氟尼辛葡甲胺注射液對靶動物犬的安全性研究

馮秀娟　李忠生

摘要：本研究評價了氟尼辛葡甲胺注射液對靶動物犬的安全性，為其臨床應用劑量選擇提供科學依據。選用24只健康史賓格犬隨機分成4組，試驗組分別按氟尼辛葡甲胺注射液臨床推薦劑量的1倍（2 mg/kg）、3倍（6 mg/kg）、5倍（10 mg/kg）肌內注射給藥，空白對照組肌內注射給予注射用水，連續給藥5 d。給藥后觀察臨床癥狀，并于不同時間點（給藥前、給藥中、給藥后）采集血液進行血常規以及血液生化指標測定。試驗結束后尸體剖檢并進行病理組織學檢查。結果顯示：在整個試驗過程中，試驗犬只精神正常，無死亡，無其他不良反應。各試驗組部分血常規及血生化指標值在給藥前后存在一定的顯著性差異，但基本上都在參考值范圍內波動。尸體剖檢無明顯眼觀病理變化，病理組織學檢查結果顯示高劑量組與對照組臟器組織（肝、心、脾、肺、腎）均無異常，無明顯病理變化。以上結果表明，氟尼甲葡辛胺注射液在2～10 mg/kg對犬的血液生理及生化指標影響小，無毒性反應，臨床應用安全。

關鍵詞：氟尼辛葡甲胺；注射液；犬；靶動物；安全性

中圖分類號： S859.83文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2014）09-0185-04

收稿日期：2013-12-13

作者簡介：馮秀娟（1978—），女，博士，助理研究員，從事新獸藥產品開發工作。E-mail：kingdunfxj@126.com。氟尼辛葡甲胺（flunixin meglumine，FM），系氟胺煙酸的葡甲胺鹽，為動物專用的非甾體類解熱鎮痛抗炎藥（NSAIDs），其作用機制在于通過抑制花生四烯酸反應鏈中的環氧化酶，減少前列腺素和血栓烷等炎性介質生成，有效緩解機體的發熱、炎癥和疼痛[1]。起效迅速，一般在15 min內可減輕疼痛，效力比鎮痛新、哌替啶、可待因更高。參照《寵物用藥物對靶動物安全性試驗指導原則》[2]，結合實際情況進行本試驗，考察了肌內注射氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性試驗，為其臨床安全應用提供劑量選擇依據。

1材料與方法

1.1試驗藥品

氟尼辛葡甲胺注射液，規格2 mL ∶0.01 g，批號20121211，由南京金盾動物藥業有限責任公司提供。

1.2試驗動物

健康史賓格犬24只，體重8～10 kg，雌雄均有，由江蘇省南京市西崗安德圣犬業有限公司提供。試驗前適應性飼養1周，自由飲水，采樣期間正常飼養管理。

1.3儀器設備

全自動動物血細胞分析儀：XFA6130型，南京普朗醫用設備有限公司。全自動生化分析儀：BS-300，深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司。組織切片機：德國Leica公司生產。光學顯微鏡（BH-2），日本Olympus公司生產。

1.4試驗方法

1.4.1試驗動物分組及給藥24只健康犬稱重后編號，隨機分為4組，每組6只。試驗組分別按氟尼辛葡甲胺注射液臨床推薦劑量的1倍（2 mg/kg）、3倍（6 mg/kg）、5倍（10 mg/kg）肌內注射給藥，空白對照組按0.4 mL/kg肌內注射生理鹽水[3]。各組每天給藥1次，連續給藥5 d。

1.4.2樣品采集與處理各組動物分別在第1次給藥前（0 d）、給藥中（3 d）、最后一次給藥后的第2天（6 d）的同一時間采血，每次分別采集1 mL的抗凝血（用枸櫞酸鈉抗凝）和4 mL的非抗凝血。抗凝血用于血常規檢查。非抗凝血樣品先置于4 ℃冰箱中靜置1 h，37 ℃水浴30 min，4 000 r/min離心10 min，取上層血清用于血液生化指標測定。

