CA7000血凝儀試劑盤上試劑使用時間對測定結果的影響

李章勇+羅迪賢+林應標+顏復生

[摘要] 目的 探討CA7000血凝儀試劑盤上試劑使用時間對測定結果的影響。 方法 將試劑放置CA7000血凝儀試劑盤上，之后在不同時間點（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）對同一混合血漿進行凝血酶原時間（PT）、部分活化的凝血活酶時間（APTT）、凝血酶時間（TT）、纖維蛋白原（FIB）測定。 結果 測定結果顯示試劑放置試劑盤后8 h時的TT結果、12 h時的APTT結果、18 h時的FIB結果、36 h時的PT結果分別與0 h時的結果比較，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 在日常工作中，CA7000血凝儀試劑盤上放置試劑的穩定時間不同，根據不同穩定時間配置相應的試劑用量，避免剩余試劑失效而造成浪費。

[關鍵詞] CA7000血凝儀；凝血四項；穩定時間

[中圖分類號] R446.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）28-0054-03

隨著醫學科學技術的發展，各種全自動凝血儀和商品化試劑盒已廣泛應用于臨床實驗室。在日常工作中，我們發現同一標本不同時間段測定結果差異較大[1]。經分析可知，引起結果差異較大的因素較多，包括標本的處理與保存、儀器的狀態、試劑的溶解與保存以及試劑的使用時間等[2，3]。其中，試劑開蓋后的使用時間是影響檢驗結果的重要因素之一。為了保證測定結果的準確性，分析希森美康CA7000全自動凝血儀試劑盤上凝血試劑使用時間對測定凝血四項（PT、APTT、TT、FIB）結果的影響，我們對其進行探討，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 CA7000 全自動血凝儀，由日本Sysmex 公司生產。

1.1.2 試劑 PT試劑批號1008655；APTT試劑批號1006171；TT試劑批號1009181；FIB試劑批號1006081；以上試劑由上海長島生物技術有限公司提供。配套質控血漿由Sysmex 公司提供。

1.1.3 標本篩選正常血漿標本（排出藥物、肝素、DIC及有相關疾病的標本，且避免溶血、脂血、黃疸），然后從每份標本中吸取血漿混勻，制作混合血漿，分裝8份后于-20℃凍存[4]（確保血漿成分穩定，每份不少于5 mL[5]）。

1.2 方法

試劑及質控血漿按要求復溶，再把試劑放置儀器試劑倉中，做好保養和質控，保證儀器處于最佳狀態，每次檢測前先按要求復溶一份凍存標本待檢。在擬訂的不同時間點（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）進行凝血四項檢測，記錄測定結果。每一時間點測定一份標本，重復測定8次，結果以（x±s）表示。

1.3 統計學方法

采用SPSS 16.0統計學軟件進行數據處理，不同時點重復計量資料采用方差分析，每一時間點測定結果與0 h的結果進行配對t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

試劑放置CA7000試劑盤上不同時間段（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）結果比較，見表1。

3 討論

凝血四項為臨床常用的指標，用于術前篩查、出血疾病的診斷、抗凝藥物使用的檢測以及妊娠婦女分娩風險監測[6]等，人體的止血功能很關鍵，每當在人體受到意外情況受傷而流血時，止血功能就起到了非常關鍵的作用，使得血液能夠凝固從而及時堵住傷口使其不再繼續流血，減少了血量的過度流失[7]。如果患者的止血功能有欠缺，并且沒有能夠得到及時有效處理，就可能造成患者的生命危險。

凝血試驗所用試劑是根據不同反應而加入不同的凝血因子，均為生物制劑，容易受環境因素影響而降低其生物活性，甚至因失去活性而喪失引起凝血反應的能力[8]。影響凝血四項測定結果的因素很多，包括：儀器的精密度和重復性，試劑盒的配置和保存，樣本的采集、處理、保存與分離，藥物的干擾等[9]。相關研究也比較多，如標本放置溫度[10，11]、試劑預熱時間[12，13]等研究。但關于開蓋后試劑使用一段時間而影響穩定性方面的研究比較少。在日常工作中，我們發現同一定值標本不同時間段測定結果差異較大。雖然試劑說明書中有試劑復溶后的密閉保存穩定時間，但沒用試劑敞開使用的穩定時間，且各實驗室的溫濕度和使用方式不盡相同，試劑開蓋后的穩定時間也會不同[14]。

