COX—2與Fax、Ki—67在宮頸癌中表達(dá)的臨床意義

董靜茹　李麗　潘龍

【摘要】 目的 探討環(huán)氧化酶-2（COX-2）、Fax、Ki-67在宮頸癌中的表達(dá)及其臨床病理意義。方法 采用免疫組織化學(xué)染色的方法， 檢測宮頸癌（cervical cancer， CC）40例， 宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasm， CIN）10例及正常宮頸組織（normal cervical epithelium， NCE）9例中COX-2、Fax、Ki-67的抗體表達(dá)的情況。結(jié)果 COX-2在宮頸癌中的表達(dá)率為70%～90%， 而在正常宮頸組織及宮頸上皮內(nèi)瘤變中表達(dá)率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。Fax在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）；Ki-67在宮頸癌、CIN與正常宮頸組織中表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 COX-2、Fax、Ki-67在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】 環(huán)氧化酶-2；Fax；Ki-67；宮頸癌；免疫組織化學(xué)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

作者采用免疫組化方法檢測COX-2與Fax、Ki-67在宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）及正常宮頸組織中的表達(dá)， 探討它們異常表達(dá)與宮頸癌的增殖、分化、浸潤和轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集南陽地區(qū)2008～2013年手術(shù)切除標(biāo)本， 所有標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí)， 且術(shù)前未經(jīng)過任何治療。宮頸癌40例， 宮頸上皮內(nèi)瘤變10例；正常宮頸組織9例。患者發(fā)病年齡28～72歲， 平均年齡（47.6±10.6）歲， 40例宮頸癌中鱗狀細(xì)胞癌35例， 腺癌5例；高分化13例， 中分化20例， 低分化7例；臨床分期：Ⅰ期11例， Ⅱ期21例， Ⅲ期8例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18例。

1. 2 方法 標(biāo)本經(jīng)4%甲醛固定， 石蠟包埋， 連續(xù)切片， 厚度0.4 ?m， 免疫組化方法參照試劑盒說明書。試劑均購自福建邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。

1. 3 結(jié)果判定 COX-2染色陽性為在細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒， Fax染色陽性為在細(xì)胞膜上出現(xiàn)棕黃色顆粒， Ki-67染色陽性為在細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒。按切片中陽性細(xì)胞數(shù)的比例劃分， 無明確陽性為“-”；陽性細(xì)胞<10%為“+”；陽性細(xì)胞數(shù)10%～50%為“++”；陽性細(xì)胞數(shù)>50%為“+++”。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件和Spearmen相關(guān)分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

COX-2在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 而在正常宮頸組織與CIN組織之間表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；COX-2陽性表達(dá)與病理分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)（P<0.05）， 與年齡及病理類型無關(guān)（P>0.05）， 見表1。

Fax在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 在正常宮頸組織與CIN組織之間表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；Fax陽性表達(dá)與年齡及病理類型、病理分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)（P>0.05）。

Ki-67在正常宮頸組織中的表達(dá)明顯低于CIN組織和宮頸癌組織（P<0.05）， 在宮頸癌組織中的表達(dá)與COX-2相同。

3 討論

COX-2是前列腺素合成過程中的重要酶， 也是花生四烯酸代謝的關(guān)鍵限速酶。COX-2的高表達(dá)與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)。Masferre 等[1]研究顯示， 在胃癌中COX-2高表達(dá)者比低表達(dá)者更易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。本研究結(jié)果顯示， COX-2在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織， 且染色逐漸加深， 說明隨著癌變的發(fā)生COX-2的表達(dá)逐漸增強(qiáng)， 這與Liu等[2]的研究結(jié)果一致。同時(shí)， COX-2在低分化癌中、Ⅲ期及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中表達(dá)明顯增強(qiáng)， 說明COX-2的高表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。研究也發(fā)現(xiàn)部分標(biāo)本的腫瘤區(qū)域內(nèi)， 血管內(nèi)皮細(xì)胞也呈陽性染色， 提示COX-2的表達(dá)可能與腫瘤的轉(zhuǎn)移有關(guān)。所以， COX-2與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移關(guān)系密切， 對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤及預(yù)測腫瘤預(yù)后有一定的意義， 可以作為一種參考指標(biāo)。

