探討三種檢測方法在尿液白細胞測定中的使用

摘要：目的 分析比較尿沉渣儀，干化學分析儀，顯微鏡鏡檢三種檢測方法在測定尿液中白細胞的使用情況。方法 對2157份門診患者留取的隨機尿液在規定的時間內，按照各種儀器的標準操作規程，對尿液中的白細胞進行三種方法的聯合檢測。結果 顯微鏡手工鏡檢測白細胞陽性率為13.0 %，尿沉渣儀檢測白細胞陽性率為15.5%，其中假陽性為3.5%，假陰性為1.6%，跟顯微鏡手工鏡檢符合率為94.9%，干化學法陽性率為11.5%，其中假陽性為4.5%，假陰性為8.7%，跟顯微鏡鏡檢符合率為86.8%。結論 尿液白細胞檢測受多種因素影響，如果使用三種檢測方法聯合測定，可大大提高結果的準確性，減少假陽性與假陰性的發生。

關鍵詞：尿沉渣儀；干化學分析儀；顯微鏡；白細胞

尿常規作為三大常規之一的檢測項目，對疾病的診斷，預防和健康普查方面應用非常廣泛。現代醫學發展日新月異，特別是尿液干化學分析儀的出現，因其檢測方便、快捷、檢測項目多，重復性好，標本用量少，而大受檢驗工作者的歡迎，普及程度非常高，就連基層衛生院一般都有配制。近年來，隨著全自動尿沉渣儀的不斷發展，使尿液檢測更加方便、快捷，準確。因其對尿液有形成份定量、標準化檢測，大有取代顯微鏡鏡檢的趨勢。一些醫院檢驗科因為標本量太多，為了節省人力，更快出檢驗報告，在尿沉渣儀和干化學分析儀聯合檢測的的基礎上，已經基本放棄了尿沉渣的顯微鏡鏡檢。但是在實際工作中，不管再精密的儀器，都不可能做到百分百準確，在尿液分析中，不管是尿沉渣儀與干化學分析儀，還是干化學分析儀與顯微鏡鏡檢聯合使用，都存在不足，三者必須聯合分析，才能提高檢測的準確性，減少假陽性和假陰性的錯誤報告發生[1]。通過對2157份門診患者留取的隨機尿液標本，對尿液中白細胞檢測結果對比分析，說明三者聯合檢測的重要性。

1資料與方法

1.1一般資料 UF-500全自動尿沉渣儀及配套試劑（日本Sysmex公司）和質控物，華晟-H-II干化學分析儀及配套試劑及質控物，OLYMPUS-CH20雙目顯微鏡及載玻片。

1.2標本來源 2157份門診患者留取的隨機尿液。

1.3方法

1.3.1 UF-500全自動尿沉渣儀 用一次性尿杯收集上述門診患者留取的隨機尿液標本，混勻后分別取10ml倒入三只專用試管，第一管編號后放入UF-500全自動尿沉渣儀試管架中，自動檢測尿沉渣。

1.3.2干化學分析儀 取第二管做干化學分析，將試紙條浸入尿液中1～2s后，用紗布或吸水功能好的紙張吸收多余尿液，放入華晟-H-II干化學分析儀自動檢測。

1.3.3 顯微鏡人工鏡檢 取第三管尿液標本，放入離心機經1500r/min離心沉淀5min后，棄去上清液，剩余200ul，混勻后取其中20ul涂片顯微鏡鏡檢，計數10個高倍鏡視野的白細胞數，取平均每個視野值。

1.3.4上述方法都是在儀器運轉正常，質量控制結果在控的前提下，并由熟練的操作人員進行檢測。

1.4 判定標準 白細胞值：UF-500全自動尿沉渣儀>15/ul為陽性。華晟-H-II干化學分析儀，陰性（-）陽性：15/ul+-、75/ul+、125/ul++、500/ul+++。顯微鏡人工鏡檢 報告方式為：陰性：高倍鏡檢平均每視野0-5，陽性：10-20（+）、21～50（++）、>50（+++），滿視野（++++）。

2結果

2157份門診患者留取的隨機尿液標本用三種方法檢測白細胞結果見表1，表2。

2.1表1尿沉渣儀檢測上述標本陽性率為15.5%，干化學分析儀陽性率為11.5%，顯微鏡人工鏡檢陽性率為13.0%，以尿沉渣儀陽性率為最高，干化學分析儀陽性率最低。

2.2表2尿沉渣儀白細胞測定假陽性率和假陰性率分別3.5%、1.6%，與顯微鏡人工鏡檢符合率為94.9%。干化學分析儀假陽性率和假陰性率分別4.5%、8.7%，與顯微鏡人工鏡檢符合率為86.8%。干化學分析儀假陽性率與假陰性率相對較高。尿沉渣儀與顯微鏡人工鏡檢符合率最高。