本文通過對CA7000血凝儀試劑盤上試劑敞開使用的穩定時間進行研究，從表1可以看出，凝血試劑敞開使用8 h時的TT結果、12 h時的APTT結果、18 h時的FIB結果、36 h時的PT結果分別與0 h時的結果比較有顯著性差異（P<0.05）。結果表明，由于環境溫度、濕度的影響，試劑在CA7000試劑盤上敞開使用的穩定時間是不同的，PT、APTT、TT、FIB的穩定時間分別是36 h、18 h、12 h、24 h，超過穩定時間的試劑不能使用，否則誤導臨床。

通過本次實驗，我們可以確定本室凝血試劑開蓋后使用的穩定時間，超過穩定時間時應更換新鮮試劑，保證檢驗結果準確可靠。同時，使用凝血試劑時要根據本室每天工作量選擇試劑包裝量大小，適量配制，既保證質量，又避免試劑剩余浪費。

[參考文獻]

[1] 孫磊. 討論凝血四項標本放置時間和溫度對測定結果的影響[J]. 中國醫藥指南，2013，10（11）：267-268.

[2] 諸越瑾，張梅，聶渝瓊. 凝血實驗檢測的影響因素探討[J].中國衛生檢驗雜志，2013，23（4）：903-904.

[3] 張志源. 凝血功能檢測影響因素的觀察[J]. 檢驗醫學與臨床，2012，19（8）：427-428.

[4] 戴慶忠，覃瑜. 影響凝血四項檢測的因素分析[J]. 國際檢驗醫學雜志，2013，34（17）：2349-2350.

[5] 楊繼明，張愛華，肖中華，等. 標本采集量對凝血項目檢測結果的影響[J]. 實驗與檢驗醫學，2011，15（1）：736-737.

[6] 楊海英，韓桂玲. 妊娠中晚期婦女凝血四項的監測與分析[J]. 山西醫藥雜志，2012，41（10）：1049-1050.

[7] 趙晶，葛存興，張鳳俠. 孕婦臨產前（38周后）凝血四項檢查結果及分析[J]. 中國實用醫藥，2010，5（3）：82.

[8] 張永愛，付林金. 凝血試驗的室內質量控制[J]. 實驗與檢驗醫學，2011，32（2）：148-149.

[9] 馬海玲，劉方鶴，等. 凝血四項檢測應注意的問題[J]. 黑龍江醫藥，2012，25（2）：309-310.

[10] 申衛和，黃倩. 凝血四項標本室溫條件下不同時間檢測對結果的影響[J]. 海南醫學，2012，23（4）：87-88.

[11] 李濟凱，吳建平，徐根云. 標本放置溫度及時間對PT、APTT檢測結果的影響[J]. 浙江檢驗醫學，2009，9（7）：22-24.

[12] Mischke R，Junker J，Deegen E. Sensitivity of commercial prothrombin time reagents to detect coagulation factor deficiencies in equine plasma[J]. The Veterinary Journal，2006，171（1）：69-70.

[13] 王潤琴，李美英，楊海青. 25℃室溫下不同保存時間對凝血功能的影響[J]. 山西職工醫學院學報，2011，21（1）：13-14.

[14] 劉志鋒，張耀輝，李雯麗. 標本離心時間對凝血四項檢測結果的影響[J]. 檢驗醫學與臨床，2013，10（12）：1535-1536.

（收稿日期：2014-05-16）endprint

[摘要] 目的 探討CA7000血凝儀試劑盤上試劑使用時間對測定結果的影響。 方法 將試劑放置CA7000血凝儀試劑盤上，之后在不同時間點（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）對同一混合血漿進行凝血酶原時間（PT）、部分活化的凝血活酶時間（APTT）、凝血酶時間（TT）、纖維蛋白原（FIB）測定。 結果 測定結果顯示試劑放置試劑盤后8 h時的TT結果、12 h時的APTT結果、18 h時的FIB結果、36 h時的PT結果分別與0 h時的結果比較，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 在日常工作中，CA7000血凝儀試劑盤上放置試劑的穩定時間不同，根據不同穩定時間配置相應的試劑用量，避免剩余試劑失效而造成浪費。