Fax被稱為凋亡蛋白1， 與其配體組成Fas系統(tǒng)， 再將凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)通過凋亡途徑使靶細(xì)胞死亡。惡性腫瘤的Fax表達(dá)明顯下降或丟失， 說明腫瘤的發(fā)生發(fā)展可能與Fax丟失有關(guān)。曲利娟等[3]研究發(fā)現(xiàn)Fax在結(jié)腸癌中的表達(dá)明顯下降。本研究結(jié)果表明隨著正常宮頸→CIN→宮頸癌的轉(zhuǎn)化， Fax的陽性表達(dá)呈下降趨勢(shì)， 說明Fax系統(tǒng)在細(xì)胞凋亡中的作用減低， 使得腫瘤逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視。而在宮頸癌的臨床分期和病理分級(jí)中Fax的陽性表達(dá)率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。且Fax與COX-2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)， 說明Fax在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中不是一個(gè)早期事件， 其發(fā)生可能是宮頸癌已經(jīng)形成的后期事件。COX-2可能通過調(diào)節(jié)抗細(xì)胞凋亡基因bcl-2的表達(dá)抑制凋亡基因Fax的表達(dá)， 深入研究相關(guān)機(jī)制， 對(duì)宮頸癌病情監(jiān)測、轉(zhuǎn)移潛能等有潛在價(jià)值。

Ki-67是一種DNA結(jié)合蛋白， 它存在于增殖細(xì)胞中， 參與驅(qū)動(dòng)細(xì)胞周期的調(diào)控， 在除G0期之外的有絲分裂細(xì)胞周期中表達(dá)， 它可以識(shí)別生長中的正常和腫瘤細(xì)胞， 而對(duì)靜止期的細(xì)胞無作用。本實(shí)驗(yàn)中， Ki-67的陽性表達(dá)從宮頸CIN階段就已開始， 并且隨著進(jìn)一步發(fā)展為宮頸癌， Ki-67的陽性表達(dá)率逐漸上升， 且核染色呈棕色。提示細(xì)胞增殖活性的改變與癌變的過程相關(guān)。Ki-67的陽性表達(dá)也與臨床分期、病理分級(jí)呈正相關(guān)， 與靳玉蘭等[4]的研究結(jié)果相一致。在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中， Ki-67的陽性表達(dá)明顯增高， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， 說明腫瘤細(xì)胞增殖水平可能反映了腫瘤的惡性程度[5]。

綜上所述， 根據(jù)COX-2與Fax、Ki-67三者的聯(lián)合應(yīng)用， 在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

[1] Masferre JL ， Leahy KM， Koki AT， et al. Antiangiogenic and antitumor activities of cyclooxygenase-2 inhibitors. Cancer Res， 2000， 60（5）：1306.

[2] Liu CH， Chang SH， Narko K， et al. Overexpression of cyc looxygenase -2 is sufficient to induce tumorigenesis in transgenic mice. J Biol Chem， 2001， 276（21）：18563-18569.

[3] 曲利娟， 余英豪， 談景旺， 等.大腸癌組織中Fas/FasL系統(tǒng)、nm23表達(dá)與轉(zhuǎn)移的關(guān)系.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志， 2002， 18（2）： 153-155.

[4] 靳玉蘭， 張偉， 劉伯齊， 等. 食管癌前病變及原位癌組織中Ki-67、P53、iNOS的異常表達(dá).中華腫瘤雜志， 2001， 23（2）： 129.

[5] 謝麗， 安瑞芳. Ki-67在婦科腫瘤中的研究與應(yīng)用.國外醫(yī)學(xué)：婦幼保健分冊(cè)， 2004， 15（6）：391-392.

