老年子宮內膜樣腺癌患者癌組織Aurora-A、-B和TPX2表達及相關性

齊曉玲 (齊齊哈爾醫學院第一附屬醫院婦產二科，黑龍江 齊齊哈爾 161000)

子宮內膜樣腺癌患者常表現為陰道不明原因的出血。目前普遍認為其發生是多步驟、多因素參與的連續復雜過程，多種癌相關基因和蛋白參與〔1〕。Aurora-A、-B是Aurora激酶家族的重要成員，是中心調節體、紡錘體形成的重要參與者，Aurora-A、-B在人類多種腫瘤中高表達〔2，3〕。TPX2是一個新的紡錘體成分家族的新成員，彌散分布在S和G2期細胞的核心位置，對細胞有絲分裂紡錘體形成過程起重要作用〔4，5〕。本研究關注老年子宮內膜樣腺癌患者術后組織Aurora-A、-B和TPX2表達及其相關性。

1 材料和方法

1.1 臨床資料 我院婦產科2010年1月至2013年12月診斷為子宮內膜樣腺癌的老年患者160例術后蠟塊組織為實驗組，均經病理醫師再次閱片確診，并嚴格符合世界衛生組織(WHO)中診斷標準。年齡60～84(平均69.6)歲。子宮脫垂或子宮肌瘤行子宮全切后經病理醫師診斷為正常的老年子宮內膜組織蠟塊50例為對照組，年齡60～81(平均68.7)歲。兩組一般資料無明顯差別(P＞0.05)。

1.2 Aurora-A、-B和TPX2蛋白檢測 Aurora-A、-B和TPX2蛋白的檢測應用免疫組化二步法。3種抗體的濃縮液均購自武漢博士德生物工程公司，依據不同比例稀釋后進行預實驗，選擇最理想的配比濃度用于正式實驗。免疫組化的顯色應用DAB染色。操作均按說明書進行，均由同一病理主管技師操作，嚴格質控，減少可能存在的誤差。

1.3 Aurora-A、-B和TPX2結果判斷方法 Aurora-A和-B均以細胞核棕黃色顆粒為陽性細胞，TPX2以細胞核和(或)細胞質棕黃色顆粒為陽性細胞。選擇顯色集中的上皮細胞區(400倍視野，熱點區)，計數每張切片6個視野，取平均值，計算陽性率，以陽性細胞≥5%定為陽性，以陽性細胞＜5%定為陰性。

1.4 統計學方法 采用SAS6.12軟件進行χ2檢驗及線性相關性分析。

2 結果

2.1 兩組Aurora-A、-B和TPX2蛋白表達陽性率比較 兩組Aurora-A、-B和TPX2表達陽性率差別均顯著(P＜0.000 1)。見表1。

2.2 實驗組不同臨床特征患者Aurora-A、-B和TPX2蛋白表達陽性率的比較 實驗組Aurora-A、-B和TPX2表達與腫瘤最大徑、肌層浸潤情況、Ki67增殖、增殖細胞核抗原(PCNA)指數和TNM分期均密切相關。見表2。

表1 兩組Aurora-A、-B和TPX2蛋白陽性表達率比較〔n(%)〕

表2 實驗組不同臨床特征患者Aurora-A、-B和TPX2蛋白表達陽性率比較〔n(%)〕

2.3 實驗組Aurora-A、-B和TPX2表達相關性 Aurora-A和-B(r=0.59，P=0.0065)、Aurora-A 和 TPX2(r=0.49，P=0.035 2)、Aurora-B 和 TPX2(r=0.41，P=0.039 8)表達均正相關。

3 討論

子宮內膜樣腺癌是激素相關疾病，由于老年人子宮內膜為萎縮或囊性萎縮狀態，因此腫瘤發病過程中受到的影響因素可能更多。在病變過程中，多種基因和蛋白表達失調，可以加速腫瘤惡變及轉化〔6〕。Aurora-A激酶的編碼基因定位于20q13.2，是負責調控細胞有絲分裂的重要的絲氨酸/蘇氨酸激酶，當Aurora-A過表達時，可以引起有絲分裂檢測點的監測功能失控，引起細胞分裂異常，常使癌基因活化，抑癌基因失活，細胞出現明顯惡變〔7，8〕。而Aurora-B作為家族的同源蛋白，被認為是染色體的過客蛋白，定位在有絲分裂早期的染色體著絲粒區域，當細胞進入分裂后期時引起微管內嵌信著絲粒，此時紡錘體中央和細胞核裂內移，最終在中間體聚集〔9〕。也有觀點認為Aurora-B高表達時可以引起細胞多核化，同時產生明顯的多倍體，加速惡性變進程〔10，11〕。TPX2的相對分子量為100 kD，其基因定位于染色體的20q11.2，出現在細胞周期的G1至S期，當細胞分裂后其功能消失〔12〕。有觀點認為TPX2作為一種被細胞周期調控的核增殖相關蛋白，除可以促進腫瘤細胞增殖外，還參與細胞有絲分裂的紡錘體微管形成〔13〕。常海平等〔14〕通過對62例宮頸鱗癌術后組織中檢測TPX2表達，發現TPX2高表達在腫瘤組織中，而正常組織中不表達，認為TPX2參與宮頸鱗癌發生和進展，也提示TPX2有可能為宮頸鱗癌早期診斷和預后的重要指標。

雖然Aurora-A、-B和TPX2不完全是同一家族成員，但是3種蛋白對微管和紡錘體結構的調節作用使3種蛋白緊密聯系在一起。細胞內高水平的Aurora-A、-B蛋白參與引起細胞產生多個中心體，同時形成不明顯對稱的多極紡錘體，使染色體出現不對稱性分離，形成非整體的子代細胞，此種細胞也是腫瘤性細胞中最重要的細胞，其分化幼稚，細胞異型性明顯。也有觀點認為Aurora-A、-B和TPX2可以引起惡性腫瘤細胞分裂增殖，此時3種蛋白可以不斷引起細胞跨過有絲分裂的扳機位點，使新的細胞周期中形成不連續的增殖，腫瘤細胞失控性生長〔15，16〕。也有學者認為Aurora-B可以有效地決定細胞染色體的分離和細胞質的分裂過程，促進非整倍體細胞的大量形成〔17，18〕。本實驗提示3種蛋白對腫瘤的生長及浸潤有重要價值。由于Ki67和PCNA均為臨床標記腫瘤細胞增殖的重要標志性抗體，因此Aurora-A、-B和TPX2與Ki67和PCNA的相關性直接說明3種蛋白可以有效促進腫瘤細胞增殖過程，其也是Aurora-A、-B和TPX2對腫瘤細胞染色體和細胞分裂調節的外在表現〔19～21〕。

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