外源激素誘導母犬同期發情和排卵試驗

張躍駿，李靜，李飛翔，毛愛國，陳方良，韋云芳，汪斌，唐樹生，萬九生

（公安部昆明警犬基地云南昆明650204）

Zhang Yuejun,Li Jing,Li Feixiang,Mao Aiguo,Chen Fangliang,Wei Yunfang,Wang Bin, Tang Shusheng*,Wan Jiusheng**

（Kunming police dog base,Ministry of public security,Kunming Yunnan 650204,）

外源激素誘導母犬同期發情和排卵試驗

張躍駿，李靜，李飛翔，毛愛國，陳方良，韋云芳，汪斌，唐樹生*，萬九生**

（公安部昆明警犬基地云南昆明650204）

為取得良好的同期發情效果和排卵率，采用PMSG和HCG激素聯合使用誘導母犬發情和排卵。采用外部觀法和公犬試情的發情鑒定方法，觀察PMSG和HCG對犬誘導發情的影響，結果：PMSG連用5 d的Ⅱ實驗組和連用7 d的Ⅲ實驗組均表現出100%的發情率，并且均高于連用3 d的Ⅰ試驗組的發情率（40%）和空白對照組的發情率（0%）。同時，利用外科手術的方法觀察發情母犬排卵情況，結果：Ⅴ組和Ⅵ組2個實驗組均獲得了100%發情率，發情母犬分別獲得55%和75%的排卵率，且排卵率兩者差異顯著（P＜0．05）。試驗證明外源使用PMSG和HCG可以有效誘導乏情期母犬同期發情和排卵。

工作犬；外源激素；同期發情；誘導排卵

Zhang Yuejun,Li Jing,Li Feixiang,Mao Aiguo,Chen Fangliang,Wei Yunfang,Wang Bin, Tang Shusheng*,Wan Jiusheng**

（Kunming police dog base,Ministry of public security,Kunming Yunnan 650204,）

近年來，隨著中國經濟和社會發展水平的不斷提高，對寵物犬、工作犬需求也大幅提升，尤其是對工作犬提出了更高的質量要求。由于犬存在特殊的生殖生理特性和繁殖規律，犬雖為多胎生動物，但是發情周期比較長，通常在126～240 d（4～8個月，平均為6個月）[1-2]，若錯過發情期或發情期未受孕，產仔數就會大大減少。試驗借鑒在豬牛羊等大家畜領域應用較為廣泛的采用PMSG+HCG外源激素處理方法，結合犬在生殖生理上的特殊性，針對本地區氣候條件下的乏情期母犬進行誘導發情，并觀察誘導發情犬排卵效果，旨在建立一種適合于本地區氣候條件的、具有實踐價值的誘導工作犬同期發情的技術體系，以縮短工作犬的繁殖周期或實現同期、統一配種繁殖，達到提高工作犬繁殖力，實現訂單式高效益工作犬繁育的目的。同時，可靠的同期發情誘導在犬的胚胎移植中的作用也是至關重要的。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1．1．1 試驗動物

選擇公安部昆明警犬基地健康母犬，包括昆明犬、馬里努阿犬2個犬種，年齡1～2歲，未經產處于間情期。犬只開始試驗時進行集中飼養統一管理，每天飼喂2次，自由飲水，使試驗在同一水平進行。

1．1．2 試驗地點與時間

本試驗均在云南省昆明市盤龍區黑龍潭公安部昆明警犬基地內完成。試驗一：2013年8月15日至2013月9月5日；試驗二：2013年9月10日至2013月9月30日。

1．1．3 主要試劑與藥物

孕馬血清促性腺激素(PMSG)，由寧波第二激素廠生產，生產批號：130422；人絨毛膜促性腺激素（HCG），由寧波第二激素廠生產，生產批號：130408。

1.2 試驗方法

1．2．1 激素處理

試驗一：將40只供試犬隨機分成4組，每組10只，每組均是8只昆明犬，2只馬里努阿犬。3個實驗組，1個對照組。按表1所示方式給藥處理，觀察和統計犬只的發情情況。

表1 人工誘導發情藥物程序篩選

試驗二：將40只供試犬隨機分成2組，每組20只，每組均是18只昆明犬，2只馬里努阿犬。按表2所示方式給藥處理。觀察和統計犬只的發情情況，利用手術剖腹的方法觀察適配發情犬卵泡發育和排卵情況。

