IL-18、IL-1β水平與非酒精性脂肪性肝病的關系

陳艷麗，張 寶，管石俠，侯麗麗，蔣建華

IL-18、IL-1β水平與非酒精性脂肪性肝病的關系

陳艷麗，張 寶，管石俠，侯麗麗，蔣建華

目的探討血清炎癥因子白細胞介素18（IL-18）、白細胞介素1β（IL-1β）與非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的關系。方法選取NAFLD患者作為NAFLD組（n＝46）、正常對照者作為對照組（n＝45），對被選人群進行問卷調查、體格測量、人體成分分析及肝臟超聲檢查。收集其體檢報告。ELISA法檢測血清IL-18、IL-1β。結果NAFLD組體質指數（BMI）、內臟脂肪面積、體脂百分比、腰臀百分比、白細胞計數、中性粒細胞絕對數、淋巴細胞計數、空腹血糖、三酰甘油（TG）、極低密度脂蛋白、谷丙轉氨酶、血尿酸及IL-18、IL-1β均明顯高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。同時，相關分析顯示血清IL-18及IL-1β水平與BMI、TG均有相關性。結論 在NAFLD患者血清中炎癥因子IL-18、IL-1β均明顯升高，IL-18、IL-1β參與的慢性炎癥反應可能是NAFLD的病因之一。

非酒精性脂肪性肝病；白細胞介素18；白細胞介素1β

非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）被定義為在無過度飲酒情況下，肝臟脂肪堆積［1］，其疾病譜包括單純性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholicsteatohepatitis，NASH）及與之相關的肝硬化［2］。NAFLD與肥胖、2型糖尿病關系密切，現在大多認為NAFLD是代謝綜合征的一部分，共同的病理機制是胰島素抵抗和系統性炎癥［3］。炎癥小體是病原相關分子模式及損傷相關分子模式的內源性或外源性的感受器，切割促炎因子如白細胞介素18（interleukin-18，IL-18）和白介素1β（interleukin-1β，IL-1β）的前體［4］。IL-18是T細胞介導肝損傷的必須媒介，由于IL-18在分泌γ-干擾素的同時產生大量的腫瘤壞死因子α、白介素6等細胞因子加劇了免疫功能和代謝紊亂，在肝損傷中起著重要作用［5］。IL-1β可通過促進胰島β細胞的一氧化氮生成和細胞凋亡而引起β細胞選擇性的破壞，誘導胰島素抵抗。白介素家族已被許多實驗證實可以影響胰島素、血糖代謝及調節代謝障礙。該研究通過檢測NAFLD人群IL-18、IL-1β炎癥標志物水平，探討IL-18、IL-1β與NAFLD之間的關系。

1 材料與方法

1.1 病例資料選擇2013年7月在安徽醫科大學第一附屬醫院體檢中心健康體檢人群符合NAFLD的診斷標準的46例NAFLD患者為NAFLD組，以同期同一單位體檢正常者45例作為對照組。NAFLD人群均符合中華醫學會肝臟病學分會脂肪肝和酒精性肝病學組2010年修訂的《非酒精性脂肪性肝病診斷標準》［6］。入選對象均排除病毒性肝炎及其他肝臟疾病、嚴重心腦腎疾病、嚴重感染、腫瘤和長期服藥史。對照組男28例，女17例，年齡41～71（51.68±8.40）歲；NAFLD組男30例，女16例，年齡41～71（52.10±8.60）歲。各組在年齡、性別比例等方面差異無統計學意義，組間均衡性好，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1問卷調查 采用自行設計的健康狀況調查表對研究對象進行面對面調查，內容包括一般信息、生活方式、疾病史等，由調查員填寫問卷。

1.2.2一般指標檢測 所有受試者在清晨空腹進行體格檢查，由經過培訓的工作人員測量身高、體重、收縮壓（systolic blood pressure，SBP）、舒張壓（diastolic blood pressure，DBP）。