3結論

尿沉渣分析儀應用了流式細胞和電阻抗原理：當尿標本被稀釋并染色后，儀器將每個細胞發出的熒光、散射光和電阻抗信號轉變成電信號。根據每個尿液標本的直方圖和散射圖來區分細胞及其形態。它為尿沉渣的檢測提供自動化的檢測手段，能客觀的分析尿沉渣的各種有形成分，快速檢測尿液標本，并對有形成份進行定量檢測，大大提高工作效率。但是其在白細胞檢測中受多種因素影響，①白細胞形態在尿液的浸透中，在不同的酸堿度及滲透壓，形態變化較大，典型白細胞形態體積及顆粒密度比較均一，能夠準確計數，但破壞及死亡的白細胞形態體積及顆粒密度變化較大，容易計錯。②小圓上皮細胞染色敏感度與白細胞類似而互相干擾，影響到白細胞計數的準確性。③小管型及管型碎片，酵母菌，連體孢子，精子及鱗狀上皮細胞，結晶等都能夠干擾白細胞的計數。

干化學分析儀試帶法檢查尿內白細胞的原理：是基于中性粒細胞胞質內含有特異性酯酶，催化水解試紙中的吲哚酚酯，產生游離酚，游離酚氧化偶合或與重氮鹽反應形成紫色縮合物，其顏色深淺與中性粒細胞的多少呈正比例關系。此法只能測中性粒細胞，不與單核細胞、淋巴細胞反應，尿液中污染甲醛或含有高濃度膽紅素或使用某些藥物時，會產生假陽性；尿蛋白>5g/L或尿液中含有大劑量先鋒霉素等紅物時，可使結果偏低或出現假陰性結果；不新鮮尿液或酸堿度的變化對白細胞破壞可使結果與顯微鏡鏡檢不符。

顯微鏡鏡檢技術是將尿液離心后，直接用顯微鏡檢查尿液沉渣中有形成分的物理檢查方法。受主觀因素影響較大，是因為尿沉渣的易變性，可能對白細胞分類計數造成誤差，如果離心速度過快或其它原因造成白細胞溶解，將無法計數。

由此可見，三種方法檢測尿中白細胞原理不同，對其結果的影響因素也不盡相同，如果單獨檢測，結果的準確性不能令人滿意。

尿中白細胞的數量觀察，能夠幫助泌尿系統感染，結核，結石，腫瘤等的診斷與鑒別診斷。干化學法檢測方式自動化程度高，易標準化，又簡便、快捷、檢測項目多，標本用量少，重復性又好，但其是一種半定量檢測方法，不能精確的測定白細胞的數量，易受各種因素的影響，容易出現假陽性和假陰性[2]。尿沉渣定量檢測同樣自動化程度高，易標準化，重復性又好，并彌補了干化學法檢測的一些不足，能夠精確地測量到白細胞的準確數量，并能夠依靠數量上的微弱變化，更好的指導臨床的治療用藥。但其也易受各種因素的影響，會出現假陽性和假陰性。尿沉渣顯微鏡鏡檢有速度慢、受影響因素多、重復性差、不易定量，操作者對結果影響大等缺點，但目前尚無一種自動化儀器能完全替代尿沉渣鏡檢。作為尿沉渣檢查的金標準，尿液分析中尿沉渣的顯微鏡鏡檢仍是臨床上最基本，也是最重要的檢查方法. 尿沉渣儀未出現以前，尿液檢查以干化學法與顯微鏡鏡檢聯合檢測，但只是一種半定量檢測方法，無法對白細胞數量進行精確計數，加上顯微鏡鏡檢的繁鎖，造成檢測速度慢，已無法應對當今繁重的工作量。尿沉渣儀問世以來，發展很快，并有取代顯微鏡鏡檢的趨勢。其跟干化學儀聯合測定，互相補充，速度，效率得到大大加強，可謂是最佳搭檔[3]。但考慮到尿中白細胞受多種因素的影響，并不能保證檢測結果的準確性，應同時聯合了顯微鏡的鏡檢，尿液分析的結果就會尤為可靠，用于臨床診斷將更加準確。但如今各醫院面對繁忙的工作壓力，并不可能對結果都一一進行顯微鏡鏡檢，這樣會耗費大量的人力，并降低檢測的速度。筆者認為，尿沉渣儀跟干化學聯合測定白細胞，根據尿沉渣儀假陰性率低，與顯微鏡鏡檢符合率高的特點，對尿沉渣儀跟干化學儀測定陰性，可考慮不用顯微鏡鏡檢；如兩者不符，必須進行顯微鏡鏡檢。總之，尿沉渣儀跟干化學儀屬快速過篩試驗，對尿液自動化檢測的作用無容置疑，但再好的機器并不能做到百分百準確，不能因為工作的繁重而放棄顯微鏡鏡檢。

參考文獻：

[1]叢玉隆.現代尿液分析技術與臨床[M].北京：人民軍醫出版社，2007：125-148.

[2]周強，羅森珊，文燕.流式尿沉渣分析儀，尿干化學分析儀檢測，尿紅，白細胞的研究[J].國外醫學·臨床生物化學與檢驗學分冊，2005：592-596.

[3]葉應嫵，王毓三.全國臨床檢驗操作規程[M].南京：東南大學出版社，1997：134-135.

編輯/申磊