表2 人工誘導發情用藥程序優化

1．2．2 誘導犬發情的鑒定方法

1.2.2.1 外陰和行為變化

發情犬的陰門水腫變大，陰門下角懸垂有小滴，陰道出現血樣分泌物時說明犬進入發情前期，此時犬表現不安及激動，有的母犬相互爬跨，但公犬試情不接受爬跨；當陰唇水腫非常明顯，尾偏向一側，陰門開張，陰道分泌物由血紅色變為無色透明或淡黃色，此時為發情期；從發情前期至發情期母犬的陰唇橫徑急劇增大，至發情期則變得柔軟，在排卵前陰唇橫徑急劇縮小，之后再度增大。當陰門水腫迅速消失，陰道僅有少量黏液排出，母犬表現安靜、松弛，對公犬的吸引作用降低為發情后期；陰門無任何腫大，外部看發情周期的任何變化為間情期。

1.2.2.2 公犬試情法

每天觀察母犬的外觀表現及外生殖器的變化，當發現陰門流出的黏性分泌物中含有血時，用性欲旺盛的具有交配經驗的公犬進行試情。每天早晨7:00和晚上19:00試情兩次。試情所用的公犬要求有交配經驗，已實施過輸精管切除術，性欲旺盛的公犬。母犬和公犬嬉戲，當公犬陰莖接觸母犬外陰部時，母犬將尾巴歪向一側，接受公犬爬跨。此時期將人的手指插入母犬陰道時，母犬不表現抵抗，則判定為發情期。1.2.2.3排卵情況鑒定

對通過發情鑒定判斷為最適配種時間的發情母犬，采用手術剖腹的方法觀察卵泡發育情況，以“處于發情期卵巢肉眼可見多個直徑約1～10 mm大小不等的透亮卵泡分布，形狀為球形或半球形，邊界清晰，明顯突出卵巢表面，剛剛排出卵母細胞的卵泡破裂后呈血紅色，并明顯可見一凸出略外翻的小孔，繼而已排空的卵泡將由紅體發育為黃體”為標準，來判斷誘導發情母犬是否排卵。

1.3 統計學分析

試驗所得數據采用SPSS 2.0軟件進行統計分析。

發情率：母犬應用藥物處理后，計算發情母犬數所占的百分比；

發情率=發情犬只數/藥物處理的犬只數× 100%；

誘導排卵成功率=排卵犬只數/發情犬只數× 100%；

2 結果

2.1 試驗一：外部觀察法及試情法的測定結果

從表3可以看出，經PMSG+HCG外源激素處理試驗犬只誘導發情率均高于空白對照組，且發情犬只表現出了一定的發情癥狀及行為表現，表明該外源激素對犬只的誘導同情發情具有明顯作用。并且Ⅱ組和Ⅲ組處理的試驗犬在激素處理完后的5～7 d都表現出100%的發情率，均高于Ⅰ組40%的發情率，說明其激素處理方案均優于Ⅰ組。

表3 PMSG+HCG對母犬誘導發情的作用及效果觀察

2.2 試驗二：外源激素誘導工作犬同期發情及排卵的效果觀察

按表2的方式對試驗犬只進行誘導發情處理，2個組別的犬只均獲得100%發情率，然后通過對發情犬只誘導排卵情況觀察及鑒定，Ⅴ組有55%的發情犬只成功誘導排卵，Ⅵ組有75%的發情犬只成功誘導排卵，并且Ⅵ試驗處理組誘導排卵成功率顯著高于Ⅴ組排卵成功率（P＜0.05，差異顯著），詳見表4。

