補腎法在腰椎間盤退變治療中應用對AQP1\\AQP3的影響分析

摘要：目的研究補腎法在腰椎間盤退變治療中應用對AQP1、AQP3的影響。方法隨機選取2012年10月~2013年10月在我院進行腰椎間盤突出手術治療的患者60例，將其隨機分為對照組和觀察組，對照組患者采用直接手術法，觀察組患者采用補腎法治療一個月后再進行手術。對兩組患者腰椎間盤退變治療前后AQP1、AQP3、蛋白的表達和變化，以及補腎法治療前后AQP1、AQP3、蛋白的表達變化進行分析。結果觀察組患者的AQP1、AQP3、蛋白表達水平和對照組患者的AQP1、AQP3、蛋白的表達水平相比有明顯的增加，P＜0.05，具有統計學意義。結論腰椎間盤退變時，AQP1、AQP3、蛋白表達水平會下降，在經過補腎法治療之后AQP1、AQP3會得到增加，將AQP1、AQP3的表達進行上調，在一定程度上恢復人體水平衡和代謝功能，進而緩解腰椎間盤退變癥狀。

關鍵詞：補腎法；腰椎間盤退變；AQP1；AQP3腰椎間盤突出是常見的顧客疾病，腰椎間盤退變是發病的基礎，腰椎間盤退變可以會引發腰椎間盤突出等疾病，為此在腰椎間盤退變治療中，采用的方法為保守治療和手術治療，相對于保守治療，手術治療的效果更高，復發率較低。之所以會出現腰椎間盤退變，是與AQP1、AQP3相關。在腰腿疼痛治療中，補腎法治療是最常采用的方法，但是補腎法的作用機制不清楚，腰椎間盤退變是常見的腰腿疼痛病因，為此本文針對補腎法在腰椎間盤退變治療中的應用，對AQP1、AQP3表達變化產生的影響進行分析。

1資料與方法

1.1一般資料隨機選取2012年10月~2013年10月在我院進行腰椎間盤突出手術治療的患者60例，將其隨機分為對照組和觀察組。觀察組中男性13例，女性17例，年齡在25~41歲，平均年齡為（30.5±4.5）歲，對照組男性14例，女性16例，年齡在26~40歲，平均年齡為（29.5±4.8）歲。對照組直接進行手術，觀察組進行一個月的補腎治療之后，在進行手術。

1.2納入標準①符合腰椎間盤退變診斷標準；②L4~5以及L5~S1椎間盤突出患者；③有MR表現；④術后證實腰椎間盤組織退變；⑤患者對本次調查研究知情，并自愿參與調查研究。

1.3治療藥物、試劑T4DNA連接酶、pMDI8-T載體試劑、質粒抽提試劑、質粒小量抽提試劑、膠回收試劑、RT-PCR擴增試劑、抽提總RNATrizol試劑、BCA蛋白檢測試劑、抗AQP1、AQP3單克隆抗體、HRP標記二抗。

1.4治療方法將RT-PCR擴增得到的AQP1、AQP3、GAPDH目的基因產物通過克隆的途徑轉入pMDI8-T載體中，選擇陽性克隆進行鑒定，使用質粒小量抽提試劑進行質粒提取，標定質粒濃度，10倍稀釋之后建立AQP1、AQP3、GAPDH陽性標準品，在-20℃的環境中進行保存，待定量標定使用。

提取冰凍樣本，使用RNATrizol試劑提取腰椎間盤組織的總RNA，然后測定其濃度和純度，經含有溴化乙錠的1%瓊脂凝膠進行電泳，對RNA的質量進行觀察。完成之后進行熒光定量RT-PCR以及Western blot。

1.5統計學處理本次研究中的數據采用SPSS11.0統計學軟件進行分析處理，計量資料采用t檢驗，以P＜0.05為差異顯著，具有統計學意義。

2結果

補腎治療前后患者腰椎間盤退變中的AQP1、AQP3、蛋白表達水平觀察組和對照組相比有明顯的增加，而且差異顯著，P＜0.05，具有統計學意義，見圖1，圖2，表1。

圖1 Western blot鑒定中AQP1的表達

圖2 Western blot鑒定中AQP3的表達

3討論

水通道蛋白AQPs是跨膜水轉運相關結構中的膜通道蛋白體，可以在不同細胞膜下進行水轉運，AQP1和AQP3是AQPs中的兩種蛋白，在腰椎間盤代謝活動中發揮著重要的作用，可以對腰椎間盤組織細胞的正常形態、代謝活動進行維持[1]。

腰椎間盤是一個水分含量較高的器官，在幼年的腰椎間盤中水分的含量達到80%以上，即使到了老年，腰椎間盤中的水分含量也在70%，患者出現腰椎間盤退變的一個明顯特征就是，腰椎間盤中的水分含量急劇下降，所以說水分在腰椎間盤的生理活動中發揮著巨大的作用。

腎臟是人體內含有豐富AQPs的器官，腎臟在調節人體水平衡中發揮著重要的作用，水通道分布非常廣泛，在AQPs中，AQP1和AQP3具有重要的生理意義，作為含有豐富AQPs的器官，腎臟在人體代謝中的作用非常大。

從中醫學的角度進行分析，腎虛可以引發腰痛，是腰痛病理產生的基礎，而腰椎間盤突出退變是腰痛的常見病因，所以在進行腰椎間盤退變治療中，先對腎臟功能進行改善，調節人體內的水平衡，然后再進行腰椎間盤退變治療，可以起到良好的治療效果。

本文針對補腎法在腰椎間盤退變治療中應用對AQP1，AQP3產生的影響進行分析，從觀察組的AQP1和AQP3的表達變化，可以看出補腎，可以將人體腰椎間盤組織中的AQP1和AQP3增加，進而將腰椎間盤組織中的水分改善，促進人體代謝平衡[2]。從對照組和觀察組的AQP1和AQP3表達變化來看，補腎法可以將AQP1、AQP3的表達進行上調，在一定程度上恢復人體水平衡和代謝功能，進而緩解腰椎間盤退變癥狀。

參考文獻：

[1]曹國永.水通道蛋白在椎間盤退變中的作用及其調控機制的研究[D].第三軍醫大學，2006.

[2]夏雄智，吳少鵬，鄧崇禮，等.補腎法對人腰椎間盤退變中水通道蛋白AQP1、AQP3表達的影響[J].疑難病雜志，2013，12(04):281-282.

編輯/孫杰