[收稿日期：2014-08-26]

【摘要】 目的 探討環(huán)氧化酶-2（COX-2）、Fax、Ki-67在宮頸癌中的表達(dá)及其臨床病理意義。方法 采用免疫組織化學(xué)染色的方法， 檢測宮頸癌（cervical cancer， CC）40例， 宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasm， CIN）10例及正常宮頸組織（normal cervical epithelium， NCE）9例中COX-2、Fax、Ki-67的抗體表達(dá)的情況。結(jié)果 COX-2在宮頸癌中的表達(dá)率為70%～90%， 而在正常宮頸組織及宮頸上皮內(nèi)瘤變中表達(dá)率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。Fax在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）；Ki-67在宮頸癌、CIN與正常宮頸組織中表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 COX-2、Fax、Ki-67在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】 環(huán)氧化酶-2；Fax；Ki-67；宮頸癌；免疫組織化學(xué)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

作者采用免疫組化方法檢測COX-2與Fax、Ki-67在宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）及正常宮頸組織中的表達(dá)， 探討它們異常表達(dá)與宮頸癌的增殖、分化、浸潤和轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集南陽地區(qū)2008～2013年手術(shù)切除標(biāo)本， 所有標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí)， 且術(shù)前未經(jīng)過任何治療。宮頸癌40例， 宮頸上皮內(nèi)瘤變10例；正常宮頸組織9例?；颊甙l(fā)病年齡28～72歲， 平均年齡（47.6±10.6）歲， 40例宮頸癌中鱗狀細(xì)胞癌35例， 腺癌5例；高分化13例， 中分化20例， 低分化7例；臨床分期：Ⅰ期11例， Ⅱ期21例， Ⅲ期8例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18例。

1. 2 方法 標(biāo)本經(jīng)4%甲醛固定， 石蠟包埋， 連續(xù)切片， 厚度0.4 ?m， 免疫組化方法參照試劑盒說明書。試劑均購自福建邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。

1. 3 結(jié)果判定 COX-2染色陽性為在細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒， Fax染色陽性為在細(xì)胞膜上出現(xiàn)棕黃色顆粒， Ki-67染色陽性為在細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒。按切片中陽性細(xì)胞數(shù)的比例劃分， 無明確陽性為“-”；陽性細(xì)胞<10%為“+”；陽性細(xì)胞數(shù)10%～50%為“++”；陽性細(xì)胞數(shù)>50%為“+++”。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件和Spearmen相關(guān)分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

COX-2在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 而在正常宮頸組織與CIN組織之間表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；COX-2陽性表達(dá)與病理分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)（P<0.05）， 與年齡及病理類型無關(guān)（P>0.05）， 見表1。

Fax在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 在正常宮頸組織與CIN組織之間表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；Fax陽性表達(dá)與年齡及病理類型、病理分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)（P>0.05）。

Ki-67在正常宮頸組織中的表達(dá)明顯低于CIN組織和宮頸癌組織（P<0.05）， 在宮頸癌組織中的表達(dá)與COX-2相同。

3 討論

COX-2是前列腺素合成過程中的重要酶， 也是花生四烯酸代謝的關(guān)鍵限速酶。COX-2的高表達(dá)與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)。Masferre 等[1]研究顯示， 在胃癌中COX-2高表達(dá)者比低表達(dá)者更易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。本研究結(jié)果顯示， COX-2在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織， 且染色逐漸加深， 說明隨著癌變的發(fā)生COX-2的表達(dá)逐漸增強(qiáng)， 這與Liu等[2]的研究結(jié)果一致。同時(shí)， COX-2在低分化癌中、Ⅲ期及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中表達(dá)明顯增強(qiáng)， 說明COX-2的高表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。研究也發(fā)現(xiàn)部分標(biāo)本的腫瘤區(qū)域內(nèi)， 血管內(nèi)皮細(xì)胞也呈陽性染色， 提示COX-2的表達(dá)可能與腫瘤的轉(zhuǎn)移有關(guān)。所以， COX-2與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移關(guān)系密切， 對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤及預(yù)測腫瘤預(yù)后有一定的意義， 可以作為一種參考指標(biāo)。

