不孵育法微柱凝膠合血的實驗室評價

摘要：目的 探討不孵育法進行微柱凝膠合血對交叉合血結(jié)果的影響，使此法既能保留微柱凝膠合血的操作簡單、結(jié)果易觀察及易保留、靈敏度高等特點，同時又能大大縮短交叉合血的時間。方法 將進行交叉合血的受血者血漿及獻血者0.8%的紅細(xì)胞懸液各100ul加入標(biāo)記有主側(cè)的一次性塑料管中，受血者0.8%的紅細(xì)胞懸液及獻血者血漿各100ul加入標(biāo)記有次側(cè)的一次性塑料管中，輕微振搖混勻（室溫需20℃以上），然后吸入100ul混合后的標(biāo)本加入微柱凝膠卡的主側(cè)、次側(cè)中，放入TD-3A血型血清學(xué)專用離心機離心（離心速度同微柱凝膠法），離心完畢后觀察結(jié)果。結(jié)果 320例交叉配血標(biāo)本中，有1例配血結(jié)果不相符（主側(cè)或次側(cè)配血結(jié)果不完全一致），其余配血結(jié)果均相符（主側(cè)或次側(cè)配血結(jié)果完全一致）。結(jié)論 不孵育法微柱凝膠合血大大縮短了交叉配血的時間，其結(jié)果與孵育法交叉合血的差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義。

關(guān)鍵詞：不孵育法；微柱凝膠合血；評價

為探討不孵育法微柱凝膠合血對交叉合血的影響，采用320例臨床交叉合血標(biāo)本，分別用孵育法和不孵育法兩種方法進行交叉合血，比較其結(jié)果的差異有無統(tǒng)計學(xué)意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 2012～2013年我院臨床輸血治療的患者全血標(biāo)本，年齡4h～94歲。

1.2實驗材料與設(shè)備 抗人球蛋白交叉配血卡、ABO、RhD血型定型檢測卡（單克隆抗體）、不規(guī)則抗體篩檢卡（均為長春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品）及專用器（FYQ免疫微柱孵育器），3D-3A血型血清學(xué)專用離心機（長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司生產(chǎn)）。

1.3方法

1.3.1先將320份臨床交叉合血標(biāo)本用微柱凝膠法進行血型鑒定，然后用微柱凝膠合血法進行同型交叉合血，主側(cè)加入受血者血漿及獻血者0.8%的紅細(xì)胞懸液各50ul、次側(cè)加入受血者0.8%的紅細(xì)胞懸液及獻血者血漿各50ul，然后放入FYQ免疫微柱孵育器（恒溫37℃）孵育15min，取出放入TD-3A血型血清學(xué)專用離心機離心：900rpm，離心2min，1500 rpm，離心3min；離心完畢后觀察結(jié)果，如紅細(xì)胞全部沉于配血卡底部，上部清亮則配血相合，如紅細(xì)胞漂浮于配血卡上部或者中部或者配血卡中出現(xiàn)溶血均為配血不相合。

1.3.2再將320份上述標(biāo)本用不孵育法進行微柱凝膠合血，將進行交叉合血的受血者血漿及獻血者0.8%的紅細(xì)胞懸液各100ul加入標(biāo)記有主側(cè)的一次性塑料管中，受血者0.8%的紅細(xì)胞懸液及獻血者血漿各100ul加入標(biāo)記有次側(cè)的一次性塑料管中，輕微振搖混勻（室溫需20℃以上），然后吸入100ul混合后的標(biāo)本加入微柱凝膠卡的主側(cè)、次側(cè)中，放入TD-3A血型血清學(xué)專用離心機離心（離心速度同微柱凝膠法），離心完畢后觀察結(jié)果。

2 結(jié)果

兩種方法對320例交叉配血標(biāo)本進行交叉合血，有1例配血結(jié)果不一致，319例配血結(jié)果一致，符合率達99.7%，不符合率為0.3%，通過χ2檢驗[2]，其結(jié)果的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。（P>0.05 ）兩種方法交叉配血結(jié)果見表1、表2、表3。

兩種方法配血結(jié)果不一致的一例不規(guī)則抗體試驗結(jié)果為陰性、直接抗人球蛋白試驗結(jié)果為+弱陽性。其余不規(guī)則抗體及直接抗人球蛋白陽性結(jié)果均為++以上的陽性。

3 討論

微柱凝膠卡可檢測出標(biāo)本血清中的IgM和IgG型紅細(xì)胞血型完全及不完全抗體[1]，具有標(biāo)本用量少，靈敏度高，特異性強，操作簡便，結(jié)果可長期保存等優(yōu)點[3]，但由于其比凝聚胺法配血時間長，因此在急診搶救用血進行交叉配血時存在一定的不足.本法通過將受血者及獻血者標(biāo)本先加入一次性塑料管中混勻，然后加入微柱凝膠卡中直接離心觀察結(jié)果，省去了15min的孵育時間，經(jīng)兩種方法比對，其結(jié)果的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05 ）。由于不孵育微柱凝膠合血法將受血者及獻血者標(biāo)本加入塑料管中加大了抗原抗體分子的接觸面積，再通過適當(dāng)?shù)恼駬u，加快了抗原抗體的反應(yīng)[4]，本法雖然縮短了微柱凝膠的合血時間，但操作卻較微柱凝膠法繁瑣（先加入另外的反應(yīng)管中），如果生產(chǎn)廠家改良一下微柱凝膠的反應(yīng)孔，使加入的標(biāo)本在孔中能快速自動混勻，使抗原抗體的反應(yīng)加快，這樣就可以縮短急診合血的時間。

參考文獻：

[1]吳國光.實用臨床輸血技術(shù)[M].第1版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2012：108.

[2]馬斌榮.醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué)[M].第4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：85.

[3]舒象武.應(yīng)用微柱凝膠抗球蛋白技術(shù)進行交叉配血[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2003，13（I）：116-118.

[4]吳健民.免疫學(xué)檢驗理論與臨床[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：115.

編輯/哈濤