規(guī)模化牛場寒季消毒模式效果研究

霍妍明，陳國亮，薛曉霜，張東冉，邱殿銳，趙伍祥

（1.承德市動物疫病預防控制中心河北承德067000；2.河北旅游職業(yè)學院河北承德067000；3.承德市畜牧研究所 河北承德067000）

規(guī)模化牛場寒季消毒模式效果研究

霍妍明1，陳國亮1，薛曉霜2，張東冉1，邱殿銳3，趙伍祥3

（1.承德市動物疫病預防控制中心河北承德067000；2.河北旅游職業(yè)學院河北承德067000；3.承德市畜牧研究所 河北承德067000）

通過對寒季規(guī)模化奶場應用三類不同的消毒藥，比較消毒前、后細菌的變化規(guī)律，探討出效果較好的消毒藥種類，并推薦出冬季最佳消毒間隔周期。試驗結(jié)果表明：三類消毒藥中，以含氯制劑效果最佳，其余依次為醛類制劑、碘類制劑；冬季最佳消毒間隔周期為6 d，可以起到較好的消毒效果并能夠做好圈舍保溫工作。

寒季；規(guī)模化奶場；消毒藥；間隔周期

隨著應用技術(shù)的不斷研究推廣，科學有效的預防疫病工作愈來愈受到重視。近些年來一些新建的規(guī)模養(yǎng)殖場在進行區(qū)域劃分時，特別重視消毒隔離區(qū)域建設，把其作為重要環(huán)節(jié)建設。但近些年來通過筆者走訪不同的養(yǎng)殖場時發(fā)現(xiàn)，很多養(yǎng)殖場消毒效果并不理想，究其原因很多，如：用藥單一、消毒程序混亂、特別是到了冬季使用何種消毒藥、幾天消一次毒能更好的控制疫病發(fā)生又能較好地做好畜舍保溫工作成為比較撓頭的事情。本試驗本著廣譜、高效、低毒、低殘留、不會對環(huán)境造成污染的原則[1]選擇三類消毒藥[2]在北方冬季規(guī)模奶牛場圈舍開展消毒試驗。消毒前、后分別采樣，比對消殺效果，并摸索出冬季消毒間隔最佳周期。

1 試驗材料

1.1 消毒劑

含氯消毒劑：84消毒液（次氯酸鈉制劑，工作濃度1∶100）；

醛類消毒劑：醛滅靈（稀戊二醛溶液，工作濃度1∶1000）；

碘類消毒劑：菌毒殺（聚維酮碘，工作濃度1∶1500）。

1.2 器材

一次性培養(yǎng)皿、臺式高速冷凍離心機、滅菌棉簽、滅菌玻璃珠、移液器、振蕩器、EP管、恒溫培養(yǎng)箱、高溫高壓滅菌鍋、生理鹽水、溫濕度計、超凈工作臺。

1.3 場點選擇

選定河北省隆化縣旺興奶牛養(yǎng)殖有限公司、承德天添乳業(yè)有限公司（圍場）做試驗場點。試驗開展于2013年11月15日，至2014年1月18日結(jié)束。試驗期間最低溫度-29℃，最高氣溫1℃。

2 試驗方法

2.1 空氣菌樣

2．1．1 樣品采集 消毒前將圈舍清掃，用噴霧器對舍內(nèi)進行空氣進行噴霧，將制備好的培養(yǎng)基分別選擇圈舍高（距地面2 m處）、中（距地面1.5 m處）、低（距地面1 m處）三部分代表圈舍不同高度，消毒前、后分別將已制備好的培養(yǎng)基按照不同高度放置，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露10 min，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h，菌落計數(shù)：按照奧氏計算公式計算菌落總數(shù)[3]。公式：C=5 0000 N/AT

C:每立方米菌落總數(shù) (cfu/m3）；N:每皿菌落數(shù)(個)；A:培養(yǎng)皿面積（cm2）；T:采樣時間（min）

2．1．2 試驗結(jié)果 試驗具體結(jié)果見表1。

2．1．3 結(jié)果分析 表1試驗數(shù)據(jù)表明，三種消毒藥對空氣中的細菌殺滅率均達到了80%以上，效果較好，以84消毒液消毒效果最優(yōu)，消殺率平均為92.3%，其次為菌毒殺，消殺率為88.7%，醛滅靈的消殺率85%。

