楊文龍 山西煤炭中心醫院檢驗科,山西省太原市 030006
去離子水稀釋法與高速離心法減少血脂對生化檢測結果干擾的效果比較
楊文龍 山西煤炭中心醫院檢驗科,山西省太原市 030006
目的:比較分析去離子水稀釋法和高速離心法減少血脂對生化檢測結果干擾的效果。方法:進行三酰甘油即TAG干擾試驗選用相應的去離子稀釋倍數,然后再用去離子水稀釋法、高速離心法來處理血清,用t檢驗上述兩種方法消除血脂干擾的效果。結果:去離子水稀釋法與高速離心法處理后P與Ca結果之間的差異有統計學意義(P<0.05),但是比較其他各項指標,差異不明顯,沒有統計學意義(P>0.05)。結論:采用去離子水稀釋法能夠有效消除血脂對于生化檢驗結果的影響,可為臨床提供精確度更高的生化檢驗結果。
去離子水稀釋法 高速離心法 血脂 生化檢測 效果
臨床注射脂肪乳患者、急診患者的血清標本,常常會出現不同程度的渾濁,且渾濁血清中乳糜微粒的核心成分TG,能夠對入射光產生散射,對生化檢驗結果產生一定的干擾,故臨床檢驗一般需要采取相關措施降低標本中TG濃度,進一步提高檢測結果的精確性[1]。本文主要分析去離子水稀釋法和高速離心法減少血脂對生化檢測結果干擾的效果,報告如下。
1.1 一般資料 (1)標本。選取我院急診及住院患者當作標本甲、標本乙、標本丙,其中標本甲:42份新鮮乳糜血標本;標本乙:42份外觀澄清的新鮮血清;標本丙:250份乳糜血及血渾的新鮮血液標本。(2)儀器與試劑。用日立型號為7600的全自動生化分析儀,德國Eppendorf公司生產的5430臺式高速冷凍離心機。從日本株式會社日立高新技術公司購買肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)、葡萄糖(GLU)與鈣(Ca),從北京利德曼生化技術有限公司購買淀粉酶(AMY)、尿素氮(UREA)、肌酐(CREA),檢測用到的去離子水主要從雙峰創優純水設備制造廠生產出來的凈水處理設備(型號:GNRO-200)中制取。
1.2 方法
1.2.1 制備血脂濃縮液。把標本甲按照4 000rmin的速度實施常規離心獲取血清,然后根據13 000rmin的速度高速離心吸取渾濁的脂血血清,吸去下層部分,然后向余下的脂層中加入大量生理鹽水,大約是其10倍的體積,均勻混合后靜置5~10min。然后再重復上述離心稀釋過程,兌入500μl的生理鹽水留作備用。
1.2.2 三酰甘油的干擾實驗。把標本乙混合均勻后,用混合血清當作空白管標本,在高速冷凍離心機上連續數次檢測實驗指標,將余下的20ml混合血清分成10份,加入不同劑量的血脂濃縮液,然后制作出有TG濃度梯度的干擾物樣本,需要在生化分析儀器上重復性檢測上述各項指標3次。計算出空白管的平均數值與標準差,當超過空白管濃度(±1.97s)時定義為干擾。
1.2.3 去離子水稀釋法。依照干擾實驗所得結果,選用多數檢測項目無明顯干擾的最大三酰甘油濃度當作稀釋目標濃度,稀釋不一樣水平的標本直至達到目標濃度再實施生化檢測。把標本丙置于生化分析儀器上面,檢測出三酰甘油濃度實施去離子水稀釋,并將稀釋后的標本置于機器上連續檢測2次,選取平均數值再和稀釋倍數相乘得到檢測結果。
1.2.4 高速離心法。把標本丙按照13 000rmin的速度高速離心10min左右,取出下層清亮的血清生化檢測2次,選取平均數值。
1.3 統計學分析 用SPSS14.0統計學軟件分析本次檢測所得的所有數據,用t檢驗兩組數據匹配情況,然后進行線性回歸分析,若P<0.05,則結果有統計學意義。