1.5觀察指標

1.5.1臨床觀察觀察動物是否有與藥物相關的不良反應，如行為異常、呼吸異常、精神抑制及排糞異常等變化情況。

1.5.2血常規指標檢查按“1.4.2”節方法采集抗凝血，進行血常規指標檢查，檢查指標主要有：血紅蛋白（HGB）、紅細胞計數（RBC）、白細胞計數（WBC）、血小板計數（PLT）和紅細胞壓積（HCT）等。

1.5.3血液生化指標檢查按“1.4.2”節方法制備血清，進行血液生化指標測定，檢查指標主要有：總膽固醇（TCHO）、血糖（GLU）、肌酐（CRE）、總膽紅素（TBILI）、谷氨酸氨基轉移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）；血清總蛋白（TP）、血清白蛋白（ALB）、血清尿素氮（UN）；血清鈣（Ca）、無機磷（P）等。

1.5.4尸體剖檢最高劑量組和對照組全部剖殺，進行系統解剖學檢查。

1.5.5組織病理學檢查試驗結束時對高劑量組及尸檢異常的尸體進行系統的組織病理學檢查，需要檢查的器官有：肝、脾、肺、腎、心。

1.6數據統計分析

數值用x±s表示，用EXCEL進行統計分析，采用雙側檢驗，各組組內給藥前后比較采用配對t檢驗。

2結果與分析

2.1臨床觀察

試驗期間觀察發現：氟尼辛葡甲胺注射液高、中劑量組犬在給藥時表現出明顯的疼痛反應，有反抗動作，給藥部位出現輕微的腫脹。低劑量組和空白對照組犬也呈現一定的疼痛反應。給藥結束后，各試驗組犬精神活躍，食欲及活動正常，呼吸平穩，排尿及排糞正常，整個試驗過程中無犬死亡。

2.2血常規指標檢測結果

統計數據結果（表1）顯示：各劑量組WBC、HGB、HCT指標值與給藥前相比有一定的變化，其中高、中劑量組的HGB在給藥后要顯著低于給藥前（P<0.05），但處于參考值范圍內。其他各組各指標給藥前后相比差異均不顯著（P>005）。此結果表明，氟尼辛葡甲胺注射液在2～10 mg/kg的范圍內對犬的血常規指標影響較小。

2.3血液生化指標檢測結果

統計數據結果（表2）顯示：高、中劑量給藥后的ALT、AST及CRE水平顯著高于給藥前（P<0.05）。試驗組其他生化指標值在給藥后都發生了一定的變化，但都在可查閱的參考值范圍內波動。此結果表明，氟尼辛葡甲胺注射液在2～10 mg/kg的范圍內對犬的血液生化指標影響較小。endprint

2.4尸體剖檢及病理組織學檢查結果

對照組及高劑量組犬大體解剖均無眼觀可見病理變化。主要臟器（肝、心、脾、肺、腎）的病理組織學切片見圖1至圖10。高劑量組與對照組相比無差異，均未見異常病理變化。

3討論與分析

本試驗參考農業部公告第1425號及《VICH獸藥靶動物安全性研究指導原則概述》[3]，研究了肌內注射給予氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性，旨在為其臨床安全應用提供科學依據。

3.1臨床表現

本試驗按1倍、3倍、5倍臨床推薦劑量肌內注射給藥，1次/d，連續給藥5 d，觀察給藥后犬的不適反應。結果顯示，整個給藥期內，試驗犬并未表現出不適與毒性反應癥狀，僅見給藥時犬表現出疼痛感，高、中劑量組給藥部位出現輕微的腫脹，其他如精神、食欲、飲水、排糞、活動等各方面均無異常。

3.2對血常規指標的影響

血常規指標的波動能反映血液系統本身的生理、病理變化，以及機體各個部分臟器的病理變化，對犬、貓等臨床疾病的輔助診斷具有很好的指導作用。本試驗通過測定給藥期間不同時間的血常規各指標，觀察給藥后對犬血常規指標的影響。結果顯示：給藥前后各試驗組某些指標值略有變化，但基本在參考值范圍內波動。結果表明，氟尼辛葡甲胺注射液在2～10 mg/kg范圍內對犬的血常規指標影響小。

