摘要:普通光學顯微鏡(以下簡稱顯微鏡)在醫學形態學實驗教學中具有舉足輕重的作用, 如何正確使用和妥善管理顯微鏡至關重要。本文試從顯微鏡的使用以及管理角度加以討論,總結了使顯微鏡更好為實驗教學服務的方法。
關鍵詞:實驗教學;顯微鏡;正確使用;維護管理
醫學基礎課程形態學實驗中,手工操作是學生在醫學基礎課程形態學實驗中需要掌握的最基本的技術操作,也是基礎教學中的基礎訓練技能。而顯微鏡恰是此項技能訓練中最通用最實用的儀器設備之一,也是在醫學基礎課程中形態學實驗教學任務過程中必須掌握的訓練技能。醫學基礎課形態學主要包括組織胚胎學、病理解剖學、細胞生物學和病原生物學的實驗教學,在這些課程的實驗教學過程中無一不是頻繁的使用顯微鏡,所以只有正確的使用和妥善保管好顯微鏡,才能發揮它的功能, 延長它的使用率,使之更好地為實驗教學服務。
1顯微鏡使用的正確方法
1.1顯微鏡玻片標本的制備方法和觀察方法 普通光學顯微鏡在醫學基礎課形態學實驗教學中,最常用且必不可少的儀器。在教學過程中,除了正確引導學生了解顯微鏡的構造和原理,同時更重要的是引導學生對使用的顯微鏡玻片標本制備方法如組織切片、涂片、封片及組織印片的掌握。在實驗教學中學生對玻片標本常?;煜?,不能完全掌握分清所觀察的標本是組織切片、涂片、封片還是組織印片的能力,從而不能找到顯微鏡的正確的觀察方法。這就要求教師在課堂上應該為學生明確講解所使用每一種玻片標本的制備方法,并告訴學生在觀察不同玻片標本時如何正確使用顯微鏡的方法。舉例來說,病理解剖學和組織胚胎學所觀察的玻片標本多是組織切片,標本的厚度是均一的,觀察這樣的玻片標本基本是在一個焦距下即可,而寄生蟲學的蟲卵標本多是涂片,蟲卵是一個立體結構,若想觀察清楚蟲卵各個結構必須不斷調節顯微鏡的焦距,只有科學管理其使用過程才能達到最佳的觀察效果。
1.2染色標本與不染色標本的觀察方法 學生使用顯微鏡觀察的玻片標本設有兩種標本:一種是染色標本,另外一種是不染色標本,在觀察這兩種標本時所需光線有強弱之分。教師應該讓學生在課堂上能夠正確認識和熟練使用普通光學顯微鏡的光線調節裝置來觀察兩種不同標本,以達到最佳清晰效果。
在觀察標本時,根據不同標本的對光線的要求,隨時調節反光鏡(電光源除外)、集光器和光圈(也稱虹彩),可以達到最佳的觀察效果。光線調節裝置屬于普通光學顯微鏡的基本結構[1],但正是這最基本的結構也是最容易被忽略的。在顯微鏡下觀察標本時合適的光線尤為重要。
病理解剖學和組織胚胎學的玻片標本一般為染色標本,可在同一強弱的光線下完成標本的觀察,而醫學微生物學和人體寄生蟲學中所觀察的標本既有染色標本也有不染色標本(活體標本),在觀察不同標本時需要適當調節光線,以便觀察到清晰的效果。
在實驗過程中教師需要向學生講解觀察不同染色標本應該注意的問題,如觀察不染色標本時用弱光,集光器要降低光圈縮小,觀察染色標本時用強光,集光器要升高光圈放大,在相同的光源條件下,低倍鏡下的視野亮,高倍鏡下的視野暗,在進行物鏡轉換時也要注意光線的調節。做到每一節實驗課中都強化學生隨時調節光線的意識,逐漸養成正確使用光線調節習慣。
1.3油鏡頭的正確使用方法 普通光學顯微鏡有放大倍數為100倍的油鏡頭,為了增加照明亮度使鏡頭焦距縮短直徑很小所需光照強度最大提高顯微鏡的分辨率,常用于觀察細菌和寄生蟲的原蟲。在教學過程中,教師應該讓學生了解油鏡頭的原理,在同樣的光線下,油鏡的視野會暗一些,所以在使用油鏡頭觀察標本時,將顯微鏡的光線調至最亮才能達到最佳的觀察效果。此外,觀察標本過程中,調節顯微鏡焦距的細準焦螺旋時轉動要緩慢進行,轉不動時不要硬轉,否則容易毀壞標本。