Fax被稱為凋亡蛋白1， 與其配體組成Fas系統(tǒng)， 再將凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)通過凋亡途徑使靶細(xì)胞死亡。惡性腫瘤的Fax表達(dá)明顯下降或丟失， 說明腫瘤的發(fā)生發(fā)展可能與Fax丟失有關(guān)。曲利娟等[3]研究發(fā)現(xiàn)Fax在結(jié)腸癌中的表達(dá)明顯下降。本研究結(jié)果表明隨著正常宮頸→CIN→宮頸癌的轉(zhuǎn)化， Fax的陽性表達(dá)呈下降趨勢(shì)， 說明Fax系統(tǒng)在細(xì)胞凋亡中的作用減低， 使得腫瘤逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視。而在宮頸癌的臨床分期和病理分級(jí)中Fax的陽性表達(dá)率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。且Fax與COX-2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)， 說明Fax在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中不是一個(gè)早期事件， 其發(fā)生可能是宮頸癌已經(jīng)形成的后期事件。COX-2可能通過調(diào)節(jié)抗細(xì)胞凋亡基因bcl-2的表達(dá)抑制凋亡基因Fax的表達(dá)， 深入研究相關(guān)機(jī)制， 對(duì)宮頸癌病情監(jiān)測、轉(zhuǎn)移潛能等有潛在價(jià)值。

Ki-67是一種DNA結(jié)合蛋白， 它存在于增殖細(xì)胞中， 參與驅(qū)動(dòng)細(xì)胞周期的調(diào)控， 在除G0期之外的有絲分裂細(xì)胞周期中表達(dá)， 它可以識(shí)別生長中的正常和腫瘤細(xì)胞， 而對(duì)靜止期的細(xì)胞無作用。本實(shí)驗(yàn)中， Ki-67的陽性表達(dá)從宮頸CIN階段就已開始， 并且隨著進(jìn)一步發(fā)展為宮頸癌， Ki-67的陽性表達(dá)率逐漸上升， 且核染色呈棕色。提示細(xì)胞增殖活性的改變與癌變的過程相關(guān)。Ki-67的陽性表達(dá)也與臨床分期、病理分級(jí)呈正相關(guān)， 與靳玉蘭等[4]的研究結(jié)果相一致。在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中， Ki-67的陽性表達(dá)明顯增高， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， 說明腫瘤細(xì)胞增殖水平可能反映了腫瘤的惡性程度[5]。

綜上所述， 根據(jù)COX-2與Fax、Ki-67三者的聯(lián)合應(yīng)用， 在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

[1] Masferre JL ， Leahy KM， Koki AT， et al. Antiangiogenic and antitumor activities of cyclooxygenase-2 inhibitors. Cancer Res， 2000， 60（5）：1306.

[2] Liu CH， Chang SH， Narko K， et al. Overexpression of cyc looxygenase -2 is sufficient to induce tumorigenesis in transgenic mice. J Biol Chem， 2001， 276（21）：18563-18569.

[3] 曲利娟， 余英豪， 談景旺， 等.大腸癌組織中Fas/FasL系統(tǒng)、nm23表達(dá)與轉(zhuǎn)移的關(guān)系.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志， 2002， 18（2）： 153-155.

[4] 靳玉蘭， 張偉， 劉伯齊， 等. 食管癌前病變及原位癌組織中Ki-67、P53、iNOS的異常表達(dá).中華腫瘤雜志， 2001， 23（2）： 129.

[5] 謝麗， 安瑞芳. Ki-67在婦科腫瘤中的研究與應(yīng)用.國外醫(yī)學(xué)：婦幼保健分冊(cè)， 2004， 15（6）：391-392.