3.3對血生化指標的影響

獸醫臨床上常對犬、貓等血液生化指標如總蛋白、白蛋白、膽紅素、轉氨酶、尿素、肌酐等進行監測，用以監測動物肝腎功能的變化。本試驗通過測定給藥前后血液生化指標來評價肌內注射氟尼辛葡甲胺對試驗犬肝腎功能的影響。結果顯示：部分指標給藥前后存在顯著性差異，但基本上都在正常參考值范圍內波動，該結果提示氟尼辛葡甲胺對肝腎功能無影響。

3.4對靶動物臟器的影響

本試驗考察了氟尼辛葡甲胺對犬臟器的影響。結果顯示：各劑量組大體解剖均無明顯眼觀病理變化。高劑量組及對照組病理組織學檢查無差異，均無異常病理變化。

綜上所述，肌內注射氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性研究結果表明，氟尼辛葡甲胺在2～10 mg/kg對犬的血液生

理及生化指標影響較小，未見臨床異常表現及毒性反應，臨床應用安全。

參考文獻：

[1]吳文學，王中杰，李金祥. 新獸藥氟尼辛葡甲胺的研究[J]. 中國獸醫雜志，2006，42（1）：51-53.

[2]中華人民共和國農業部公告第1425號.寵物用藥物靶動物安全性試驗技術指導原則[Z]. 2010：7.

[3]蕭惠來. VICH獸藥靶動物安全性研究指導原則概述[J]. 中國獸藥雜志，2009，43（12）：33-37.

[4]周偉偉，陳未，賀生中. 犬子宮蓄膿對其血液生理及生化指標的影響研究[J]. 現代農業科技，2009（12）：216，227.

[5]張華，侯紹華. 血常規檢查在犬貓疾病診斷中的應用[J]. 中國動物檢疫，2009，26（3）：55-56.

[6]徐叔云. 藥理實驗方法學[M]. 3版.北京：人民衛生出版社，2002.

[7]齊云，蔡潤蘭，劉彬，等. 新藥長毒試驗動物血液生化測定規范化研究系列之七——Beagle犬血液生化參考值的建立[J]. 中國比較醫學雜志，2006，16（4）：201-203，207.張保平，李娜，高惠林，等. 豪豬致病性大腸桿菌的分離鑒定與藥敏試驗[J]. 江蘇農業科學，2014，42（9）：189-190.endprint

2.4尸體剖檢及病理組織學檢查結果

對照組及高劑量組犬大體解剖均無眼觀可見病理變化。主要臟器（肝、心、脾、肺、腎）的病理組織學切片見圖1至圖10。高劑量組與對照組相比無差異，均未見異常病理變化。

3討論與分析

本試驗參考農業部公告第1425號及《VICH獸藥靶動物安全性研究指導原則概述》[3]，研究了肌內注射給予氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性，旨在為其臨床安全應用提供科學依據。

3.1臨床表現

本試驗按1倍、3倍、5倍臨床推薦劑量肌內注射給藥，1次/d，連續給藥5 d，觀察給藥后犬的不適反應。結果顯示，整個給藥期內，試驗犬并未表現出不適與毒性反應癥狀，僅見給藥時犬表現出疼痛感，高、中劑量組給藥部位出現輕微的腫脹，其他如精神、食欲、飲水、排糞、活動等各方面均無異常。

3.2對血常規指標的影響

血常規指標的波動能反映血液系統本身的生理、病理變化，以及機體各個部分臟器的病理變化，對犬、貓等臨床疾病的輔助診斷具有很好的指導作用。本試驗通過測定給藥期間不同時間的血常規各指標，觀察給藥后對犬血常規指標的影響。結果顯示：給藥前后各試驗組某些指標值略有變化，但基本在參考值范圍內波動。結果表明，氟尼辛葡甲胺注射液在2～10 mg/kg范圍內對犬的血常規指標影響小。