1.2.3人體成分指標 采用韓國Biospace Inbody 720人體成分分析儀進行人體成分檢測，記錄相關指標，包括體質指數（body mass index，BMI）、內臟脂肪面積（visceral fat area，VFA）、體脂百分比（percent body fat，PBF）、腰臀比（waist-hip ratio，WHR）。其中WHR指腰與臀之間的周長比率，通常用來判斷腹部肥胖，因為與其密切相關。女性WHR≥0.85、男性WHR≥0.90時可判斷為腹部肥胖；VFA用來判斷腹部內臟脂肪的橫截面積，內臟脂肪的增加意味著肥胖和身體老化，尤其會增加生活習慣性疾病的發病率。

1.2.4生化指標檢測 ①所有研究對象清晨空腹采靜脈血，分離血清。血液細胞計數采用日本Sysmex公司XE-2100五分類全自動血細胞分析儀測定白細胞計數（white blood cell，WBC）、中性粒細胞絕對數（absolute neutrophil count，NEUT）、淋巴細胞絕對數（absolute lymphocyte count，LYMP），血液生化檢查采用Roche公司日立-7600型生化儀測定空腹血糖（fasting plasma glucose，FPG）、三酰甘油（triglycerides，TG）、谷丙轉氨酶（alanine transaminase，ALT）、谷草轉氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、極低密度脂蛋白（very low density lipoprotein，VLDL）、血尿酸（blood uric acid，UA）。②IL-18和IL-1β使用ELISA試劑盒（蘇州卡爾文生物科技有限公司R＆D分裝）測定，嚴格按照說明書操作。用Bio-Tek酶標儀在450 nm波長下讀取各孔吸光度值，并根據繪制的標準曲線計算出相應的濃度。

1.3 統計學處理采用SPSS 16.0統計軟件進行分析，數據以±s表示。兩組間比較采用t檢驗，檢驗水準α＝0.05。相關分析采用Pearson直線相關分析。

2 結果

2.1 兩組人群基本指標及人體成分指標比較比較兩組人體成分、血壓指標，兩組DBP差異無統計學意義；而NAFLD組的SBP、BMI、VFA、PBF、WHR顯著高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05，P＜0.01），見表1。

表1 兩組研究對象基本指標及人體成分指標比較（±s）

表1 兩組研究對象基本指標及人體成分指標比較（±s）

與對照組比較：*P＜0.05，**P＜0.01

2.2 兩組研究對象血液指標比較兩組人群的TC、AST方面差異均無統計學意義；而NAFLD組的WBC、FPG、VLDL、ALT、UA均顯著高于對照組（P＜0.01），NEUT、LYMP、TG也明顯高于對照組（P＜ 0.05），差異有統計學意義。見表2。

表2 兩組研究對象血液指標比較（±s）

表2 兩組研究對象血液指標比較（±s）

與對照組比較：*P＜0.05，**P＜0.01

2.3 IL-18和IL-1β濃度比較血清IL-18、IL-1β濃度在NAFLD組［（121.01±39.61）、（23.78± 9.40）pg／ml］均明顯高于對照組［（98.08± 40.10）、（19.06±9.42）pg／ml］，差異有統計學意義（t＝－2.550、－2.307，P＝0.013、0.024）。

2.4 相關性分析NAFLD組IL-18與BMI、TG呈正相關性（r＝0.361、0.372，P＜0.05），見圖1、2。IL-1β與BMI、TG呈正相關性（r＝0.345、0.465，P＜0.05），見圖3、4。

3 討論

本研究結果顯示，NAFLD組人群BMI、PBF、WHR、VFA均明顯高于對照組，說明肥胖程度高于對照組，特別是腹型肥胖尤為明顯。研究［7］表明超質量、Ⅰ度肥胖、Ⅱ度肥胖組與正常質量組相比，脂肪肝患病風險分別增加了1.7、1.9、9.1倍，脂肪肝組較非脂肪肝組超質量或肥胖檢出率顯著增高。Caballería et al［8］發現肥胖個體高達25.2%，將超重者計入可達69.2%；其中46.1%的肥胖者和25.8%的超重者患有NAFLD，這些因素與該疾病密切相關（與正常體重者相比，超重及肥胖者與NAFLD發病的OR值分別為2.19、6.78）。但經多分類協變量分析顯示差異無統計學意義，其原因可能是肥胖的程度與脂肪肝無密切關系，但肥胖相關代謝紊亂的程度與脂肪肝的發生密切相關［7］。