[收稿日期：2014-08-26]

【摘要】 目的 探討環(huán)氧化酶-2（COX-2）、Fax、Ki-67在宮頸癌中的表達(dá)及其臨床病理意義。方法 采用免疫組織化學(xué)染色的方法， 檢測宮頸癌（cervical cancer， CC）40例， 宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasm， CIN）10例及正常宮頸組織（normal cervical epithelium， NCE）9例中COX-2、Fax、Ki-67的抗體表達(dá)的情況。結(jié)果 COX-2在宮頸癌中的表達(dá)率為70%～90%， 而在正常宮頸組織及宮頸上皮內(nèi)瘤變中表達(dá)率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。Fax在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）；Ki-67在宮頸癌、CIN與正常宮頸組織中表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 COX-2、Fax、Ki-67在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)。

【關(guān)鍵詞】 環(huán)氧化酶-2；Fax；Ki-67；宮頸癌；免疫組織化學(xué)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

作者采用免疫組化方法檢測COX-2與Fax、Ki-67在宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）及正常宮頸組織中的表達(dá)， 探討它們異常表達(dá)與宮頸癌的增殖、分化、浸潤和轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 收集南陽地區(qū)2008～2013年手術(shù)切除標(biāo)本， 所有標(biāo)本均經(jīng)病理證實(shí)， 且術(shù)前未經(jīng)過任何治療。宮頸癌40例， 宮頸上皮內(nèi)瘤變10例；正常宮頸組織9例?；颊甙l(fā)病年齡28～72歲， 平均年齡（47.6±10.6）歲， 40例宮頸癌中鱗狀細(xì)胞癌35例， 腺癌5例；高分化13例， 中分化20例， 低分化7例；臨床分期：Ⅰ期11例， Ⅱ期21例， Ⅲ期8例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18例。

1. 2 方法 標(biāo)本經(jīng)4%甲醛固定， 石蠟包埋， 連續(xù)切片， 厚度0.4 ?m， 免疫組化方法參照試劑盒說明書。試劑均購自福建邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。

1. 3 結(jié)果判定 COX-2染色陽性為在細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒， Fax染色陽性為在細(xì)胞膜上出現(xiàn)棕黃色顆粒， Ki-67染色陽性為在細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒。按切片中陽性細(xì)胞數(shù)的比例劃分， 無明確陽性為“-”；陽性細(xì)胞<10%為“+”；陽性細(xì)胞數(shù)10%～50%為“++”；陽性細(xì)胞數(shù)>50%為“+++”。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件和Spearmen相關(guān)分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

COX-2在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 而在正常宮頸組織與CIN組織之間表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；COX-2陽性表達(dá)與病理分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)（P<0.05）， 與年齡及病理類型無關(guān)（P>0.05）， 見表1。

Fax在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯低于正常宮頸組織和CIN組織（P<0.05）， 在正常宮頸組織與CIN組織之間表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；Fax陽性表達(dá)與年齡及病理類型、病理分級(jí)、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)（P>0.05）。

Ki-67在正常宮頸組織中的表達(dá)明顯低于CIN組織和宮頸癌組織（P<0.05）， 在宮頸癌組織中的表達(dá)與COX-2相同。

3 討論

COX-2是前列腺素合成過程中的重要酶， 也是花生四烯酸代謝的關(guān)鍵限速酶。COX-2的高表達(dá)與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后有關(guān)。Masferre 等[1]研究顯示， 在胃癌中COX-2高表達(dá)者比低表達(dá)者更易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。本研究結(jié)果顯示， COX-2在宮頸癌中的陽性表達(dá)率明顯高于正常宮頸組織和CIN組織， 且染色逐漸加深， 說明隨著癌變的發(fā)生COX-2的表達(dá)逐漸增強(qiáng)， 這與Liu等[2]的研究結(jié)果一致。同時(shí)， COX-2在低分化癌中、Ⅲ期及有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中表達(dá)明顯增強(qiáng)， 說明COX-2的高表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切。研究也發(fā)現(xiàn)部分標(biāo)本的腫瘤區(qū)域內(nèi)， 血管內(nèi)皮細(xì)胞也呈陽性染色， 提示COX-2的表達(dá)可能與腫瘤的轉(zhuǎn)移有關(guān)。所以， COX-2與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移關(guān)系密切， 對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤及預(yù)測腫瘤預(yù)后有一定的意義， 可以作為一種參考指標(biāo)。