3.3對血生化指標的影響

獸醫臨床上常對犬、貓等血液生化指標如總蛋白、白蛋白、膽紅素、轉氨酶、尿素、肌酐等進行監測，用以監測動物肝腎功能的變化。本試驗通過測定給藥前后血液生化指標來評價肌內注射氟尼辛葡甲胺對試驗犬肝腎功能的影響。結果顯示：部分指標給藥前后存在顯著性差異，但基本上都在正常參考值范圍內波動，該結果提示氟尼辛葡甲胺對肝腎功能無影響。

3.4對靶動物臟器的影響

本試驗考察了氟尼辛葡甲胺對犬臟器的影響。結果顯示：各劑量組大體解剖均無明顯眼觀病理變化。高劑量組及對照組病理組織學檢查無差異，均無異常病理變化。

綜上所述，肌內注射氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性研究結果表明，氟尼辛葡甲胺在2～10 mg/kg對犬的血液生

理及生化指標影響較小，未見臨床異常表現及毒性反應，臨床應用安全。

參考文獻：

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2.4尸體剖檢及病理組織學檢查結果

對照組及高劑量組犬大體解剖均無眼觀可見病理變化。主要臟器（肝、心、脾、肺、腎）的病理組織學切片見圖1至圖10。高劑量組與對照組相比無差異，均未見異常病理變化。

3討論與分析

本試驗參考農業部公告第1425號及《VICH獸藥靶動物安全性研究指導原則概述》[3]，研究了肌內注射給予氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性，旨在為其臨床安全應用提供科學依據。

3.1臨床表現

本試驗按1倍、3倍、5倍臨床推薦劑量肌內注射給藥，1次/d，連續給藥5 d，觀察給藥后犬的不適反應。結果顯示，整個給藥期內，試驗犬并未表現出不適與毒性反應癥狀，僅見給藥時犬表現出疼痛感，高、中劑量組給藥部位出現輕微的腫脹，其他如精神、食欲、飲水、排糞、活動等各方面均無異常。

3.2對血常規指標的影響

血常規指標的波動能反映血液系統本身的生理、病理變化，以及機體各個部分臟器的病理變化，對犬、貓等臨床疾病的輔助診斷具有很好的指導作用。本試驗通過測定給藥期間不同時間的血常規各指標，觀察給藥后對犬血常規指標的影響。結果顯示：給藥前后各試驗組某些指標值略有變化，但基本在參考值范圍內波動。結果表明，氟尼辛葡甲胺注射液在2～10 mg/kg范圍內對犬的血常規指標影響小。

3.3對血生化指標的影響

獸醫臨床上常對犬、貓等血液生化指標如總蛋白、白蛋白、膽紅素、轉氨酶、尿素、肌酐等進行監測，用以監測動物肝腎功能的變化。本試驗通過測定給藥前后血液生化指標來評價肌內注射氟尼辛葡甲胺對試驗犬肝腎功能的影響。結果顯示：部分指標給藥前后存在顯著性差異，但基本上都在正常參考值范圍內波動，該結果提示氟尼辛葡甲胺對肝腎功能無影響。

3.4對靶動物臟器的影響

本試驗考察了氟尼辛葡甲胺對犬臟器的影響。結果顯示：各劑量組大體解剖均無明顯眼觀病理變化。高劑量組及對照組病理組織學檢查無差異，均無異常病理變化。

綜上所述，肌內注射氟尼辛葡甲胺對靶動物犬的安全性研究結果表明，氟尼辛葡甲胺在2～10 mg/kg對犬的血液生

理及生化指標影響較小，未見臨床異常表現及毒性反應，臨床應用安全。

參考文獻：

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[7]齊云，蔡潤蘭，劉彬，等. 新藥長毒試驗動物血液生化測定規范化研究系列之七——Beagle犬血液生化參考值的建立[J]. 中國比較醫學雜志，2006，16（4）：201-203，207.張保平，李娜，高惠林，等. 豪豬致病性大腸桿菌的分離鑒定與藥敏試驗[J]. 江蘇農業科學，2014，42（9）：189-190.endprint