真菌性角膜炎臨床實驗室快速診斷方法的探討

于瑞

真菌性角膜炎是由真菌感染引起具有很高致盲率的感染性角膜病變, 近年來, 其發病率呈不斷升高趨勢。目前角膜刮片鏡檢和真菌培養是臨床常用的檢測方法, 但角膜刮片鏡檢靈敏度和特異性均較低, 真菌培養是臨床診斷的“金標準”,但耗時較長, 不利于患者的早期診斷, 患者常因確診延誤影響臨床治療［1］。因此選擇快速、簡便、有效的診斷方法以確定病因對指導臨床治療具有重要的意義。自2010年5月以來,本院對送檢疑似真菌性角膜炎患者的角膜刮片標本分別采用熒光染色法、真菌培養和墨汁-KOH濕片鏡檢三種方法檢測,并對結果進行比較和分析, 現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年5月～2013年9月本院臨床送檢疑似真菌性角膜炎患者的角膜刮片標本60例為研究對象,其中男31例, 女29例, 年齡23～56歲。

1.2 檢測方法 患者眼部采用愛爾卡因表面麻醉, 無菌棉拭棒擦去表面壞死組織, 用無菌手術刀片刮取角膜潰瘍周邊和基底部, 取樣標本送本院實驗室檢測。墨汁-KOH濕片法：挑取送檢的角膜潰瘍組織于載玻片上涂片, 滴加10%KOH和墨汁混合液(按9:1比例混合)1滴, 蓋上蓋玻片后鏡檢；熒光染色法：取角膜潰瘍組織于載玻片上, 滴加熒光染色液1滴, 蓋上蓋玻片后鏡檢；真菌培養：將角膜潰瘍組織接種于沙氏培養基中, 25℃培養2周, 觀察培養結果、鑒定菌種并進行藥敏試驗。

1.3 統計學方法 采用SPSS17.0軟件進行數據處理, 計數資料用率(%)表示, 陽性率的比較采用χ2檢驗, P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

60例臨床送檢疑似真菌性角膜炎患者的角膜刮片標本中, 真菌培養陽性45例, 陽性率為75.00%。以真菌培養結果為標準, 45例真菌培養陽性標本中墨汁-KOH濕片法28例陽性, 陽性率為62.22%, 熒光染色法40例陽性, 陽性率為88.89%, 墨汁-KOH濕片法和熒光染色法檢測結果比較差異有統計學意義(P<0.05), 詳見表1。

表1 兩種染色方法鏡檢結果比較(n, %)

3 討論

真菌性角膜炎是由曲霉菌、鐮刀菌等致病性真菌引起的感染性眼部疾病, 患者常伴有視力減退、角膜潰瘍等癥狀。近年來, 由于糖皮質激素、廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑的濫用及角膜接觸鏡的使用不當等, 導致角膜真菌感染的發病率呈明顯上升趨勢。真菌性角膜炎發病具有進展快、癥狀隱匿、不易診斷等特點, 常造成臨床的漏診和誤診, 加之一些抗真菌藥物對眼部疾病的療效有限, 如治療不及時, 可導致角膜混濁、潰瘍甚至穿孔, 嚴重影響患者的工作和生活質量［2］。因此早期診斷和治療是患者獲得良好療效的關鍵。

真菌培養和KOH濕片法是真菌傳統的實驗室檢查方法,但真菌培養過程復雜, 培養時間需1～2周, 檢測結果往往具有一定的滯后性, 不能做到快速診斷, 因而影響患者的臨床治療［3］。本文作者采用的墨汁-KOH濕片法, 雖然具有診斷快、操作簡便及鏡下對比度強等優勢, 但其檢測結果符合率偏低, 存在一定的假陽性結果, 易造成臨床的誤診和漏診而直接影響患者的治療。本文結果顯示, 在60例臨床送檢的疑似標本中, 經真菌培養后有45例陽性, 表明臨床僅從外傷史和臨床癥狀判斷患者真菌感染有一定的誤診率, 此外, 部分病例在進行真菌培養前已經應用抗真菌藥物治療也是導致患者真菌培養結果陰性的原因。在45例真菌培養陽性的標本中,墨汁-KOH濕片法檢測28例為陽性, 陽性率為62.22%, 熒光染色法40例為陽性, 陽性率為88.89%, 兩種檢測方法陽性率比較差異有統計學意義, 表明熒光染色法的檢測結果符合率明顯優于墨汁-KOH濕片法, 并且在臨床常用的真菌檢測方法中熒光染色法的費用相對較低, 可以做到對眼部真菌病變的早期、快速診斷。

綜上所述, 作者認為熒光染色法具有操作簡便、快速及陽性符合率較高等優勢, 可作為眼部真菌感染臨床實驗室早期診斷的首選方法。

［1］魏文利,張蕊石,周向京.聯合試驗在真菌性角膜炎診斷中的應用.實用醫學雜志, 2011,27(1):113-114.

［2］穆紅梅,皮百木,李家臣,等.真菌性角膜炎的流行病學、臨床和微生物特征分析.眼科新進展, 2013,33(9):879-880.

［3］王連喜,劉宏巨.真菌性角膜炎的實驗室常規檢測方法.檢驗醫學與臨床, 2012,9(5):638-639.