梔子的化學成分研究

孫捍衛，張鳳梅，韓磊，張洪財

(1．武警后勤學院附屬醫院，天津 300162;2．黑龍江中醫藥大學中醫藥研究院，黑龍江 哈爾濱 150040)

梔子為茜草科(Rubiaceae)植物梔子(Gardenia jasm inoides Ellis)的干燥成熟果實，性寒，味苦，歸心、肺、三焦經，具有瀉火除煩，清熱利尿，涼血解毒的功效，外用消腫止痛。主治熱病心煩郁悶;濕熱黃疸，熱淋血淋;血熱吐血，尿血;熱毒瘡瘍，跌打腫痛。主產于浙江、福建、江西、湖南、廣東等地。該植物中含有環烯醚萜類化合物，有機酸類、黃酮類、香豆素類、揮發油類、皂苷類、木脂素類及其他類化合物，是其活性物質基礎。為進一步明確該植物的藥理活性部位及其活性部位物質基礎，我們對梔子的化學成分進行研究。本實驗應用硅膠柱色譜、ODS、高效液相色譜等方法，從中共分離鑒定出4個化合物。

1 儀器與材料

Bruke－400型超導核磁共振光譜儀(美國Bruker公司);Agilent 1100制備型HPLC(美國Agilent公司);C18制備型色譜柱(ZORBAX SB－C18，9．4mm ×25cm，5μm);柱色譜用硅膠(青島海洋化工廠，140～200目、200～300目);薄層色譜用硅膠板(Silica gel60F254)和TLC Silica gel60 Rp－18 F254s(Rp－18)(德國 Merck公司);柱色譜用反相ODS(ODS－AM，日本YMC公司);化學試劑為分析純(天津市第一化工有限公司)。

梔子果實于2011年10月采自浙江，經天津中醫藥大學中藥鑒定學教研室鑒定為茜草科植物梔子(Gardenia jasm inoides Ellis)的新鮮果實，標本(20111021)保存于武警后勤學院附屬醫院植物標本室。

2 提取分離

梔子果實12kg，用95%的乙醇回流提取3次，每次1．5h，每次乙醇用量10L，過濾，減壓回收溶劑，得稠浸膏160g。將浸膏混懸于8L水中，分別用等體積的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水飽和正丁醇梯度萃取，每種溶劑萃取3次，減壓濃縮，得到石油醚萃取物45g，氯仿萃取物34g，乙酸乙酯萃取物60g，正丁醇萃取物30g。乙酸乙酯萃取物經反復正相硅膠柱色譜、ODS、制備 HPLC得到化合物 1(24mg)、2(31mg)、3(36mg)、4(27mg)。

3 結構鑒定

3．1 化合物1

無色針狀結晶，易溶于氯仿。HR－ESI－MS m/z:413.2658［M－H］－，推斷化合物的分子式為C29H50O，計算其不飽和度為5。

1H－NMR(400MHz，CDCl3)高場區顯示6個甲基信號 δ 0．67(3H，s，H－18)、0．80(3H，s，H－19)、0．81(3H，d，J=6．3，H－21)、0．85(3H，d，J=6．3，H－26)、0．91(3H，d，J=6．3，H－27)、1．02(3H，d，J=6.7，H－28);δ 5．17(1H，d，J=4．3，H－7)、5．35(1H，m，H－23)處氫質子歸屬于雙鍵上質子信號。

在13C－NMR(100 MHz，CDCl3)中可觀察到29個碳信號，歸屬如下:

δ 37．4(C－1)、31．5(C－2)、71．7(C－3)、42．2(C－4)、140．6(C－5)、121．6(C－6)、31．8(C－7)、29．0(C－8)、50．0(C－9)、36．4(C－10)、21．0(C－11)、39．7(C－12)、42．2(C－13)、56．1(C－14)、26．1(C－15)、24．2(C－16)、56．7(C－17)、12．1(C－18)、19．3(C－19)、36．1(C－20)、19．7(C－21)、33．8(C－22)、28．2(C－23)、45．7(C－24)、29.2(C－25)、18．7(C－26)、19．1(C－27)、23.0(C－28)、11．7(C－29)。綜合以上信息與文獻［1］對照推斷該化合物為 β－谷甾醇，化學結構見圖1。

