前列腺炎組織中內(nèi)皮素受體壓型mRNA的表達

摘要：目的 探討III 型前列腺炎（CP/CPPS）患者前列腺組織中內(nèi)皮素受體壓型（ETA-R，ETB-R）分布。方法 運用實時熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）定量檢測36例III 型前列腺炎患者（其中22例ⅢA型患者，14例ⅢB型患者）前列腺穿刺組織和6例正常前列腺組織中ETA-R和ETB-R mRNA含量。 結(jié)果 前列腺炎癥組織中ETA-R的表達相對于正常前列腺組織呈明顯上調(diào)趨勢（P<0.001）；ETB-R的表達在炎癥組織和正常組織中的差異不存在顯著性（P=0.265）。 結(jié)論 前列腺炎組織中ETA-R表達水平上調(diào)，介導(dǎo)ET-1的生物學(xué)效應(yīng)，在前列腺平滑肌收縮中起主要作用，可能參與了前列腺炎的病理生理過程。

關(guān)鍵詞：內(nèi)皮素受體壓型；real time-PCR；前列腺炎前列腺動力性梗阻引起的尿液前列腺返流可能是CP/CPPS 的病因之一，而動力性梗阻過去認為主要是與前列腺局部α-腎上腺素受體有關(guān)。α-腎上腺素受體阻滯劑并不能完全緩解前列腺平滑肌張力，提示前列腺內(nèi)還存在其他調(diào)節(jié)平滑肌張力的因素[1] 。為此我們對III型前列腺炎的前列腺穿刺標本進行ETA -R和ETB -R的mRNA含量的檢測，探討ET受體亞型在前列腺炎的發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料TRIzol總RNA提取液購自Takara公司； RNA酶抑制劑、M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶、Oligo (dT) 、dNTPs 購自Fermentas公司；SYBR Mastermix購自Toyobo；引物由上海英俊生物技術(shù)有限公司合成。

1.2 方法

1.2.1 標本前列腺炎組織36例均來自2010年05月～11月在溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院泌尿外科門診病程長癥狀較重，反復(fù)多種治療效果欠佳III型前列腺炎的患者，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會同意，為指導(dǎo)用藥經(jīng)會陰前列腺穿刺行細菌16S rRNA 基因檢測[2]時多余廢棄的前列腺組織。患者年齡25～49歲，平均（28.3±3.7）歲（其中22例ⅢA型患者，14例ⅢB型患者）。標本收集后立即置于液氮中，隨后于-80℃低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 實時定量RT-PCR檢測ETA -R和ETB -R的mRNA含量的檢測。以β-actin為內(nèi)參，采用2-△△CT方法分析比較目的基因在前列腺炎組織和正常組織中的表達差異。其中△△CT=(CT目的基因-CTβ-actin)炎癥組織一(CT目的基因中位數(shù)-CTβ-actin中位數(shù))正常組織

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 采用 SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理。

2結(jié)果

2.1 前列腺炎及正常前列腺組織中ETA-R mRNA及ETB -R mRNA表達

以β一actin作內(nèi)對照，與正常組織比較，慢性前列腺炎組織中ETA-R相對表達量（2-△△CT）中位數(shù)為2.515(1.420，2.980)， 為正常組織中含量的2.515倍，（P<0.001）。慢性前列腺炎組織中ETB-R相對表達量（2-△△CT）中位數(shù)為1.215(0.603，1.495)，為正常組織中含量的1.215倍，（p=0.265）。

2.2 ETA-R、ETB-R在IIIA型前列腺炎和IIIB型前列腺炎組間的表達差異分析使用兩個獨立樣本組間Mann-Whitney U檢驗來分析ETA-R、ETB-R相對表達值在IIIA型前列腺炎和IIIB型前列腺炎組間的表達差異。發(fā)現(xiàn)ETA-R和ETB-R在IIIA組和IIIB組之間比較均無顯著性差異(P > 0. 05)。

3 討論

Ⅲ型前列腺炎(CP/CPPS)是50歲以下男性就診于泌尿外科或男科的最常見原因[3]，幾乎各個年齡組和種族均可發(fā)病，已成為目前診治該類疾病的世界性難題[4]。ET是由21個氨基酸組成的多膚，具有多種生物學(xué)作用，有三種生物學(xué)活性的亞型，分別為ET-1 ，ET-2與ET-3。Walden等[5]發(fā)現(xiàn)前列腺細胞中可檢測到ET-1及ECE-1 mRNA，證實前列腺細胞能夠分泌ET-1。近幾十年來關(guān)于CP/CPPS病因及發(fā)病機制的基礎(chǔ)研究有了許多突破性的進展。前列腺內(nèi)尿液反流是目前已經(jīng)證實并得到廣泛認可的CP/CPPS主要病因之一。尿液返流進入前列腺腺導(dǎo)管，被認為是慢性細菌性和非細菌性前列腺炎癥的最重要的致病機理之一[6]。尿液返流將病原體和尿液中的代謝成分帶入前列腺內(nèi)，這種由化學(xué)性、細菌性、或免疫性刺激產(chǎn)生的炎癥可以導(dǎo)致前列腺內(nèi)壓力增高，可能導(dǎo)致慢性前列腺炎患者排尿異常和會陰下腹部疼痛不適[7]。

本研究發(fā)現(xiàn)，炎癥組的ETA-R的表達相對于正常組呈明顯上調(diào)趨勢，而炎癥組的ETB-R的表達相對于正常組差別不具顯著性。由此我們可以認為，在前列腺炎發(fā)生發(fā)展中，ETA-R的表達上調(diào)，ET-1與前列腺間質(zhì)平滑肌細胞上的ETA-R結(jié)合，引起前列腺動力性梗阻，從而影響前列腺炎的病理生理過程，但ETA-R的具體調(diào)控機制尚有待進一步研究。進來研究發(fā)現(xiàn)，ET-1的生物學(xué)效應(yīng)可被選擇性ETA-R拮抗劑阻斷，提示我們ETA-R拮抗劑有望成為治療前列腺炎患者的新型藥物，特別是為復(fù)雜難治的III前列腺炎患者的藥物治療開辟新的道路。

參考文獻：

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[2] 朱慶峰， 謝輝， 翁志梁， 等. 經(jīng)會陰前列腺穿刺組織的細菌16SrRNA基因檢測[J]. 中華醫(yī)學(xué)雜志， 2009，89(12):823-825.

[3]李宏軍，黃宇烽.前列腺炎的流行病學(xué)研究進展[J].中華泌尿外科雜志，2004，25(3):213-215.

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[7]Hruz P，Danuser H，Studer UE，et al . Non-inflammatory chronic pelvic pain syndrome can be caused by bladder neck hypertrophy[J].Eur Urol，2003，44 :106-110.

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