表1 牛舍空氣消毒試驗結(jié)果（103cfu/m2）

2.2 圈舍地面菌樣采集

2．2．1 場點布樣及采樣 采用噴漆定位方式圈定采樣范圍，東西走向牛舍按照距離東門口、西門口各5 m處選定兩個采樣點，中間部位內(nèi)選定一個采樣點，采樣點面積1×1 m2，每個采樣點均設計為10×10 cm2的采樣小區(qū)，開始前均進行機械清掃地面污物及糞便，消毒前均采用自來水噴霧打濕地面0.5 h后再實施整棟圈舍噴霧消毒，分別在消毒前、消毒后的30 min用滅菌生理鹽水沾濕的滅菌棉簽直接滾動涂抹采樣區(qū)并分別采集到EP管內(nèi)。采集好的樣品置于冰盒內(nèi)，在5 h內(nèi)運送到實驗室開展工作。試驗設置兩組同時進行：①每天消毒組；②周期消毒組（第一天消毒，以后不消毒），通過每天采樣測算消殺率并根據(jù)細菌增值率推算出細菌增殖周期，得出冬季消毒間隔周期。

2．2．2 樣品處理將呈有樣品的EP管加入0.9%滅菌生理鹽水1 mL浸泡30 min，之后轉(zhuǎn)移到自制的處理管中，6 000 r/min離心1 min，靜置10 min。將處理好的菌液進行倍比稀釋，稀釋好的菌液按照每塊培養(yǎng)基10 μL的量采用滾珠法進行均勻滾涂，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h，計數(shù)。

2．2．3 試驗結(jié)果 畜舍消毒試驗結(jié)果見表2。

2．2．4 試驗結(jié)果分析圖 對消毒所設置的每天消毒組和周期消毒組的細菌數(shù)量變化進行統(tǒng)計，統(tǒng)計如圖1、圖2。

表2 畜舍消毒試驗結(jié)果（每天消毒組103cfu/m2）

2．2．5 結(jié)果分析

1）從表2數(shù)據(jù)和圖1看出：北方地區(qū)冬季（-29～-6℃）規(guī)模化奶牛場以含氯消毒劑（84消毒液）消毒效果最理想，其余依次為醛類消毒劑（醛滅靈）、碘類消毒劑（菌毒殺）。

圖1 三種消毒劑每天消毒的殺滅率

圖2 三種消毒劑周期消毒細菌增值率

表3 畜舍消毒試驗結(jié)果（周期消毒組 103cfu/m2）

2）表3試驗數(shù)據(jù)和可見：消毒后的第六天細菌的恢復率已達到60.7%～65.1%之間，第七天時細菌的恢復力最高可達到82.6%，從這三種消毒藥細菌增值率（圖2中曲線斜率）可看出，第六天時細菌增值率最高，細菌在經(jīng)過第一天消毒后，從第二天開始緩慢生長，至第六天時生長速度加快，一般在第九到第十天后細菌已經(jīng)增值到原始菌水平。

3）通過以上分析建議北方冬季奶牛場適宜的消毒周期為6 d，即第一天消毒后，第六天進行第二次消毒，消毒間隔周期內(nèi)無需進行消毒。■（編輯：狄慧）

[1] 杜曉光.影響消毒藥作用的八大因素[J].河南畜牧獸醫(yī),2010,31（11）:17-18.

[2] 耿建虎.奶牛場常用消毒劑及其應用[J].中國牛業(yè)科學,2012,38（4）:71-72.

[3] 李建鋒,羅沛宏,賀曉龍,等.三中消毒劑對育肥牛場圈舍消毒效果研究[J].青海大學學報,2013(1):24-26+53.

10.3969/j.issn.1008-4754.2015.02.011

河北省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系奶牛產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團隊建設專項資金；承德市科技支撐計劃項目（201422074）。