玫瑰天竺葵組培快繁技術體系的建立

鞠玉棟+楊敏+吳維堅+李珊珊

摘 ?要：以玫瑰天竺葵莖段為外植體材料，研究其組培快繁技術體系。結果表明：初代誘導培養基以MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L為宜;繼代培養基以MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L為宜，芽增殖倍數為5.8;生根培養基以1/2MS+IBAA0.6mg/L為宜，生根率達97.5%以上，平均生根數13.8條;移栽基質以泥炭土∶珍珠巖=3∶1為宜，成活率達98.3%。

關鍵詞：玫瑰天竺葵;莖段;組織培養

中圖分類號 S682 文獻標識碼 A ?文章編號 1007-7731（2015）01-26-03

Establishment of Tissue Culture and Rapid Propagation System of Pelargonium roseu

Ju Yudong et al.

（Sugarcane Research Institute Fujian Academy of Agriculture Sciences，Zhangzhou 363005，China）

Abstract：The tissue culture and rapid propagation system of Pelargonium roseu is studied using stems as explants in this paper. The results showed that the suitable shoot-inducing medium was MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L，with inducement rate up to 96.7%.The suitable shoots multiplication culture medium was MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L，with multiplication coefficient of 5.8.The suitable rooting culture medium was 1/2MS+IBAA0.6mg/L，with rooting rate up to 97.5%，in which average number of roots was 13.8. The suitable transplant medium was peat soil∶perlite （V/V）=3∶1，with survival rate up to 98.3%。

Key words：Pelargonium roseu;Stem;Tissue culture

玫瑰天竺葵（Pelargonium roseu）屬牻牛兒苗科天竺葵屬多年生草本植物，原產于南非。其莖葉可提取具有玫瑰香氣的芳香精油，廣泛用于香皂、香水等日化產品以及芳療保健等，具有很高的經濟價值[1-2]。因其不易結實，且自然雜交易導致種性混雜，因此生產上一般采用扦插繁殖方式繁育種苗。近年來，隨著植物組培技術的迅速發展，采用組培快繁技術繁育種苗具有繁殖速度快、生長整齊、成本低等優點，因而被廣泛應用于經濟植物的種苗快繁[3]。關于天竺葵類植物的組培報道已經很多[4-7]，而玫瑰天竺葵組培研究的相關報道還較少。為此，本研究以玫瑰天竺葵莖段為試驗材料，探索促進其莖段叢生芽分化、生根及移栽的方法，為今后大規模快速生產玫瑰天竺葵組培苗提供理論和實踐依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 玫瑰天竺葵，由福建省農科院甘蔗研究所芳香植物研究中心提供。

1.2 試驗方法

1.2.1 外植體的選取及消毒 選擇健壯無病蟲害植株，切取莖段，去掉葉片，將莖段先用自來水沖洗干凈，在超凈工作臺上用70%的酒精浸泡20s，再用0.1%升汞消毒8min，無菌水沖洗4～6次備用。

1.2.2 叢生芽的誘導 采用單因素試驗設計，將消毒后莖段接種于添加不同濃度6-BA的誘導培養基上，每處理接種30個莖段，重復3次。25d后觀察并統計叢生芽分化的情況。

1.2.3 叢生芽的繼代培養 采用單因素實驗設計，將初代培養得到的叢生芽接種于添加不同濃度6-BA和NAA的繼代培養基上，每處理接種30株，重復3次。25d后觀察不同激素濃度對芽苗增殖和質量的影響。

1.2.4 試管苗生根 將生長健壯的試管苗轉入不同處理的生根培養基中，每處理接種40株，重復3次，25d后觀察并統計生根情況。

1.2.5 培養基與培養條件 誘導和增殖以MS為基本培養基，附加不同種類和濃度的激素，蔗糖30g/L，瓊脂0.5%，pH5.8;促根以1/2MS為基本培養基，附加不同種類和濃度的激素，蔗糖20g/L，瓊脂0.5%，pH5.8。培養溫度26～28℃，光照強度2 000～2 500lx，光照時間10～12h/d。

1.2.6 組培苗的煉苗與移栽 生根培養30d后轉移至室溫自然光下煉苗7d，打開瓶蓋小心取出生根苗，洗凈基部培養基，將其移栽至不同處理基質上保濕培養（相對濕度控制在80%～90%）。溫度控制在20℃左右，避免強光照射。每處理40株，重復3次，30d后統計成活率。

2 結果與分析

2.1 不同誘導培養基對外植體芽誘導的影響 將玫瑰天竺葵莖段接種到不同誘導培養基上，4d后莖段上腋芽開始萌發，25d后調查誘導率和腋芽萌發情況（結果見表1）。從表1可以看出，不同誘導處理的培養基均可誘導腋芽萌發，但未添加激素的培養基芽啟動慢，誘導率較低，隨著6-BA濃度增加誘導率逐漸上升，隨后逐漸下降，且6-BA過高時誘導芽有玻璃化產生，因此，誘導培養基以MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L為最佳，誘導快，芽粗壯。