Fax被稱為凋亡蛋白1， 與其配體組成Fas系統(tǒng)， 再將凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)通過凋亡途徑使靶細(xì)胞死亡。惡性腫瘤的Fax表達(dá)明顯下降或丟失， 說明腫瘤的發(fā)生發(fā)展可能與Fax丟失有關(guān)。曲利娟等[3]研究發(fā)現(xiàn)Fax在結(jié)腸癌中的表達(dá)明顯下降。本研究結(jié)果表明隨著正常宮頸→CIN→宮頸癌的轉(zhuǎn)化， Fax的陽性表達(dá)呈下降趨勢(shì)， 說明Fax系統(tǒng)在細(xì)胞凋亡中的作用減低， 使得腫瘤逃避機(jī)體的免疫監(jiān)視。而在宮頸癌的臨床分期和病理分級(jí)中Fax的陽性表達(dá)率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。且Fax與COX-2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)， 說明Fax在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中不是一個(gè)早期事件， 其發(fā)生可能是宮頸癌已經(jīng)形成的后期事件。COX-2可能通過調(diào)節(jié)抗細(xì)胞凋亡基因bcl-2的表達(dá)抑制凋亡基因Fax的表達(dá)， 深入研究相關(guān)機(jī)制， 對(duì)宮頸癌病情監(jiān)測、轉(zhuǎn)移潛能等有潛在價(jià)值。

Ki-67是一種DNA結(jié)合蛋白， 它存在于增殖細(xì)胞中， 參與驅(qū)動(dòng)細(xì)胞周期的調(diào)控， 在除G0期之外的有絲分裂細(xì)胞周期中表達(dá)， 它可以識(shí)別生長中的正常和腫瘤細(xì)胞， 而對(duì)靜止期的細(xì)胞無作用。本實(shí)驗(yàn)中， Ki-67的陽性表達(dá)從宮頸CIN階段就已開始， 并且隨著進(jìn)一步發(fā)展為宮頸癌， Ki-67的陽性表達(dá)率逐漸上升， 且核染色呈棕色。提示細(xì)胞增殖活性的改變與癌變的過程相關(guān)。Ki-67的陽性表達(dá)也與臨床分期、病理分級(jí)呈正相關(guān)， 與靳玉蘭等[4]的研究結(jié)果相一致。在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中， Ki-67的陽性表達(dá)明顯增高， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， 說明腫瘤細(xì)胞增殖水平可能反映了腫瘤的惡性程度[5]。

綜上所述， 根據(jù)COX-2與Fax、Ki-67三者的聯(lián)合應(yīng)用， 在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中有著重要作用 ， 可以作為判斷宮頸癌惡性程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

[1] Masferre JL ， Leahy KM， Koki AT， et al. Antiangiogenic and antitumor activities of cyclooxygenase-2 inhibitors. Cancer Res， 2000， 60（5）：1306.

[2] Liu CH， Chang SH， Narko K， et al. Overexpression of cyc looxygenase -2 is sufficient to induce tumorigenesis in transgenic mice. J Biol Chem， 2001， 276（21）：18563-18569.

[3] 曲利娟， 余英豪， 談景旺， 等.大腸癌組織中Fas/FasL系統(tǒng)、nm23表達(dá)與轉(zhuǎn)移的關(guān)系.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志， 2002， 18（2）： 153-155.

[4] 靳玉蘭， 張偉， 劉伯齊， 等. 食管癌前病變及原位癌組織中Ki-67、P53、iNOS的異常表達(dá).中華腫瘤雜志， 2001， 23（2）： 129.

[5] 謝麗， 安瑞芳. Ki-67在婦科腫瘤中的研究與應(yīng)用.國外醫(yī)學(xué)：婦幼保健分冊(cè)， 2004， 15（6）：391-392.

[收稿日期：2014-08-26]