生長抑制劑對草莓莖尖離體保存的影響

史芳芳

（新疆生產建設兵團第十二師農業科學研究所，新疆烏魯木齊 830088）

生長抑制劑對草莓莖尖離體保存的影響

史芳芳

（新疆生產建設兵團第十二師農業科學研究所，新疆烏魯木齊 830088）

試驗結果表明，培養基中添加濃度為1.0 mg·L-1的多效唑可保存草莓試管苗至6個月；6.0 mg·L-1脫落酸結合6℃低溫處理，可使試管苗保存20個月；2.1%的甘露醇結合6℃低溫處理，可使試管苗保存15個月。

草莓莖尖；多效唑；脫落酸；甘露醇；離體保存

為探討生長抑制劑對草莓莖尖離體保存的影響，特進行培養基添加多效唑、脫落酸、甘露醇3種生長抑制劑對草莓紅顏試管苗生長保存影響的試驗。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗材料為紅顏草莓栽培品種，由新疆生產建設兵團十二師農業科學研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 培養材料的建立

取匍匐莖的莖尖在流水下沖洗30 min，先用75%醫用酒精消毒30 s，然后再用0.1%升汞水消毒6 min，最后無菌水沖洗3～4次后剝去外層包片，將莖尖接種在MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1（pH值5.8）培養基上進行芽分化培養，產生的叢生芽供試驗用。

1.2.2 多效唑處理

采用250 m L的組培瓶，每瓶裝入附加不同濃度（0，0.1，0.3，0.5，1.0 mg·L-1）多效唑的MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1培養基20 mL，每處理10瓶，每瓶接入5個單芽，在（25± 1）℃下每日光照14 h，光強1 500～2 000 lx條件下培養保存。

1.2.3 脫落酸處理

用250 m L的組培瓶，每瓶裝入附加不同濃度（0，0.1，0.3，0.9，2.7，4.5，6.0 mg·L-1）的MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1培養基20 m L，每處理10瓶，每瓶接入5個單芽，在培養室內培養，培養25～30 d后，置于低溫培養箱內保存。培養室的培養條件：溫度為（25±l）℃，每日光照為14 h，光強為1 500～2 000 lx。低溫培養箱培養條件：溫度為（6±2）℃，每日光照為15 h、光強為1 500～2 000 lx。保存結束后進行繼代培養。

1.2.4 甘露醇處理

用250 m L的組培瓶，每瓶裝入附加不同濃度（0，0.3%，0.9%，1.8%和2.1%）甘露醇的MS +6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1培養基20 m L，每處理10瓶，每瓶接入5個單芽，在培養室內培養，培養25～30 d后，置于低溫培養箱內保存，培養條件同上。保存結束后進行繼代培養。

2 結果與分析

2.1 多效唑的影響

由表1可知，當保存至6個月時，對照與0.1，0.3 mg·L-1處理試管苗的根發黃，葉色黃綠（綠），而0.5，1.0 mg·L-1處理還有白色根，葉色深綠，對照成活率最低，為76%；當保存至7個月時，對照與低濃度0.10 mg·L-1處理的芽全部死亡，而0.3，0.5，1.0 mg·L-1處理成活率分別為20%，33%和40%。

2.2 ABA的影響

2.2.1 常溫下的影響

由表2可見，當保存7個月時，不含ABA的試管苗枯葉率為80%，隨著培養基中ABA含量的增加，枯葉率也隨之降低，說明ABA可延緩草莓試管苗的衰老。當ABA濃度為6.0 mg·L-1時，枯葉率又達到70%，此時植株受到傷害，停止生長。從每個月統計的試管苗的成活率來看，ABA濃度為4.5 mg·L-1時，保存效果最好，保存至12個月時，成活率可達88%，比對照的試管苗保存期延長5個月以上。

2.2.2 低溫下的影響

由表3可見，保存到15個月，從試管苗的芽成活率及叢芽長勢來看，ABA處理有利于草莓試管苗的保存，較高濃度（3.6，6.0 mg·L-1）ABA對草莓試管苗保存效果較好。在低溫下保存15個月后，試管苗轉移至常溫培養室中進行再培養。觀察結果為：培養1個月后，濃度3.6，6.0 mg·L-1處理的試管苗生長最好；培養2個月后，不含ABA的試管苗死亡，其他處理的試管苗生長正常；培養3個月后，濃度3.6，6.0 mg·L-1處理的試管苗生長較好；培養4個月后，0.1 mg·L-1處理的試管苗死亡；培養5個月后，0.3 mg·L-1處理的試管苗成活率為30%，其余處理的為100%。

表1 多效唑對紅顏早生草莓試管苗保存的影響

表2 ABA對不同保存時間草莓試管苗成活的影響

表3 低溫下ABA對試管苗保存效果的影響

2.3 甘露醇的影響

由表4可見，試管苗在低溫下保存到15個月時，經甘露醇處理的試管苗成活率為100%，對照為40%，試管苗較壯。

表4 低溫下甘露醇對草莓試管苗保存效果的影響

3 小結與討論

多效唑是一種高效植物生長延緩劑，在植物體內抑制貝殼杉烯酶的活力，從而阻礙赤霉素的生物合成，使植株矮化。許多研究結果表明，多效唑可控制試管苗生長，調節生長速度，延長試管苗的保存時間。在本試驗中，多效唑可延長草莓試管苗的保存時間至6個月，這是因為多效唑的抑制效應在一定濃度范圍內隨濃度的升高而加強，但高濃度的多效唑對試管苗有毒害甚至致死作用。可見，適當濃度的多效唑能達到壯苗的目的，但對于草莓紅顏來說，超過6個月，多效唑的加入則抑制其生長。因此，多效唑應針對不同物種適量添加。

培養基中的生長抑制物質ABA具有調節植物發育、細胞分裂的作用，并使植物對干旱、寒冷等環境脅迫具有響應能力，可延長試管苗保存時間。本試驗中，培養基中添加ABA后，常溫下試管苗的芽增殖及叢芽生長明顯緩慢，根的發生也得到抑制，試管苗的保存時間得到延長，濃度為4.5 mg· L-1的ABA對草莓試管苗的保存效果最好，比不添加ABA的試管苗延長5個月以上，濃度為6.0 mg· L-1的ABA對草莓試管苗輕微傷害。而在低溫下，6 mg·L-1的ABA對草莓試管苗的保存效果最好，這是因為ABA對逆境脅迫有防衛作用，對逆境信號的轉導。可啟動植物體內的應激反應，提高植物防御逆境因子脅迫能力。培養基中添加一些高滲化合物，如甘露醇，是一種常用的緩慢生長保存手段。利用這一原理，甘露醇在多種植物種質資源保存中得到應用。研究表明，添加1%～5%甘露醇的MS培養基對莖尖的生長有抑制作用。本試驗中，2.1%的甘露醇結合低溫處理可使草莓試管苗種質保存15個月，試管苗叢生芽長勢最佳。

綜上分析認為，在草莓紅顏莖尖離體保存中，培養基中添加ABA較多效唑、甘露醇更有利于延長試管苗的保存時間。試管苗在低溫條件下保存效果比常溫下更好。

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（責任編輯：張瑞麟）

S 668.4

：A

：0528-9017（2015）10-1574-02

文獻著錄格式：史芳芳.生長抑制劑對草莓莖尖離體保存的影響［J］.浙江農業科學，2015，56（10）：1574-1575，1657.

10.16178/j.issn.0528-9017.20151015

2015-05-05

史芳芳（1977-），女，山東昌邑人，助理研究員，碩士，從事農業技術推廣及科研工作。E-mail：451784039@qq.com。