表1 不同誘導培養基對外植體芽誘導的影響

[培養基

（mg/L）＼&外殖體數（個）＼&萌芽數（株）＼&誘導率

（%）＼&腋芽萌發狀況＼&MS＼&90＼&60＼&66.7＼&芽可萌動，生長緩慢，誘導率低＼&MS+BA0.5+NAA0.1＼&90＼&72＼&80.0＼&芽生長較快＼&MS+BA1.0+NAA0.1＼&90＼&87＼&96.7＼&芽生長迅速，芽健壯＼&MS+BA2.0+NAA0.1＼&90＼&85＼&94.4＼&芽生長迅速，芽健壯，略有玻璃化產生＼&]

2.2 不同激素配比對繼代增殖的影響 將初代誘導培養得到的玫瑰天竺葵芽接種至不同繼代培養基中進行培養。培養約8d后開始從葉腋處誘導出叢生芽（見圖1）。由表2可以看出，不同激素配比對玫瑰天竺葵增殖和生長等有顯著影響，其中以6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L增殖率效果最佳，苗生長健壯，其增殖系數為6.1。

圖1 玫瑰天竺葵繼代增殖

表2 不同激素配比對叢生芽增殖的影響

[培養基

（mg/L）＼&接種芽數（株）＼&增殖芽

苗數（株）＼&增殖系數（倍）＼&芽苗長勢＼&MS+6BA0.3+NAA0.05＼&90＼&367＼&4.1＼&植株健壯，苗綠＼&MS+6BA0.5+NAA0.05＼&90＼&549＼&6.1＼&植株健壯，苗綠＼&MS+6BA0.7+NAA0.05＼&90＼&515＼&5.7＼&植株較壯，苗淺綠，有玻璃化產生。＼&MS+6BA1.0+NAA0.05＼&90＼&489＼&5.4＼&植株較壯，苗淺綠，玻璃化較嚴重＼&]

2.3 不同激素配比對不定根誘導的影響 將約3cm長的健壯增殖芽切成單株轉入生根培養基中培養，最快約10d后開始從基部長出根，根系白色。從表3可以看出，以添加IBA0.6mg/L表現最好，生根率高達97.5%，平均每株生根數為13.8條，而其它處理都較差，生根率較低，生根數少，說明生根培養基以1/2MS+IBA0.6mg/L為佳。

表3 不同激素配比對不定根誘導的影響

[培養基

（mg/L）＼&接種數

（株）＼&生根數

（株）＼&生根率

（%）＼&平均每株

根數＼&1/2MS＼&120＼&92＼&76.7＼&7.8＼&1/2MS+IBA0.2＼&120＼&99＼&82.5＼&9.5＼&1/2MS+IBA0.4＼&120＼&108＼&90.0＼&10.3＼&1/2MS+IBA0.6＼&120＼&117＼&97.5＼&13.8＼&1/2MS+IBA0.8＼&120＼&110＼&91.7＼&11.5＼&]

2.4 不同基質對移栽成活率的影響 經煉苗后玫瑰天竺葵組培苗葉片舒展，葉色亮綠，將其轉至移栽基質上培養。不同移栽基質對組培苗成活率和生長有明顯影響，結果見表4。從表4可以看出，在泥炭土∶珍珠巖=3∶1的栽培基質上成活率最高，達98.3%，且組培苗長勢良好。

表4 不同基質對移栽成活率的影響

[栽培基質＼&移栽苗

數（株）＼&成活苗

數（株）＼&成活率

（%）＼&生長情況＼&泥炭土∶珍珠巖=3∶1＼&120＼&118＼&98.3＼&苗健壯，葉片濃綠＼&椰糠∶珍珠巖=3∶1＼&120＼&95＼&79.2＼&苗一般，葉片綠色＼&砂壤土＼&120＼&83＼&69.2＼&苗長勢差，葉色淺＼&]

3 結論與討論

（1）選擇適當的外植體是組培成功的關鍵。在選擇玫瑰天竺葵莖段作為外植體時，其成熟度明顯影響誘導效果，過嫩的莖段易消毒致死，過老則不易誘導出芽，以半成熟莖段誘導效果最佳。

（2）在玫瑰天竺葵繼代增殖過程中，過高濃度的6-BA易導致產生愈傷組織和玻璃化，適宜濃度的6-BA既可保證增殖效果，又可減少玻璃苗產生的幾率。

（3）組培苗移栽前生長在無菌、光溫等恒定條件下，抵抗力較弱，移栽后環境條件變化大往往易導致死亡。因此，移栽前一定經過煉苗，使其適應移栽后的溫度、光照等。同時，加強移栽后的管理，如保溫保濕、噴施殺菌劑等，以提高移栽成活率[8-9]。

（4）由本次試驗結果表明，玫瑰天竺葵繼代增殖培養基以MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L為宜，增殖系數為6.1;促根培養基以1/2MS+IBA0.6mg/L為宜，生根率達97.5%以上;組培苗移栽適宜基質為泥炭土∶珍珠巖=3∶1，成活率達98.3%。

參考文獻

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