NAFLD組的TG、ALT、VLDL升高明顯，可能是由于肥胖者體內脂肪組織增多，體內脂肪酸和游離脂肪酸釋出增加，肝臟脂肪氧化磷酸化和脂肪酸β氧化受損使脂肪酸分解下降，TG合成增多集聚肝臟形成脂肪肝。肝內TG的合成速度超過VLDL的合成及泌入血液的速度時，便出現TG的堆積［9］，并促使肝臟合成VLDL增加，最終導致肝功能異常。

慢性炎癥和氧化應激在NAFLD起著重要的作用。WBC在臨床實踐中是一個簡單經濟的炎癥標志物。本研究顯示，WBC、NEUT、LYMP在NAFLD組較對照組顯著增加，表明NAFLD患者體內炎癥活動性可能增強。有研究［10］表明NAFLD組的WBC、NEVT、LYMP顯著高于對照組，同時Lee et al［11］認為慢性低度系統炎癥表現為WBC的高水平是非酒精性脂肪性肝病的獨立危險因素。Alkhouri et al［12］證實WBC／LYMP可作為NASH患者疾病嚴重程度的新的非侵入性標記。

IL-18和IL-1β是重要的炎癥細胞因子，在機體的免疫和炎癥反應中發揮著重要的作用。IL-18是重要的參與炎癥反應的前炎癥細胞因子，可通過激活單核細胞、巨噬細胞、淋巴細胞和內皮細胞產生，在自身免疫性疾病、炎癥及感染性疾病中起重要作用。研究［13］表明，與正常組相比，血清IL-18在肝硬化、NAFLD及NASH患者分別是其7.5、8、16倍。有研究［14］表明多囊卵巢綜合征患者IL-18、IL-1β顯著高于對照組，與BMI呈正相關性。研究［5］顯示IL-18與TG呈正相關性。有研究［15］表明糖尿病組血清IL-1β與BMI、TG呈正相關性。本研究結果與上述基本一致。IL-1β參與慢性炎癥的發生、發展，由以上研究推測非NAFLD的發生同樣有IL-1β的參與。同時NAFLD與肥胖之間的炎癥反應關系相互作用，有待進一步的研究。

綜上所述，IL-18、IL-1β在NAFLD發病機制中可能起重要作用，但之間的相互作用機制有待進一步研究。通過血清IL-18、IL-1β濃度的變化，從側面反映NAFLD患者肝損傷的程度，對判斷NAFLD的進展及預后有一定價值。

［1］ Kim N H，Park J，Kim S H，et al.Non-alcoholic fatty liver disease，metabolic syndrome and subclinical cardiovascular changes in the general population［J］.Heart，2014，100（12）：938－43.

［2］ Farrell G C，Larter C Z.Nonalcoholic fatty liver disease：from steatosis to cirrhosis［J］.Hepatology，2006，43（2 Suppl 1）：S99－S112.

［3］ Tapan S，Dogru T，Kara M，et al.Circulating levels of interleukin-18 in patients with non-alcoholic fatty liver disease［J］.Scand J Clin Lab Invest，2010，70（6）：399－403.

［4］ Henao-Mejia J，Elinav E，Jin C，et al.Inflammasome-mediated dysbiosis regulates progression of NAFLD and obesity［J］.Nature，2012，482（7384）：179－85.

［5］ 程 勇，言紅健，孟 杰，等.非酒精性脂肪性肝病患者肝損傷程度與IL-18、IL-8含量的相關性［J］.中國老年學雜志，2011，31（9）：1528－9.