3．2 化合物2

白色粉末，Molish反應呈陽性，異羥肟酸鐵反應呈陽性，HR－ESI－MS m/z:341．0801［M+H］+，分子式 C15H16O9，不飽和度為 8。1H－NMR(400 MHz，CD3OD)δ:6．26(1H，d，J=9．4 Hz，H－3)，7．81(1H，d，J=9．4 Hz，H－4)，7．21(1H，s，H－5)，7.04(1H，s，H－8)，δ 4．96(1H，d，J=7．5)為葡萄糖端基質子，δ 3．23－3．95為糖的其他質子信號;13C－NMR(100 MHz，CD3OD)δ:163．6(C－2)，114.6(C－3)，145．5(C－4)，113．8(C－5)，150．5(C－6)，149．5(C－7)，105．5(C－8)，103．2(C－1')，74．6(C－2')，77．4(C－3')，71．2(C－4')，78．4(C－5')，62．5(C－6')。以上數據與文獻報道一致［2］，故鑒定化合物2為七葉苷，化學結構見圖1。

圖1 化合物結構式(1～4)

3．3 化合物3

淺黃色粉末，易溶于甲醇，mp:340～341℃。EI－MS m/z:271［M+H］+。鹽酸鎂粉反應呈陽性UV(CH3OH)λmax:266，297，337 nm;1H－NMR(500MHz，DMSO－d6)δ(ppm):6．18(1H，d，J=1.4Hz，6－H)，6．45(1H，s，8－H)，6．74(1H，s，3－H)，6．88(2H，d，J=8．4Hz，3，5－H)，7．90(2H，d，J=8．4Hz，2－H，6－H)10．55(2H，brs，7－OH，4－OH)，12．94(1H，s，5－OH);13C－NMR(400MHz，DMSO－d6)δ(ppm):162．1(C－2)，100．7(C－3)，179．6(C－4)，159．4(C－5)，96．7(C－6)，161．5(C－7)，91．8(C－8)，155．4(C－9)，101．4(C－10)，119．5(C－1')，159．3(C－4')，114．0(C－3'，5')，126．3(C－2'，6');以上波譜數據經與文獻［3］比較，鑒定該化合物為芹菜素，化學結構見圖1。

3．4 化合物4

為白色粉末，mp:84～6℃;分子式為 C8H10O2，易溶于甲醇，EI－MS m/z:137［M－H］－，表示分子量為138。1H－NMR(400MHz，CD3OD)，δ(ppm):7．01(2H，d，J=8．2Hz，H－2，6)，6．69(2H，d，J=8．2Hz，H－3，5)，2．68(2H，t，J=7．1Hz，H－7)，3．66(2H，t，J=6．5，7．2Hz，H－8)。13C－NMR(100MHz，CD3OD):130．2(C－1)，130．3(C－2，6)，115．1(C－3，5)，155．5(C－4)，38．7(C－7)，63．4(C－8)。以上波譜數據與文獻［4］報道的基本一致，故化合物鑒定為對羥基苯乙醇，化學結構見圖1。

［1］ 胡雪艷，陳海霞，高文遠，等．澤瀉化學成分的研究［J］．中草藥，2008，12(39):1788－1790．

［2］ 楊文志，汪豪，尚靖，等．毛菊苣的化學成分［J］．中國天然藥物，2009，7(3):193－195．

［3］ 田菁，趙毅民，欒新慧．馬鞭草化學成分的研究［J］．中國中藥雜志，2005，30(4):268－269．

［4］ 薛震，李帥，王素娟，等．山慈菇化學成分［J］．中國中藥雜志，2005，30(7):511－513．