[關鍵詞] CA7000血凝儀；凝血四項；穩定時間

[中圖分類號] R446.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）28-0054-03

隨著醫學科學技術的發展，各種全自動凝血儀和商品化試劑盒已廣泛應用于臨床實驗室。在日常工作中，我們發現同一標本不同時間段測定結果差異較大[1]。經分析可知，引起結果差異較大的因素較多，包括標本的處理與保存、儀器的狀態、試劑的溶解與保存以及試劑的使用時間等[2，3]。其中，試劑開蓋后的使用時間是影響檢驗結果的重要因素之一。為了保證測定結果的準確性，分析希森美康CA7000全自動凝血儀試劑盤上凝血試劑使用時間對測定凝血四項（PT、APTT、TT、FIB）結果的影響，我們對其進行探討，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 CA7000 全自動血凝儀，由日本Sysmex 公司生產。

1.1.2 試劑 PT試劑批號1008655；APTT試劑批號1006171；TT試劑批號1009181；FIB試劑批號1006081；以上試劑由上海長島生物技術有限公司提供。配套質控血漿由Sysmex 公司提供。

1.1.3 標本篩選正常血漿標本（排出藥物、肝素、DIC及有相關疾病的標本，且避免溶血、脂血、黃疸），然后從每份標本中吸取血漿混勻，制作混合血漿，分裝8份后于-20℃凍存[4]（確保血漿成分穩定，每份不少于5 mL[5]）。

1.2 方法

試劑及質控血漿按要求復溶，再把試劑放置儀器試劑倉中，做好保養和質控，保證儀器處于最佳狀態，每次檢測前先按要求復溶一份凍存標本待檢。在擬訂的不同時間點（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）進行凝血四項檢測，記錄測定結果。每一時間點測定一份標本，重復測定8次，結果以（x±s）表示。

1.3 統計學方法

采用SPSS 16.0統計學軟件進行數據處理，不同時點重復計量資料采用方差分析，每一時間點測定結果與0 h的結果進行配對t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

試劑放置CA7000試劑盤上不同時間段（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）結果比較，見表1。

3 討論

凝血四項為臨床常用的指標，用于術前篩查、出血疾病的診斷、抗凝藥物使用的檢測以及妊娠婦女分娩風險監測[6]等，人體的止血功能很關鍵，每當在人體受到意外情況受傷而流血時，止血功能就起到了非常關鍵的作用，使得血液能夠凝固從而及時堵住傷口使其不再繼續流血，減少了血量的過度流失[7]。如果患者的止血功能有欠缺，并且沒有能夠得到及時有效處理，就可能造成患者的生命危險。

凝血試驗所用試劑是根據不同反應而加入不同的凝血因子，均為生物制劑，容易受環境因素影響而降低其生物活性，甚至因失去活性而喪失引起凝血反應的能力[8]。影響凝血四項測定結果的因素很多，包括：儀器的精密度和重復性，試劑盒的配置和保存，樣本的采集、處理、保存與分離，藥物的干擾等[9]。相關研究也比較多，如標本放置溫度[10，11]、試劑預熱時間[12，13]等研究。但關于開蓋后試劑使用一段時間而影響穩定性方面的研究比較少。在日常工作中，我們發現同一定值標本不同時間段測定結果差異較大。雖然試劑說明書中有試劑復溶后的密閉保存穩定時間，但沒用試劑敞開使用的穩定時間，且各實驗室的溫濕度和使用方式不盡相同，試劑開蓋后的穩定時間也會不同[14]。

本文通過對CA7000血凝儀試劑盤上試劑敞開使用的穩定時間進行研究，從表1可以看出，凝血試劑敞開使用8 h時的TT結果、12 h時的APTT結果、18 h時的FIB結果、36 h時的PT結果分別與0 h時的結果比較有顯著性差異（P<0.05）。結果表明，由于環境溫度、濕度的影響，試劑在CA7000試劑盤上敞開使用的穩定時間是不同的，PT、APTT、TT、FIB的穩定時間分別是36 h、18 h、12 h、24 h，超過穩定時間的試劑不能使用，否則誤導臨床。

通過本次實驗，我們可以確定本室凝血試劑開蓋后使用的穩定時間，超過穩定時間時應更換新鮮試劑，保證檢驗結果準確可靠。同時，使用凝血試劑時要根據本室每天工作量選擇試劑包裝量大小，適量配制，既保證質量，又避免試劑剩余浪費。

[參考文獻]

[1] 孫磊. 討論凝血四項標本放置時間和溫度對測定結果的影響[J]. 中國醫藥指南，2013，10（11）：267-268.

