-0.1%磷酸溶液（45∶55）為流動相；流速為1.0ml/min；檢測波長為283nm。結果：橙皮苷線性范圍為0～1.140μg，平均回收率為100.3%，RSD=2.6%。結論：采用高效液相色譜法測定理氣解郁丸中的橙皮苷含量，具有快速、結果準確、操作簡便的優點，可以用于理氣解郁丸的質量控制。
【關鍵詞】 理氣解郁丸；HPLC；橙皮苷
【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2014）06-0025-02
理氣解郁丸是南京同仁堂藥業有限責任公司研制的中藥新藥，由陳皮、木香、半夏、延胡索等十余味中藥組成，具有舒肝理氣，解郁的功能，用于胸肋脹悶，氣郁不舒。陳皮為其君藥，為有效控制藥品質量，采用高效液相色譜法測定該藥品中橙皮苷的含量。
1 儀器與試藥
日本島津高效液相色譜儀，LC-10AD泵，SPD-10A型檢測器，電子分析天平（北京賽多利斯天平有限公司）。橙皮苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號0709-9803）。理氣解郁丸（南京同仁堂藥業有限責任公司）。缺味陰性對照樣品：按照制劑工藝制備相應的缺味處方藥。色譜級甲醇（Fiser）、雙蒸水，其余試劑均為分析純。
2 方法與結果
2.1 色譜條件色譜柱 SinoChrom ODS-BP柱（5μm，4.6×250mm）；流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液（45：55）；流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；檢測波長：283nm。
2.2 溶液的制備
2.2.1 對照品溶液的制備取適量橙皮苷對照品，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.1mg橙皮苷的溶液，即得。
2.2.2 供試品溶液的制備取本品1g，研細，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇80ml，水浴加熱提取4小時。提取液水浴蒸干，殘渣用甲醇溶解，轉移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得[1]。
2.2.3 陰性對照品溶液的制備取缺陳皮的樣品，同供試品溶液的制備項下操作。
2.3 干擾試驗分別吸取對照品、供試品溶液、陰性對照溶液各5μl，按2.1項下的色譜條件分別進樣測定，結果陰性無干擾[2]。
2.4 線性考察精密吸取0、1、2、3、4、5ml橙皮苷對照品溶液，將其轉移至10ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度[3]。分別吸取六個濃度的橙皮苷對照品溶液5μl，注入高效液相色譜儀測定其峰面積。以峰面積Y對進樣量X（μg）進行線性回歸，得Y=10.4381+2057.1554X，r=0.9997（n=6），其線性范圍為0～1.140μg。
2.5 精密度試驗取同一批次的樣品1.0g，精密稱定，按2.2.2項下的方法制備成供試品溶液，連續進樣6次，體積5μml，測定其峰面積[4]。計算RSD為1.35%，符合要求，表明該方法的精密度較好。
2.6 重現性試驗精密稱取6份同一批號的樣品，按照2.2.2項下的方法制成供試品溶液，進樣體積5μl，注入高效液相中測定其峰面積，計算得RSD為1.28%，符合要求。表明該方法的重現性較好。
2.7 穩定性試驗取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8h進樣，進樣體積5μl，注入高效液相中測定其峰面積，計算得RSD為2.25%，符合要求。表明供試品溶液在8h內比較穩定。
2.8 加樣回收率試驗取已知含量的樣品約0.5g，精密稱定，加入一定量的橙皮苷對照品，按2.2.2項下的方法制成供試品溶液，測定其峰面積。計算得平均回收率為100.3%，RSD為2.6%，均符合要求，說明該方法可以用于橙皮苷的含量測定。具體結果見表1所示。
2.9 樣品含量測定取三批理氣解郁丸樣品各1g，精密稱定，按2.2.2項下的方法制備成供試品溶液，測定橙皮苷的含量，結果見表2所示。
3 討論
本試驗考察了索氏提取、回流提取、超聲提取方法，結果表明索氏提取時間過長；回流提取雜質多、干擾大；超聲提取檢測周期短、無雜質干擾。提取溶劑的選擇，考察了甲醇、乙醇，結果甲醇提取完全，峰形好。
參考文獻
[1] 趙曉紅，楊瑩，申睿，等.HPLC測定復方豆蔻合劑中橙皮苷含量[J].中國實驗方劑學雜志，2013，19（11）：61-63.
[2]奚永蘭，徐富柱.高效液相色譜法測定乳寧顆粒中芍藥苷的含量[J].中國民族民間醫藥，2012，21（6）：42-43.
[3]雷虹，馮偉紅.HPLC法測定枳術膠囊中橙皮苷的含量[J].中國實驗方劑學雜志，2005，11（4）：5-6.
[4] 王亞莉，程龍.杜仲顆粒質量標準研究[J].中國民族民間醫藥，2011，20（5）：34-35.
（收稿日期：2014.01.15）
