核桃楸葉乙醇提取物對三種常見害蟲的殺蟲活性

呂 兵，王 卓，臧連生*，時東方，劉春明*

(1.吉林農業大學生物防治研究所/天敵昆蟲應用技術工程研究中心，長春 130118;2.長春師范大學中心實驗室，長春 130032)

核桃楸Juglans mandshurica Maxim.又名山核桃，屬于胡桃科胡桃屬落葉喬木，是東北紅松林的重要伴生樹種(孫墨瓏等，2007)，其葉、外果皮及樹皮均可以用來殺蟲(時東方等，2013)。國內外學者已從核桃楸葉、皮和果中分離到胡桃醌、黃酮醇、槲皮苷等多種化合物(Lee et al.，2001;Li et al.，2003;石建輝等，2006;孫墨瓏等，2007)，其中，胡桃醌是其中的主要毒性物質。已有學者研究表明，核桃楸葉乙醇提取物對舞毒蛾Lymantria dispar L.、甘藍夜蛾Mamestra brassicae L.幼蟲 (孫墨瓏等，2007)以及雙斑螢葉甲Monolepta hieroglyphica (Mots-chulsky)、菜青蟲Pieris rapae L.和綠豆象Callosobruchus chinensis(L.)(時東方等，2013)等害蟲具有一定的殺蟲活性。溫室白粉虱 Trialeurodes vaporariorum Westw.、蚜蟲、小菜蛾Plutella xylostella (L.)幼蟲是東北地區為害保護地和設施栽培蔬菜及觀賞植物的重要害蟲。目前，關于核桃楸提取物對這三種害蟲的殺蟲效果研究尚少。為此，筆者研究了核桃楸葉乙醇提取物對溫室白粉虱、小菜蛾幼蟲及蚜蟲的殺蟲活性，為充分利用本地核桃楸葉豐富自然資源，開發環境友好型植物源農藥提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 供試植物材料

供試胡核桃楸葉2013年采于吉林省白山市江源縣，自然陰干后，將葉粉碎過20-30 目篩備用。

1.2 供試昆蟲

溫室白粉虱、小菜蛾、豌豆蚜2012年采集自吉林農業大學蔬菜試驗基地，在人工氣候室(26±1℃，60%±5% RH，L 14∶10 D)條件下，分別用番茄、甘藍和蠶豆進行續代繁殖。

1.3 殺蟲活性物質的提取方法

稱取50 g 核桃楸葉粉，用索氏提取器及95%乙醇回流提取4 h，旋轉蒸發器減壓濃縮，得醇提液浸膏，備用。具體操作方法參見時東方等(2013)。

1.4 提取物對溫室白粉虱活性的測定

在預實驗的基礎上，將核桃楸葉乙醇提取物用蒸餾水稀 成 2.0395、1.6316、1.2237、0.8158、0.4079 g/L 五個濃度梯度，以蒸餾水做對照。核桃楸葉乙醇提取物對溫室白粉虱的活性測定采用連葉浸漬法。將無蟲番茄葉片在藥液中浸漬約30 s，取出后晾干藥液，將水培番茄葉片置于透明接蟲杯內，并接入20 頭粉虱成蟲，48 h后，檢查試蟲存活數和死亡數。每個處理(濃度)重復10 次。

1.5 提取物對小菜蛾幼蟲活性的測定

在預實驗的基礎上，將核桃楸葉乙醇提取物用蒸餾水稀 成 2.0395、1.6316、1.2237、0.8158、0.4079 g/L 五個濃度梯度，以蒸餾水做對照。用藥方式為藥液浸蟲法。將試蟲在供試核桃楸葉藥液中浸漬5 s 后取出，吸去多余藥液，移入培養皿中。供試小菜蛾幼蟲飼喂新鮮的甘藍葉片，48 h 后，檢查試蟲存活數和死亡數。每個處理提供5 頭3-4 齡小菜蛾幼蟲，每個處理重復10 次。

1.6 提取物對蚜蟲活性的測定

在預實驗的基礎上，將核桃楸葉乙醇提取物用蒸餾水稀 成 1.9518、0.6798、0.4079、0.2719、0.1360 g/L 五個濃度梯度，以蒸餾水做對照。用藥方式為浸蟲浸葉法，將帶有蚜蟲的蠶豆葉片在供試藥液中浸滯5 s 后取出，吸去試蟲與葉片上多余藥液，將試蟲與葉片移入培養皿中，48 h 后，檢查試蟲存活數和死亡數。每個處理提供10 頭蚜蟲，每個處理重復11 次。

1.7 數據分析

以死亡率作為毒力指標，通過用藥濃度-藥效毒力回歸評價核桃楸葉乙醇提取物的殺蟲活性。校正死亡率計算公式:

