透明質(zhì)酸鈉對兔骨性關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)液一氧化氮含量的影響

摘要：目的 觀察透明質(zhì)酸鈉對兔骨性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)液NO含量的影響，探討其治療骨性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制。方法 將30只新西蘭兔用關(guān)節(jié)腔內(nèi)定期注射0.1 mL 0.4%木瓜蛋白酶水溶液，任其自由活動(dòng)制成骨性關(guān)節(jié)炎模型，造模成功后，隨機(jī)分三組，每組10只，模型組不做處理，對照組每3 d向其膝關(guān)節(jié)注射0.1 mL生理鹽水，治療組每3 d向其膝關(guān)節(jié)注射透明質(zhì)酸鈉0.1 mL，連續(xù)2個(gè)月后，抽取關(guān)節(jié)液用elisa法測其NO含量。結(jié)果 治療組與模型組和對照組相比，關(guān)節(jié)液NO含量明顯降低（P<0.05）。結(jié)論 透明質(zhì)酸鈉關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射能減少關(guān)節(jié)液中NO的含量，減輕對軟骨的損害，保護(hù)軟骨細(xì)胞。

關(guān)鍵詞：膝骨性關(guān)節(jié)炎；透明質(zhì)酸鈉；一氧化氮；軟骨損傷

膝骨性關(guān)節(jié)炎（kneeosteoarthritis，OA）是老年人常見的膝關(guān)節(jié)疾病，其發(fā)病率致殘率有逐年上升趨勢。其發(fā)病原因不十分清楚，與許多致炎因子的參與有關(guān)，臨床上采用透明質(zhì)酸鈉關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射或聯(lián)合其它藥物或方式來治療，取得較好效果。本研究來觀察透明質(zhì)酸鈉對兔膝骨性關(guān)節(jié)炎一氧化氮（NitridOxide，NO）含量的影響，為骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病及臨床治療提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料 30只健康新西蘭大白兔，雌雄不限[平均體重為（3.5±0.5）Kg，購于桂林醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心]，透明質(zhì)酸鈉（商品名：快可阾，購于杭州協(xié)和醫(yī)療用品有限公司），兔一氧化氮（NO）ELISA試劑盒購于上海金穗生物科技有限公司。木瓜蛋白酶（購于上海金穗生物科技有限公司）。

1.2動(dòng)物造模與分組

1.3標(biāo)本采集及處理

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2結(jié)果

關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射后各組兔膝關(guān)節(jié)液中NO的含量比較，見表1。

3討論

近年來，OA其發(fā)病率致殘率隨年齡增長呈逐年上升趨勢，OA是由多種細(xì)胞因子及其炎癥介質(zhì)參與的炎癥過程，是炎癥參與的始動(dòng)因素[1]，臨床實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)NO在骨性關(guān)節(jié)炎的形成和發(fā)展中起著重要作用[2]，導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨損傷，NO由iNOS催化底物L(fēng)-精氨酸合成。誘導(dǎo)型一氧化氮合酶在肢體缺血再灌注后關(guān)節(jié)軟骨損傷中起到重要作用，導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨損傷[3]，NO作為細(xì)胞信號(hào)分子，對協(xié)調(diào)體內(nèi)代謝起著重要的作用，NO含量明顯升高，引起其自身組織損傷[4]，高濃度的NO可誘導(dǎo)兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡，過高濃度的NO可引起細(xì)胞壞死[5]，是一個(gè)在OA軟骨損傷強(qiáng)有力的介質(zhì)[6]。NO誘導(dǎo)滑膜組織缺氧，導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎癥，抑制一氧化氮合酶可以減少NO的產(chǎn)生，減輕缺氧，大大減輕甚至完全中止滑膜炎[7]，NO通過JNK和NF-JB通路增加MMP-13的表達(dá)[8]引起骨性關(guān)節(jié)炎軟骨損傷病變，使軟骨細(xì)胞容易受細(xì)胞因子介導(dǎo)細(xì)胞凋亡，NO被認(rèn)為是潛在的干預(yù)治療的目標(biāo)[9]，通過抑制iNOS的表達(dá)，可降低NO含量，減少軟骨細(xì)胞凋亡，促進(jìn)軟骨基質(zhì)合成及抑制其分解，抑制滑膜炎癥，延緩關(guān)節(jié)軟骨退變，阻止軟骨損壞，促進(jìn)受損關(guān)節(jié)軟骨的修復(fù)[10]，起修復(fù)性作用[11]，晚期糖基化終末產(chǎn)物誘導(dǎo)人軟骨細(xì)胞iNOS-NO激活，阻止一氧化氮合酶活性，減少NO的產(chǎn)生，顯著降低晚期糖基化終末產(chǎn)物介導(dǎo)的蛋白多糖釋放和軟骨退化，這可以作為治療去除骨性關(guān)節(jié)炎疼痛之外的潛在的靶點(diǎn)[12]。某些藥物可能通過抑制結(jié)締組織細(xì)胞產(chǎn)生NO，減輕關(guān)節(jié)炎癥和關(guān)節(jié)損傷[13]，透明質(zhì)酸鈉可以通過減少NO的含量，保護(hù)膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞。

