眼瞼基底細胞癌患者術后組織SOX18、整合素αvβ3表達與血管生成的關系

孫紅兵 樊秀婷 龔莉華 (復旦大學附屬中山醫院青浦分院眼科，上海 201700)

腫瘤進展中血管新生明顯，對促進腫瘤細胞增殖及腫瘤分化有重要作用〔1，2〕。SOX18是編碼轉錄因子的發育基因，可以和其他轉錄因子或配體形成復合體，調控靶基因的表達，SOX18可能對腫瘤細胞的脈管生成和增殖有一定價值〔3，4〕。整合素αvβ3是細胞黏附分子的重要成員，不僅對細胞黏附起重要調控作用，還對細胞分化、凋亡和血管生成有一定價值〔5〕。白細胞分化抗原34(CD34)被認為是血管的重要標志物，其特異性強〔6〕。本研究關注眼瞼基底細胞癌患者術后組織SOX18、整合素αvβ3表達對CD34陽性血管生成的作用。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 我院手術治療的眼瞼基底細胞癌患者的臨床資料及術后蠟塊組織為研究組，樣本均經病理醫師再次確診，并符合世界衛生組織(WHO)中的診斷標準，共105例，男55例，女50例，年齡56～86歲，平均71.2歲。術前均未進行放療和化療。55例基底細胞乳頭狀瘤術后組織為對照組，其中男30例，女25例，年齡57～84歲，平均65.2歲。兩組一般臨床特征無明顯差別，具有可比性。

1.2 SOX18、整合素 αvβ3和CD34蛋白的表達 SOX18、整合素αvβ3和CD34的濃縮液，正式檢測前均進行預實驗，選擇染色強度最理想、背景最干凈的配比濃度進行正式實驗。應用免疫組化SABC法，采用DAB染色。操作由病理科主管技師完成，嚴格質量控制，努力減少誤差。

1.3 SOX18、整合素αvβ3和CD34蛋白表達的判定 CD34以血管內皮細胞質染成棕黃色進行判斷，以3個以上連續的內皮細胞或分支的血管認定為腫瘤間質的血管，選擇5個密度最高的區域(400倍)進行計數，取平均值計為微血管密度(MVD)。SOX18以細胞核出現棕黃的顆粒為陽性反應細胞，整合素αvβ3以細胞質出現棕黃色顆粒為陽性細胞。SOX18、整合素αvβ3均計數5個400倍視野的細胞總數，計算陽性率的平均值。SOX18和整合素αvβ3以陽性細胞≥5%為陽性，以＜5%為陰性。

1.4 統計學處理 采用SAS6.12軟件進行χ2檢驗或線性相關性分析。

2 結果

2.1 兩組 SOX18、整合素 αvβ3和 MVD的比較 研究組SOX18、整合素αvβ3陽性率，MVD值明顯高于對照組(P均＜0.001)。見表1。

2.2 研究組SOX18、整合素αvβ3和MVD與臨床特征的關系研究組SOX18、整合素αvβ3和MVD的表達均與腫瘤最大徑、脈管累犯、TNM分期和增殖細胞核抗原(PCNA)指數密切相關(P均＜0.05)。見表2。

表1 兩組SOX18、整合素αvβ3陽性表達和MVD比較〔n(%)〕

表2 研究組SOX18、整合素αvβ3陽性表達和MVD與臨床特征的關系〔n(%)〕

2.3 研究組SOX18、整合素αvβ3和MVD相關性分析 研究組 SOX18和整合素 αvβ3(r=0.48，P=0.025 4)、SOX18 和MVD(r=0.58，P=0.008 3)、整合素 αvβ3 和 MVD(r=0.54，P=0.011 3)均具有正相關性。

3 討論

基底細胞癌主要發生于老年人，眼瞼是重要的好發部位。臨床特征為具有珍珠樣形態伴毛細血管擴張，表面為丘疹或結節，可伴有糜爛或潰瘍〔7，8〕。部分類型可以表現為片狀紅斑，類似于皮炎〔9〕。近來人們發現基底細胞癌是基因學異常和遺傳學改變相關的腫瘤〔10〕。基底細胞癌在形成和進展過程中常出現間質血管的新生。而對于實性基底細胞癌常伴有明顯的血管擴張，由于血管過多的生長及腫瘤對其破壞，局部可以出現典型的出血性改變〔11，12〕。基底細胞癌的生長依賴于血管生成，此時腫瘤中癌基因和血管生成對促進腫瘤進展有重要價值〔13〕。血管內皮生長因子(VEGF)對腫瘤間質血管生成具有重要促進作用。而CD34是重要的血管內皮細胞標志物〔14〕。VEGF對CD34陽性的血管密度有明顯促進作用。此時腫瘤間質中CD34陽性的血管生成多，腫瘤局部供應的營養豐富，腫瘤生成和代謝快，侵襲能力增加，轉移潛能增強〔15〕。SOX18作為轉錄因子相關的基因，具有一個HMG基序保守區〔16〕，其功能有:①參與組織的發育、血細胞的生成，神經系統的發育等〔17〕。②SOX18是維持干細胞全能性的重要基因〔18〕。③SOX18參與血細胞的生成和心血管發育，④SOX18是T細胞和B細胞發生過程中的轉錄因子〔19〕。因此，SOX18的功能多樣，其對腫瘤的作用也可能與血管的生成有關〔20〕。整合素αvβ3由αv亞基和β3亞基形成的跨膜異二聚體糖蛋白，其能識別配體分子中的精-甘-天冬序列，這類配體包括 FN、VN、TSP-1 和 vWF 等〔21〕。整合素αvβ3參與多種細胞的活動過程，同時對腫瘤間質血管生成、侵襲性生長、轉移及傷口愈合等有重要作用〔22〕。

本實驗結果提示SOX18、整合素αvβ3可以有效促進CD34陽性的腫瘤間質血管的生成。SOX18、整合素αvβ3的促癌作用類似癌基因，其常與相關配體結合后發揮作用。由于基底細胞癌的生長過程中常依賴血管的生成，因此促進腫瘤血管生成因素同樣具有促進癌進展的作用。聯合檢測SOX18、整合素αvβ3和MVD的表達可能預示著基底細胞癌的進展。即SOX18、整合素αvβ3和MVD高表達腫瘤生長加快、侵犯脈管和增殖活性強等。SOX18和整合素αvβ3具有直接促進CD34陽性血管生成的作用。SOX18和整合素αvβ3均能引起腫瘤細胞產生多種多樣的血管生成的信號或因子，此時腫瘤血管伸長，管腔擴張。SOX18、整合素αvβ3引起血管內皮細胞的增殖，并通過內皮細胞前體細胞分化后形成內皮依賴性血管，此時腫瘤體積增大的速度明顯加快〔23，24〕。

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