［6］ 中華醫學會肝臟病學分會脂肪肝和酒精性肝病學組.非酒精性脂肪性肝病診療指南（2010年修訂版）［J］.臨床肝膽病雜志，2010，26（2）：120－4.

［7］ 向國卿，孟憲云，張 浩，等.脂肪肝相關危險因素的評估［J］.世界華人消化雜志，2009，17（10）：1038－41.

［8］ Caballería L，Pera G，Auladell M A，et al.Prevalence and factors associated with the presence of nonalcoholic fatty liver disease in an adult population in Spain［J］.Eur J Gastroenterol Hepatol，2010，22（1）：24－32.

［9］ 喬京貴，趙聰亞，張淑芬，等.非酒精性脂肪肝的相關指標分析［J］.陜西醫學雜志，2012，41（8）：1009－11.

［10］李 靜，周利霞，王俊明，等.非酒精性脂肪性肝病胰島素抵抗程度與全血細胞計數的相關性［J］.中國老年學雜志，2012，32（16）：3371－3.

［11］Lee Y J，Lee H R，Shim J Y，et al.Relationship between white blood cell count and nonalcoholic fatty liver disease［J］.Dig Liver Dis，2010，42（12）：888－94.

［12］Alkhouri N，Morris-Stiff G，Campbell C，et al.Neutrophil to lymphocyte ratio：a new marker for predicting steatohepatitis and fibrosis in patients with nonalcoholic fatty liver disease［J］.Liver Int，2012，32（2）：297－302.

［13］Felipo V，Urios A，Montesinos E，et al.Contribution of hyperammonemia and inflammatory factors to cognitive impairment in minimal hepatic encephalopathy［J］.Metab Brain Dis，2012，27（1）：51－8.

［14］楊 艷，喬 杰，李美芝，等.白細胞介素18、白細胞介素1β與多囊卵巢綜合征發病的相關性研究［J］.中國實用婦科與產科雜志，2008，24（1）：38－40.

［15］王 露，張 微.血清白介素-1β水平與2型糖尿病及肥胖的相關性分析［J］.中國醫學工程，2011，19（7）：60－1.

Study on the correlation between interleukin-18，interleukin-1β and nonalcoholic fatty liver disease

Chen Yanli，Zhang Bao，Guan Shixia，et al
（Dept of Clinical Nutriology，The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University，Hefei 230022）

ObjectiveTo investigate the relationship of the serum levels of interleukin-18（IL-18），interleukin-1β（IL-1β）with pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease（NAFLD）.Methods46 cases of NAFLD patients，45 cases of normal controls were selected，questionnaire survey，physical measurement，body composition and liver ultrasound were conducted for selected population.Collect the physical examination report，serum levels of IL-18 and IL-1β were examined by ELISA.ResultsThe body mass index（BMI），visceral fat area，percent body fat，waist-hip ratio，white blood cell，absolute neutrophil count，absolute lymphocyte count，fasting plasma glucose，triglycerides（TG），very low density lipoprotein，alanine transaminase and blood uric acid，serum levels of IL-18 and IL-1β were significantly higher in NAFLD group than in control group（P＜0.05），with statistical significance.The correlative analysis showed that the serum levels of IL-18 and IL-1β were correlated with body mass index and triglycerides.ConclusionSerum levels of IL-18 and IL-1β in NAFLD group are higher than those in control group，IL-18 and IL-1β participating in chronic inflammation may be one of the causes of NAFLD.

nonalcoholic fatty liver disease；interleukin-18；interleukin-1β

R 589.2

1000－1492（2015）02－0181－04

2014－10－23接收

安徽省年度科研項目（編號：1301043019）

安徽醫科大學第一附屬醫院臨床營養科，合肥 230022作者簡介：陳艷麗，女，碩士研究生；蔣建華，女，主任醫師，副教授，碩士生導師，責任作者，E-mail：Jjhua＠yeah.net