2.1 三酰甘油干擾實驗結果 分析整個實驗過程可知:若TG在7.8mmolL之上對于P值檢測會產生干擾,若TG在14.4mmolL之上對于P值與ALT檢測均會產生一定程度的干擾,若TG數值為25.8mmolL時對于P值、ALT檢測、AST檢測均會產生干擾。故應將標本中TG濃度維持在10.9~12.6mmolL才能確保檢測結果的精準性。
2.2 去離子水稀釋法與高速離心法檢測結果比較 從表1可知:去離子水稀釋法與高速離心法處理后P與Ca結果之間的差異有統計學意義(P<0.05),但是比較其他各項指標,差異不明顯,沒有統計學意義(P>0.05),表明去離子水稀釋法與高速離心法處理結果存在較高的一致性。

表1 兩種方法減少血脂對生化檢測結果干擾的效果比較
如果TG的濃度太高可能對生化檢測的結果產生一定影響,但是急診患者一般不能確保其在就診前禁食8~12h,故其血液標本中的TG含量明顯比空腹水平高。為了降低標本中TG濃度,從而減少對生化檢測造成的影響,現階段常用方法主要有乙醚處理法、磷鎢酸-鎂-PEG法與高速離心法[2]。其中高速離心法對于血脂正常或者中度血脂異常標本的生化檢測結果不會產生太大影響,其檢測結果在高速離心前、后大體一致,針對高度血脂異常的血清用這種方法能夠有效消除血脂干擾。然而高速離心機價格昂貴,且其在檢驗科無其他特殊作用,所以通常情況下檢驗科不會配備高速離心機[3]。其余兩種檢測方法因為在試劑中添加了其他附加成分,檢測的反應系統已經發生改變,操作步驟繁瑣,不能精確地檢測出相關生化指標。
本文結果表明:去離子水稀釋法與高速離心法處理后P與Ca結果之間的差異有統計學意義(P<0.05),但是比較其他各項指標,差異不明顯,沒有統計學意義(P>0.05)。這與研究結果[4]相吻合。說明了各項檢測指標基本上可以反映出患者肝腎功能情況,可以用來初步診斷急性胰腺炎與急性心肌梗死,其大體滿足急診生化檢驗需求。同時研究結果中P與Ca的檢測結果存在明顯差異,其中P檢測結果差異大可能受到TG干擾程度大。去離子水稀釋后標本TG平均數值8.0mmolL>TG對P干擾數值7.8mmolL,說明稀釋倍數欠佳,需要深入稀釋才可以得到更加精確結果。針對存在腎功能障礙可疑性高磷血癥患者而言,可以由TG結果決定稀釋倍數,以便于得到精確結果。Ca2+檢測所得結果差異大可能是因為稀釋以后標本中的Ca2+含量比試劑盒的檢測下限低,一般而言Ca2+試劑線性在1.3~3.8mmolL范圍內,采用去離子水稀釋以后標本中的Ca2+濃度約為0.83mmolL,而標準差是0.17mmolL,故去離子水稀釋法不適合用在消除血脂對Ca2+影響方面[5]。值得注意的一點是在采用去離子水稀釋方法消除TG干擾的情況下,須選用合適的稀釋倍數,確定TG濃度對于各項檢驗指標的干擾程度。
總之,采用去離子水稀釋法能夠有效消除血脂對于生化檢驗結果的影響,為臨床提供精確度更高的生化檢驗結果。
[1] 張蘊秀.稀釋法消除血脂對生化檢測結果干擾的效果評價〔J〕.武警醫學,2012,6(4):136-138.
[2] 劉萬彬,隆維東.聚乙二醇4000處理脂血后對生化結果的影響〔J〕.國際檢驗醫學雜志,2012,7(4):113-116.
[3] 張帆.高速離心對臨床常規生化項目測定結果的影響〔J〕.國際檢驗醫學雜志,2010,9(8):219-222.
[4] 韓曉娜.高血脂癥對生化檢驗項目的干擾及消除〔J〕.大家健康:學術版,2014,2(1):35-37.
[5] 朱東.臨床上血液標本的采集送檢對生化檢測結果的干擾與分析〔J〕.中國社區醫師:醫學專業,2011,7(19):238-241.
(編輯落落)
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1001-7585(2015)12-1649-02
2014-10-14