表4 PMSG+HCG對母犬誘導發情及排卵效果的觀察

3 討論與結論

犬雖是多胎動物，但母犬非季節性單次發情，發情間隔時間長，有一個較長的乏情期，期間卵巢是處于靜止狀態的[3]。而公犬本身不受季節的限制，只要母犬允許，任何時候都可以進行交配[4]。母犬較長時間的乏情期就降低了母犬的受孕和繁殖幾率[5]。在犬的乏情期，對繁殖機能正常的母犬應用外源性激素誘導母犬同期發情，再結合外界因素如提高環境質量、優化飼養狀況等方法，可以縮短母犬的發情間隔，提高繁殖效率[6]。另外通過激素處理，誘導母犬在同一段相對集中時期內集中發情并排卵[7]，這對于規模化養殖中的配種、產仔、培育、斷奶和防疫等工作的統一管理都具有重要意義。本試驗旨在探討在云南昆明這一特定的地理環境和氣候條件下，利用PMSG結合HCG對昆明犬和馬里努阿犬進行同期發情，以期為本地規模化犬的繁殖育種提供參考。

從試驗一和試驗二供試犬的外觀表現和試情來看,Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅴ組和Ⅵ組的母犬在1～2 d內出現相對集中的發情表現，且發情率及同期發情率均高于相同條件下自然發情的母犬，這表明本試驗選用的PMSG+HCG激素和使用程序能很好地誘導工作犬同情發情及排卵。這主要可能是因為PMSG對母犬具有催情并促使其排出成熟卵子的作用，而HCG具有使卵泡成熟和排卵的作用，與PMSG聯合使用，從而促使母犬卵母細胞發育成熟，排出更多的成熟卵子。對照組未經激素處理則均無發情表現，激素處理組的發情率與發情同期率相對于空白對照組均較高。

從試驗開展的時間分析，試驗一是在夏季，試驗二是在秋季，夏季屬于犬只發情較零散的季節，而秋季屬于犬只發情較集中的季節[12]，但經外源激素處理后2個試驗均獲得了理想的發情率（100%），這證明本試驗建立的使用外源激素PMSG+HCG誘導工作犬同期發情技術和方法是可行的，具有普遍推廣應用的價值。

另外，從本試驗還可以看出，誘導發情的工作犬，經發情排卵鑒定和觀察，其誘導排卵成功率普遍較低，原因可能是由于PMSG的強烈刺激導致母犬的正常卵泡成熟期縮短，發情前期和發情期時間縮短，黃體功能不足，這與之前的報道結果吻合[8-11]。

在試驗中，應用外源激素對犬的發情誘導情況和排卵的情況進行了研究，但未對這兩種激素應用下犬的配種、受胎率和產仔率情況等進行研究和觀察，有待今后進一步深入研究。■（編輯：狄慧）

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Synchronization and 0vulation of Induction Estrus in Bitches Treated with Exogenous Hormone

In order to obtain favorable effect of oestrus synchronization and ratio of ovulation,PMSG and HCG were used to induce oestrus and ovulation.Using the estrus diagnosis methods of external observation and teaser test.The effects of PMSG and HCG on the induction estrus of canine were studied.The result showed that the oestrus rate ofⅡandⅢtreatment group which injected PMSG 5 times and 7 times both were 100%,were higher than those inⅠgroup which injected 3 times（40%）and the control group(0%).Using the method of surgical laparotomy to observation of estrus and ovulation.The estrus rate ofⅤandⅥgroup were 100%,ovulation rate was 55%and 75%respectively.They are significantly different(P＜0.05).It was effective to induce the synchronization estrus and ovulation of bitch by using exogenous PMSG and HCG.

working dog;exogenous hormone;estrus synchronization;induced ovulation

10.3969/j.issn.1008-4754.2015.02.028

公安部應用創新計劃項目（項目編號：2011YYCXKMJQ167），公安部重點研究計劃項目（項目編號：201301Z DYJ005）。

張躍駿（1978-），男，助理研究員，碩士，主要從事警犬技術研究工作，E-mail:zhangyj4292@163．com。

*通訊作者：唐樹生，男（1957-），本科，教授，主要從事警用犬種培育和警犬技術教學管理研究。

**通訊作者：萬九生（1976-），男，江西樂安人，副研究員，碩士，主要從事警犬輔助繁殖生物技術研究與應用，E-mail：ynwjs@163．com。