參考文獻(xiàn)：

[1]林木南，劉獻(xiàn)祥.骨性關(guān)節(jié)炎中細(xì)胞因子的協(xié)調(diào)效應(yīng)[J].福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2006，16（2）：69-70.

[2]朱潔，岳珍，王嘉芙.骨關(guān)節(jié)病關(guān)節(jié)軟骨一氧化氮檢測的意義[J].Current Physician，1998，3（11） ：11-14.

[3]高春陽，趙軍，韓冬梅，等.骨性關(guān)節(jié)炎臨床指數(shù)與一氧化氮表達(dá)頻率相關(guān)性研究[J].牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，32 （2）：36-38.

[4]高石軍，陳百成，湯慧華，等.一氧化氮在骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制中的作用[J].中華骨科雜志1999，197（7）：411-413.

[5]王傳家，霍霞，林玨龍，等.一氧化氮對兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞凋亡的影響[J].汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2002，15（1）29-32.

[6]Kalaci A， Yilmaz HR， Aslan B， et al. Effects of hyaluronan on nitric oxide levels and superoxide dismutase activities in synovial fluid in knee osteoarthritis[J]. Clin Rheumatol. 2007，26（8）：1306-1311.

[7]Bao F， Wu P， Xiao N， et al. Nitric oxide-driven hypoxia initiates synovial angiogenesis， hyperplasia and inflammatory lesions in mice. PlosOne.2012，7（3）：34494.

[8]楊林，郭艾.一氧化氮增加人軟骨肉瘤細(xì)胞表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶-13的機(jī)制研究[J].Chin J JointSurg，2010，4（4）：518-524.

[9]Amin AR， Dave M， Attur M， et al. COX-2， NO， and cartilage damage

and repair[J]. Curry Rheumatology Rep，2000，2（6）：447-453.

[10]祁傳才，于寶云，王偉卓.附桂骨痛膠囊對膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎NO及iNOS影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，30（4）：65-67.

[11]Pichika R， Homandberg GA. Fibronectin fragments elevate nitric oxide （NO） and inducibe NO synthetase （iNOS） levels in bovine cartilage and iNOS inhibitors block fibronectin fragment mediated damage and promote repair[J].Inflamm Res， 2004，53（8）：405-412.

[12]Huang CY，Hung LF， Liang CC， et al. COX-2 and iNOS are critical in advanced glycation end product-activated chondrocytes in vitro[J]. Eur J Clin Invest， 2009，39（5）：417-428.

[13]Yaron I， Shirazi I， Judovich R， et al. Fluoxetine and amitriptyline inhibit nitric oxide， prostaglandin E2， and hyaluronic acid production in human synovial cells and synovial tissue cultures[J].Arthritis Rheum，1999，42（12）：2561-2568.

編輯/張燕