校正死亡率=(處理死亡率-對照死亡率)/ (1-對照死亡率)×100 %。

數據用DPS 14.10 軟件進行分析，以藥劑質量濃度值的常用對數值為自變量，校正死亡率幾率值為因變量，進行回歸分析，求出供試昆蟲對藥劑反應的回歸方程、LC50。不同處理間的死亡率進行方差分析，采用Duncan 氏新復極差法進行平均數的多重比較。

2 結果與分析

2.1 核桃楸葉乙醇提取物對溫室白粉虱的毒殺作用

核桃楸葉乙醇提取物對白粉虱具有較強的胃毒作用(表1)。取食浸漬不同稀釋濃度藥液番茄葉片48 h 后，溫室白粉虱的死亡率存在明顯差異(F5，54=94.87，P＜0.0001)，隨著藥液濃度的增大，對于白粉虱的毒殺作用越強(見表1)。取食浸漬2.0395 g/L 番茄葉片48 h 后，白粉虱的校正死亡率高達94.48%。根據毒力測定結果，以質量濃度(對數)-校正死亡率(幾率)建立毒力回歸方程:Y=5.2645 +2.1140x，r=0.8297。當死亡率為50%時，LC50=0.7527 g/L。

2.2 核桃楸葉乙醇提取物對小菜蛾幼蟲的毒殺作用

核桃楸葉乙醇提取物對小菜蛾幼蟲具有較強的觸殺作用(表1)。浸漬不同稀釋濃度藥液48 h 后，小菜蛾幼蟲的死亡率存在明顯差異 (F5，54=47.967，P＜0.0001)，隨著藥液濃度的增大，對于小菜蛾幼蟲的毒殺作用越強。浸漬2.0395 g/L藥液48 h 后，小菜蛾幼蟲的校正死亡率高達98.00%。根據毒力測定結果，以質量濃度 (對數)-校正死亡率(幾率)建立毒力回歸方程:Y=5.2971+2.9402x，r=0.8786，當死亡率為50%時，LC50=0.7924 g/L。

表1 核桃楸葉乙醇提取物對溫室白粉虱和小菜蛾48 h 的毒殺作用Table 1 Toxicity of alcohol extracts from Juglans mandshurica leaves on Trialeurodes vaporariorum and Plutella xylostella in 48 h

2.3 核桃楸葉乙醇提取物對蚜蟲的毒殺作用

核桃楸葉乙醇提取物對蚜蟲也有更強的觸殺作用(表2)。浸漬不同稀釋濃度藥液48 h 后，豌豆蚜的死亡率存在明顯差異(F5，60=29.285，P＜0.0001)，隨著藥液濃度的增大，對于蚜蟲的毒殺作用越強。浸漬0.9518 g/L 藥液48 h 后，豌豆蚜的校正死亡率高達89.35%。根據毒力測定結果，以質量濃度(對數)-校正死亡率(幾率)建立毒力回歸方程:Y=6.2442 +1.8476x，r=0.9893，當死亡率為50%時，LC50=0.2121 g/L。

表2 核桃楸葉乙醇提取物對蚜蟲48 h 的毒殺作用Table 2 Toxicity of alcohol extracts from Juglans mandshurica leaves on Aphis craccivora in 48 h

3 結論與討論

本研究結果表明，核桃楸葉乙醇提取物對東北地區三種常見害蟲溫室白粉虱、小菜蛾和豌豆蚜均有較好的毒殺作用。提取物對白粉虱成蟲具有一定的胃毒作用，致死中濃度為0.7527 g/L，對小菜蛾幼蟲和蚜蟲則具有較強的觸殺作用，致死中濃度分別為0.7924 和0.2121 g/L。

孫墨瓏等(2007)研究表明，核桃楸葉乙醇提取物對舞毒蛾和甘藍夜蛾幼蟲具有殺蟲活性，致死中濃度分別為3.9 和6.0 g/L，其報道數值高于本研究對三種昆蟲的測試結果，可能與其選擇測試的種類不同以及昆蟲個體較大有關。蘇秀等(2010)測試的山核桃Carya cathayensis Sarg.外果皮甲醇提取物對蚜蟲的致死中濃度為42.8 g/L，其毒殺作用遠低于本研究核桃楸葉乙醇提取物測定結果，這可能與提取工藝以及不同測試植物種類有關。此外，核桃楸葉提取物對雙斑螢葉甲、菜青蟲和綠豆象等害蟲也表現出一定的殺蟲活性(時東方等，2013)。本研究首次發現核桃楸葉提取物對粉虱類害蟲也表現出較強的毒殺作用。有研究結果表明，核桃楸提取物具有廣譜的殺蟲活性，是否對瓢蟲和寄生蜂等天敵昆蟲具有殺蟲活性有待進一步研究。

References)

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