腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)超廣譜B-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌的檢測方法及耐藥性

韓艷琴 (赤峰學(xué)院第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古 赤峰 024000)

比較采用三種檢測技術(shù)檢測超光譜B-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的檢出率，對產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的耐藥現(xiàn)狀進(jìn)行深入分析。筆者旨在對236株腸桿菌科細(xì)菌用 WITEK32測定ESBLs，同時(shí)用復(fù)合紙片法、確證試驗(yàn)及雙紙片協(xié)同法進(jìn)行對照檢測。現(xiàn)將具體情況總結(jié)報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 菌株:試驗(yàn)菌株系我院2011年5月～2013年12月從門診和住院患者的尿、痰、膿汁等標(biāo)本中分離的，肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌共236株，ESBLs陰性質(zhì)控菌為大腸埃希菌ATC2599，ESBLs陽性質(zhì)控菌為肺炎克雷伯菌ATCC700603。

1.2 儀器檢測ESBLs:應(yīng)用WITEK32及CNS-NT卡、GNSF2和GNS-506卡檢測，通過測定頭孢他啶、頭孢噻肟兩種抗生素與酶抑制劑克拉維酸的聯(lián)合制劑與單純頭孢他啶、頭孢噻肟的最低抑菌濃度值比≥4時(shí)，判定為ESBLs陽性。

1.3 確證法:選用經(jīng)頭孢噻肟(CTX)及頭孢他啶(CAZ)等三代頭孢紙片初篩試驗(yàn)疑為產(chǎn)ESBLs株者，再用CAZ和CAZ/CA及CTX和CTX/CA兩組紙片同時(shí)測定，接種方法按紙片擴(kuò)散法進(jìn)行。結(jié)果判斷:2000年(NCCLS)標(biāo)準(zhǔn)即含克拉維酸和不含克拉維酸紙片的抑菌環(huán)直徑之差≥5 mm可確認(rèn)為ESBLs菌株。

1.4 雙紙片協(xié)同法:底物選用頭孢噻肟(CTX)或頭孢他啶(CAZ)，含酶抑制劑藥物為阿莫西林/克拉維酸(AMC)，阿莫西林/克拉維酸與底物紙片貼附于已涂抹待測菌液的瓊脂上，兩紙片中心距離為25 mm，接種方法按紙片擴(kuò)散法進(jìn)行。結(jié)果判斷:孵育18～24 h，觀察阿莫西林/克拉維酸一側(cè)的抑菌區(qū)加強(qiáng)者判為ESBLs陽性。

1.5 藥敏試驗(yàn):采用紙片擴(kuò)散法(K-B法)，判讀標(biāo)準(zhǔn)按NCCLS1999年版。

2 結(jié)果

2.1 三種測試法檢測ESBLs的陽性率比較:詳見表1。

2.2 ESBLs菌株與非ESBLs菌株對12種常用抗菌藥物耐藥率比較:詳見表2。……