林蛙油改善大鼠酒精性肝纖維化的作用機制

許會靜，郝 峰，張 磊，張 麗，李 艷

吉林醫(yī)藥學院

林蛙油改善大鼠酒精性肝纖維化的作用機制

許會靜，郝 峰，張 磊，張 麗，李 艷

吉林醫(yī)藥學院

目的：探討林蛙油對大鼠酒精性肝纖維化影響的作用及機制。方法：84只大鼠隨機分為正常對照組、模型組、林蛙油組和秋水仙堿組。模型組、林蛙油組和秋水仙堿組給予白酒復制酒精性肝纖維化模型。林蛙油組以3g/kg、秋水仙堿組以0.1 mg/kg灌胃，正常對照組和模型組以等量生理鹽水灌胃，連續(xù)12周，檢測大鼠血清MDA、SOD和HYP含量。結果：與模型組相比，林蛙油組、秋水仙堿組的MDA和HYP含量顯著降低（P＜0.01）；SOD活力升高（P＜0.01）。結論：林蛙油通過增強機體抗氧化能力改善大鼠酒精性肝纖維化。

酒精性肝纖維化；林蛙油；大鼠

酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)是長期大量飲酒導致的一種肝臟疾病.依病情輕重分為酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纖維化和酒精性肝硬化[1]。在酒精性肝病早期肝纖維化階段進行合理治療，可以逆轉(zhuǎn)肝纖維化進程，從而緩解甚至治愈肝纖維化，阻止酒精性肝病由早期肝纖維化向中晚期肝硬變發(fā)展。因此，延緩、阻止甚至逆轉(zhuǎn)肝纖維化，成為酒精性肝病治療的主要目標。在本研究中，采用酒精灌胃的方法復制酒精性肝纖維化模型，探討林蛙油對大鼠酒精性肝纖維化影響的作用及機制，為治療酒精性肝纖維化提供新的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1主要試劑與儀器林蛙油：購買長白山林蛙干油。56度紅星二鍋頭，北京釀酒總廠；秋水仙堿片，西雙版納藥業(yè)有限公司；超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialde?hyde,MDA)、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathion peroxidase，GSH-Px）測定試劑盒，南京建成生物工程研究所。

1.2實驗動物健康Wistar大鼠（吉林大學實驗動物中心）84只。

1.3分組與模型制備大鼠適應喂養(yǎng)1周后，隨機正常對照組、模型組、林蛙油組和秋水仙堿組，每組21只。模型組、林蛙油組和秋水仙堿組復制酒精性肝纖維化模型[2]，按每周所測得的體重給予酒精體積分數(shù)為0.56的白酒7g/kg灌胃,每日晨1次連續(xù)12周。正常對照組(n=6)以等量生理鹽水灌胃。

1.4分組給藥12周末大鼠停止造模，并開始給予藥物治療。林蛙油組以3g/kg、秋水仙堿組以0.1 mg/kg灌胃，正常對照組和模型組以等量生理鹽水灌胃，連續(xù)8周。

1.5血清學指標檢測治療8周后，末次給藥后禁食12h,大鼠麻醉后經(jīng)腹主動脈取血，分離血清，檢測血清中MDA、SOD、HYP水平。

2 結果

與對照組比較，模型組大鼠肝組織中MDA及Hyp含量明顯升高,SOD活力降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；與模型組比較，林蛙油組、秋水仙堿組大鼠肝臟組織中MDA及Hyp含量明顯降低SOD活力升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表1。

表1 抗氧化能力檢測（X…±s)

與正常對照組比較：aP<0.01,與酒精性肝纖維化組比較：b P< 0.01,與秋水仙堿組比較：c P<0.01,與林蛙油組比較：d P<0.01。

3 討論

本研究采用酒精灌胃的方法復制大鼠酒精性肝纖維化模型，模型復制成功后，分別用林蛙油和秋水仙堿進行治療，以探討林蛙油對大鼠酒精性肝纖維化影響的作用及機制。MDA為脂質(zhì)過氧化物的終產(chǎn)物，可以反映肝細胞膜脂質(zhì)過氧化強弱和肝臟受損程度[3]。Hyp是膠原蛋白特有的氨基酸，在肝纖維化時膠原蛋白合成增多，其在肝臟中的含量與肝纖維化程度相平行，是評價肝纖維化程度的重要指標[4]。本研究結果顯示，模型組大鼠肝組織中MDA和Hyp含量明顯增加，與模型組比較林蛙油組MDA和Hyp含量降低，并好于秋水仙堿組，林蛙油能使升高的MDA和Hyp降低，表明林蛙油能減輕脂質(zhì)過氧化作用、減少膠原蛋白的產(chǎn)生，逆轉(zhuǎn)大鼠肝纖維化程度。SOD能清除超氧陰離子自由基(O2-),保護細胞免受損傷，間接反應機體清除自由基的能力[3]。本研究結果顯示林蛙油組大鼠血清SOD活力高于模型組，提示林蛙油組內(nèi)源性氧自由基清除能力增強，林蛙油逆轉(zhuǎn)肝纖維化作用機制與增強機體抗氧化能力有關。

[1]何培元,侯志平,高淑梅,王明娟,馬立新,李炳慶.酒精性肝纖維化大鼠模型的建立及Smad7/TGF-β表達變化[J].世界華人消化雜志,2014；22(19):2692-2702

[2]周寧,厲有名,張宇,虞朝暉,陳韶華,季峰.大鼠酒精性肝纖維化模型的構建[J].東南大學學報(醫(yī)學版).2003:22(2):93-97.

[3]孫設宗,唐微,張紅梅,等.云芝多糖、維生素E對小鼠CCl4肝損傷保護作用的研究[J].中國老年學雜志,2009,29(20):2643-2645.

[4]程君,楊云霞.黃芩苷對四氯化碳致亞急性肝纖維化小鼠的保護作用[J].華西藥學雜志,2010,25(1):32-33.

許會靜（1985-），女，漢族，河北清苑縣人，碩士研究生，助理實驗師，主要從事要從事肝臟生物化學研究。

李艷（1960-），女，漢族，吉林省吉林市人，本科，教授，主要從事肝臟生物化學研究。