貝伐單抗聯合化療治療食管癌160例

白 玉 張哲瑩 姚文健 趙寶生 (新鄉醫學院病理教研室，河南 新鄉 453003)

腫瘤新生血管生成是腫瘤細胞增殖、腫瘤生長的必備條件，血管內皮生長因子(VEGF)是血管生成過程中最重要的血管內皮生長刺激因子，對誘導和調節血管內皮細胞的增殖及新生血管的形成有重要作用〔1〕。貝伐單抗是一種重組的VEGF單克隆抗體，是世界上首個批準上市的VEGF抑制劑，臨床研究顯示貝伐單抗可明顯抑制結腸癌〔2〕、乳腺癌〔3〕等腫瘤的生長和轉移，但尚未見用于治療食管癌的臨床研究。本文通過研究貝伐單抗聯合化療對食管癌患者的治療效果，探索VEGF是否可以作為合適的治療靶應用于食管癌的靶向治療。

1 對象與方法

1.1 對象 2008～2009年新鄉醫學院第一附屬醫院胸外科收治的160例適合手術的Ⅱ～Ⅲ期食管癌患者。年齡48～78歲，男103例，女57例，術前均未接受任何放化療。患者均簽署知情同意書。

1.2 試劑 VEGF單克隆抗體(即用型)購自福州邁新生物技術開發有限公司;免疫組化鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶(SP)試劑盒、二氨基聯苯胺(DAB)顯色劑購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.3 免疫組織化學檢測 均手術治療，癌組織經常規10%甲醛溶液固定、脫水、透明、石蠟包埋及切片。采用SP法，石蠟切片脫蠟和水化后，3%H2O2-甲醇消化內源性過氧化物酶的活性，修復抗原，0.5%小牛血清白蛋白封閉非特異性抗體，滴加一抗，滴加生物素化的二抗，滴加鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化酶，DAB顯色、水洗、蘇木素復染、脫水、透明、中性樹膠封片。顯微鏡下觀察。

1.4 結果判定 參照許良中等〔4〕的免疫組織化學反應結果的判定標準，綜合考慮切片中陽性細胞占所觀察同類細胞數的百分比和陽性細胞著色強度，半定量判斷結果。根據顯色程度判斷陽性強度:基本不著色者為0分;著色淡黃色者為1分;棕黃色者為2分;棕褐色者為3分。按陽性細胞所占計數細胞百分比計分:0分為無陽性細胞，陽性細胞≤10%計1分，10% ＜陽性細胞≤50%計2分，50% ＜陽性細胞≤75%計3分，陽性細胞＞75%計4分。染色強度與陽性細胞計分乘積0～2分計為-，3～5分計為+，6～9分計為?，10～12分計為?。

1.5 分組 按照VEGF染色結果，-判定為無靶點組52例，+～?判定為有靶點組108例。兩組患者又隨機平分為試驗組和對照組。

1.6 治療方法 對照組給予順鉑+5-氟尿嘧啶的常規化療，順鉑 20 mg·m－2·d－1，5-氟尿嘧啶750 mg·m－2·d－1，第1 ～5天靜脈滴注，21 d為一個周期，連用4個周期。試驗組:貝伐單抗+常規化療。貝伐單抗7.5 mg/kg(美國羅氏制藥公司產品，規格:100 mg/4 ml)，用0.9%氯化鈉100 ml稀釋，化療第1天在化療后靜滴，21 d為一個周期，連用4個周期。化療方案同對照組。

1.7 隨訪觀察 出院后隨訪3年，隨訪內容包括患者癥狀、體征改善和生存情況等，不適復查CT。統計兩組患者的3年生存率、復發率、轉移率。

1.8 統計學分析 應用SPSS15.0軟件進行χ2檢驗。

2 結果

2.1 VEGF在食管癌組織中的表達情況 VEGF主要表達在癌細胞的胞質。108例VEGF表達陽性，陽性率67.5%，有52例表達陰性，陰性率32.5%。見圖1。

圖1 VEGF在癌組織中的表達情況(SP，×400)

2.2 療效比較 有靶點組內試驗組3年生存率較對照組明顯提高(68.5%vs 48.1%，P＜0.05);復發率和轉移率明顯降低(66.7%vs 85.2%;51.9%vs 75.9%，P＜0.05)。無靶點組內試驗組與對照組 3年生存率(53.8%vs 46.2%)、復發率(76.9%vs 84.6%)和轉移率(69.2%vs 76.9%)無顯著性差異(P＞0.05)。

3 討論

腫瘤靶向治療的研究重點在于靶點的尋找，腫瘤的發生、發展以及轉移均與腫瘤的血管生成密切相關，理論上，以血管生成的各個環節及其過程為靶點抑制腫瘤血管生成，可有效控制腫瘤的生長和轉移。在腫瘤血管生成的多種細胞因子中，VEGF是人類腫瘤中促血管生成的最主要因子，VEGF具有促進內皮細胞分裂、增生和趨化作用，并能增強血管通透性及促進腫瘤的生長、侵襲和轉移〔5〕。2004年美國食品和藥品管理局批準的新藥貝伐單抗(bevaeizumab)直接靶向VEGF，被稱為血管生成抑制劑。它能與所有VEGF異構體結合，從而阻斷VEGF與血管內皮細胞生長因子受體結合，以抑制VEGF活性，進而起到抑制腫瘤的作用〔6〕。

利用抗體對腫瘤特異抗原的選擇性，貝伐單抗也能特異性地靶向癌細胞，降低其對正常器官的毒性。對VEGF表達陽性的患者，貝伐單抗有顯著的治療效果;對缺乏VEGF表達的患者，貝伐單抗則沒有抗腫瘤作用。因此，VEGF可以作為合適的治療靶應用于食管癌的靶向治療。

1 Ferrara N.Vascular endothelial growth factor:basic science and clinical progress〔J〕.Endocr Rev，2004;25(4):581.

2 周 毅.卡培他濱與貝伐單抗聯合治療老年轉移性結直腸癌的近期療效及安全性〔J〕.中國老年學雜志，2012;32(1):62-3.

3 趙勝雷.血管內皮生長因子與乳腺癌靶向治療的研究進展〔J〕.中國癌癥防治雜志，2010;2(2):152-4.

4 許良中，楊文濤.免疫組織化學反應結果的判斷標準［J］.中國癌癥雜志，1996;6(4):229-31.

5 Le XF，Mao W，Lu C，et al.Specific blockade of VEGF and HER 2 pathways results in greater growth inhibition of breast cancer xenografts that overexpress HER2〔J〕.Cell Cycle，2008;7(23):3747-58.

6 王慶華，侯 蕓.分子靶向藥物貝伐單抗研究進展〔J〕.中國腫瘤，2005;14(11):716-9.