心臟驟停后延遲復蘇對大鼠海馬病理變化的影響

姜銀松 李新宇

[摘要] 目的 探討心臟驟停后延遲心肺復蘇對大鼠海馬病理變化的影響。方法 成年雄性SD大鼠54只，隨機分為假手術組（S組）、即刻復蘇組（A組），延遲復蘇組（B組），每組按血管穿刺后（S組）或自主循環恢復（ROSC）后（A組、B組）0.5 h斷頭取海馬。A組、B組采用窒息法致大鼠心臟驟停和心肺復蘇模型。光學顯微鏡下觀察海馬病理變化。結果 光鏡下，S組海馬神經元表現為細胞形態、分布正常，幾乎無變性、壞死神經元；與S組比較，A組、B組海馬神經元可見明顯的細胞水腫、核固縮等病理改變，且B組比A組損傷更為嚴重。結論 延遲心肺復蘇不僅降低心臟驟停大鼠ROSC成功率，亦可加重海馬組織病理損傷。

[關鍵詞] 心肺復蘇；腦損傷；自主循環恢復

[中圖分類號] R459.7 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2014）04（a）-0022-02

雖然心臟驟停后心肺復蘇研究不斷深入[1]，自主循環恢復（restoration of spontaneous circulation，ROSC）后腦功能的預后仍是難點問題[2]，心臟驟停患者很難在第一時間得到救治，血流中斷時間延長致使腦組織損傷加重。為更好接近臨床并且保證大鼠心臟驟停模型成功率，本實驗重點探討心臟驟停后延遲3 min CPR 對大鼠病理損傷的影響。

1 材料與方法

1.1 動物、試劑、儀器

健康SD雄性大鼠54只，體重350-450g；MP50多參數監護儀（德國飛利浦）；HX-200S動物呼吸機（成都泰盟科技有限公司）。

1.2 實驗方法

1.2.1 分組 隨機數字表法將大鼠分為假手術組（S組，n=18）；即刻復蘇組（A組，n=18）：窒息5±1 min后，常規復蘇；延遲復蘇組（B組，n=18）：窒息8±1 min（心臟驟停后3 min）后常規復蘇。

1.2.2 模型制作 本實驗參考有關文獻并加以改進[3]。大鼠稱重，3%戊巴比妥鈉（35 mg/kg）腹腔注射麻醉，仰臥固定。正中切口，暴露氣管，行氣管插管。剝離右側股動脈，左側股靜脈，24G套管針向近心端穿刺置管后固定。連接壓力換能器。連接心電肢體導聯，至監護儀正常顯示股動脈平均動脈壓、心電圖。傷口處敷蘸生理鹽水紗布。穩定10 min后，呼氣末氣管夾閉誘導窒息致心臟驟停（CA）后，進行CPR：開放氣道，接小動物呼吸機（呼吸頻率80 次/min，潮氣量6 ml/kg），同時經股靜脈推注腎上腺素20 μg/kg。

1.2.3 CA標準 心電圖呈室顫、停搏或電機械分離，股動脈平均動脈壓<25 mmHg[4]；動物皮膚粘膜明顯發紺。

1.2.4 ROSC標準 心電圖呈自主節律，股動脈平均動脈壓≥60 mmHg[4]，持續時間超過10 min；動物皮膚粘膜發紺明顯減輕。

1.2.5 標本留取 S組按血管穿刺后0.5 h斷頭取腦；A組、B組按ROSC后0.5 h斷頭取腦。

1.2.6 檢測方法 低溫冰臺上斷頭剝離海馬后，于4%多聚甲醛中固定至少24 h。脫水、透明、浸蠟及包埋，海馬組織5 um厚切片，HE（Hematein Eosin）染色。

1.2.7 統計學方法 數據采用SPSS17.0統計軟件分析。組間ROSC成功率比較用χ2檢驗，P<0.05有統計學差異。

2 結果

2.1 ROSC成功率

S組成功率100%，A組成功率88.9%，B組成功率50%；B組與A組比較，ROSC成功率明顯下降（P<0.05）。

2.2 各組大鼠海馬組織病理觀察

S組：海馬神經元表現為細胞形態、分布、間隙正常，幾乎無變性、壞死神經元（圖1）；A組：海馬神經元有部分變性、壞死，病理損傷較重（圖2）；B組：海馬神經元細胞出現明顯的胞核凝固、深染，胞漿溶解，存在較多壞死神經元，病理損傷比A組更重（圖3）。

3 討論

學者們[5]對心肺復蘇ROSC患者預后相關因素進行分析，薛繼可[6]對725例CPR患者進行分析，發現CPR開始時間≤5 min的460例患者ROSC為140例（30.4%），CPR開始時間>5 min的265例患者ROSC僅為47例（17.7%）。廖紅[7]采用窒息法制作CA大鼠模型，在20只大鼠CA后即刻進行復蘇，復蘇成功率約為70%，本實驗中，A組即刻復蘇的復蘇成功率為88.9%，可能由于實驗條件、生理鹽水以及腎上腺素的使用不同，導致實驗中的復蘇成功率存在一定差異。本實驗B組大鼠復蘇成功率為50%，與A組比較復蘇成功率明顯降低（P<0.05），這再次證明了心臟驟停持續時間是決定ROSC的關鍵因素之一，臨床上只有真正縮短開始心肺復蘇的時間，才有可能根本上改善復蘇的預后。

大腦細胞尤其是海馬等組織在ROSC早期仍處于相對低灌注或再灌注損傷階段，此期大鼠海馬組織已經發生了明顯的病理變化。觀察病理形態學改變， B組大鼠海馬病理損傷較A組更為嚴重，其機制可能與缺血時間延長、缺血-再灌注損傷加重、鈣超載、興奮性氨基酸釋放增多等有關。

該實驗表明延遲復蘇不僅能降低ROSC成功率，還能加重海馬組織病理損傷，因此，臨床上應爭分奪秒地對CA患者實施CPR，盡快使腦組織恢復血供，真正改善ROSC患者的預后。

[參考文獻]

[1] Havel C， Schreiber W， Trimmel H. Quality of closed chest compression on a manikin in ambulance vehicles and flying helicopters with a real time automated feedback[J]. resuscitation， 2010， 81（1）：59-64.

[2] Nichol G， Aufderheide TP， Eigel B， et al. Regional systems of care for out-of-hospital cardiac arrest：A policy statement from the American Heart Association[J]. Circulation， 2010， 121（5）：709–729.

[3] 馬宇潔，楊興易，林兆奮等，心肺復蘇后大鼠血清神經元特異性烯醇化酶、S100B蛋白對腦損傷診斷的價值[J].中華急診醫學雜志，2006，15（4）：335-337.

[4] Idris AH，Becker LB，Ornato JP，et al. Utstein-style guidelines for uniform reporting of laboratory CPR research [J]. Circulation，1996，94（9）：2324-2336.

[5] 丁旻珺，謝娟.心肺復蘇自主循環恢復患者預后相關因素分析[J].實用醫學雜志，2012，28（23）：3956-3959.

[6] 薛繼可，冷巧云，高玉芝等.急診科心搏驟停患者心肺復蘇預后的影響因素[J].中華急診醫學雜志，2013，22（1）：28-34.

[7] 廖紅，倪新莉，井蕊等.肝素對心肺復蘇大鼠腦損傷的影響[J].寧夏醫學雜志，2010，32（10）：873-874.

（收稿日期：2013-12-28）