1.4顯微鏡鏡頭的正確使用順序 顯微鏡使用過程中,需要通過物鏡的轉換進行樣本的觀察。物鏡中低倍鏡的視野大,利于尋找觀察目標,適宜觀察材料的整體結構。高倍鏡放大倍數大,分辨率高,但所看到的面積小,即視野小[2],適宜觀察局部細節。
因此,在實驗過程中,教師要明確告訴學生在尋找觀察標本時,按照一定程序要由低倍鏡→高倍鏡→再到油鏡來使用。先用低倍鏡找到所觀察的標本部位移到視野中心,將標本調節清晰再轉換高倍鏡觀察細節,在此強調由低倍鏡轉換高倍鏡,防止鏡頭碰撞玻片,從顯微鏡側面注視著,慢慢地轉動轉換器使高倍鏡頭對準通光孔,高倍鏡放大倍數高,看到材料的厚度就越薄,低倍鏡如果調換高倍鏡后,若視野亮度不夠圖像不太清楚,可上升聚光器和開大光圈觀察清晰的圖像。
1.5觀察鏡下標本的習慣 為了使學生對每一份觀察樣本都不出現漏檢,就要求學生對每一份樣本按照一定的順序進行觀察,做到使每一個觀察視野之間既不重疊也不間斷,此做法尤其對于需要準確計數的標本更重要。
在實驗課過程中,發現有些學生在觀察玻片標本時,上下左右很隨便地移動標本進行觀察,這樣做不利于全面地對整份標本進行觀察,從而造成容易漏檢的現象。因此,教師在授課過程中,一定要灌輸學生對整份標本在觀察時,按照一定的順序進行觀察,從而養成良好的檢驗習慣,對日后的工作也是有益無害。
2顯微鏡的維護與妥善管理
顯微鏡是一種精密且貴重的儀器, 必須有妥善的維護和管理方案。
2.1維護方案 必須熟練掌握并嚴格執行使用規程。①在取送顯微鏡一定要握住彎臂,另一手拖住鏡座,顯微鏡不能傾斜,讓受力均勻,拿穩顯微鏡。以免目鏡從鏡筒上端滑出。取送顯微鏡要輕拿輕放。②使用顯微鏡時應嚴格按照操作規程,切忌在桌面上推移顯微鏡,避免顯微鏡與桌面間的摩擦振動引起的精密部件脫落或損壞;注意電源開關不要短時頻繁開關,使用間歇要注意調低明亮度,延長燈泡的使用壽命;告訴學生不得隨意拆卸顯微鏡上的零件和顯微鏡鏡頭,以免磨損。③顯微鏡使用完畢后,取下標本片經聚光器降下,再將物鏡轉轉成\"八\"字形,轉動粗調節器使之下降,以免接物鏡與聚光器相碰。檢查電源是否關掉,油是否擦凈,注意保持顯微鏡的干燥、清潔,避免灰塵、水及化學試劑的玷污。最后套上顯微鏡外罩后放回實驗臺下的暗柜里。
2.2管理方案 ①顯微鏡應建立帳、卡、號一致。嚴把入庫關,了解顯微鏡的性能,正確進行維護,對新購置的顯微鏡進行逐臺檢查、清點、登記帳,建立檔案(帳、卡、號)并存入電腦。每臺顯微鏡都有詳細的編號,每個實驗室都有對應的使用記錄本。②建立責任制。本校醫學基礎課程班級較多,頻繁使用顯微鏡的實驗課程多,顯微鏡的使用頻率很高,實驗室采用專人專用的辦法,我校學生用的顯微鏡是固定在8個實驗室,每個實驗室配置30臺。上課前由帶教老師安排學生就座,指定顯微鏡與使用人員一一對應,并交代學生顯微鏡的使用與維護,每次用完后填寫儀器使用記錄。顯微鏡是否管理好,責任到位,哪個環節出問題,責任人是誰,一清二楚。 這樣顯微鏡可以得到較好的管理,實驗課就能做到井然有序。
參考文獻:
[1]陶瑜,郭向明,李浩然.光學顯微鏡 的電源及機械系統[J].現代醫學儀器與應用,2003,15(1):26-27.
[2]曾順良.實驗教學中學生使用顯微 鏡存在問題的分析及對策[J].檢驗醫學教育,2006,13(2):25-26.編輯/申磊