[2] 諸越瑾，張梅，聶渝瓊. 凝血實驗檢測的影響因素探討[J].中國衛生檢驗雜志，2013，23（4）：903-904.

[3] 張志源. 凝血功能檢測影響因素的觀察[J]. 檢驗醫學與臨床，2012，19（8）：427-428.

[4] 戴慶忠，覃瑜. 影響凝血四項檢測的因素分析[J]. 國際檢驗醫學雜志，2013，34（17）：2349-2350.

[5] 楊繼明，張愛華，肖中華，等. 標本采集量對凝血項目檢測結果的影響[J]. 實驗與檢驗醫學，2011，15（1）：736-737.

[6] 楊海英，韓桂玲. 妊娠中晚期婦女凝血四項的監測與分析[J]. 山西醫藥雜志，2012，41（10）：1049-1050.

[7] 趙晶，葛存興，張鳳俠. 孕婦臨產前（38周后）凝血四項檢查結果及分析[J]. 中國實用醫藥，2010，5（3）：82.

[8] 張永愛，付林金. 凝血試驗的室內質量控制[J]. 實驗與檢驗醫學，2011，32（2）：148-149.

[9] 馬海玲，劉方鶴，等. 凝血四項檢測應注意的問題[J]. 黑龍江醫藥，2012，25（2）：309-310.

[10] 申衛和，黃倩. 凝血四項標本室溫條件下不同時間檢測對結果的影響[J]. 海南醫學，2012，23（4）：87-88.

[11] 李濟凱，吳建平，徐根云. 標本放置溫度及時間對PT、APTT檢測結果的影響[J]. 浙江檢驗醫學，2009，9（7）：22-24.

[12] Mischke R，Junker J，Deegen E. Sensitivity of commercial prothrombin time reagents to detect coagulation factor deficiencies in equine plasma[J]. The Veterinary Journal，2006，171（1）：69-70.

[13] 王潤琴，李美英，楊海青. 25℃室溫下不同保存時間對凝血功能的影響[J]. 山西職工醫學院學報，2011，21（1）：13-14.

[14] 劉志鋒，張耀輝，李雯麗. 標本離心時間對凝血四項檢測結果的影響[J]. 檢驗醫學與臨床，2013，10（12）：1535-1536.

（收稿日期：2014-05-16）endprint

[摘要] 目的 探討CA7000血凝儀試劑盤上試劑使用時間對測定結果的影響。 方法 將試劑放置CA7000血凝儀試劑盤上，之后在不同時間點（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）對同一混合血漿進行凝血酶原時間（PT）、部分活化的凝血活酶時間（APTT）、凝血酶時間（TT）、纖維蛋白原（FIB）測定。 結果 測定結果顯示試劑放置試劑盤后8 h時的TT結果、12 h時的APTT結果、18 h時的FIB結果、36 h時的PT結果分別與0 h時的結果比較，差異有統計學意義（P<0.05）。結論 在日常工作中，CA7000血凝儀試劑盤上放置試劑的穩定時間不同，根據不同穩定時間配置相應的試劑用量，避免剩余試劑失效而造成浪費。

[關鍵詞] CA7000血凝儀；凝血四項；穩定時間

[中圖分類號] R446.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）28-0054-03

隨著醫學科學技術的發展，各種全自動凝血儀和商品化試劑盒已廣泛應用于臨床實驗室。在日常工作中，我們發現同一標本不同時間段測定結果差異較大[1]。經分析可知，引起結果差異較大的因素較多，包括標本的處理與保存、儀器的狀態、試劑的溶解與保存以及試劑的使用時間等[2，3]。其中，試劑開蓋后的使用時間是影響檢驗結果的重要因素之一。為了保證測定結果的準確性，分析希森美康CA7000全自動凝血儀試劑盤上凝血試劑使用時間對測定凝血四項（PT、APTT、TT、FIB）結果的影響，我們對其進行探討，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 CA7000 全自動血凝儀，由日本Sysmex 公司生產。

1.1.2 試劑 PT試劑批號1008655；APTT試劑批號1006171；TT試劑批號1009181；FIB試劑批號1006081；以上試劑由上海長島生物技術有限公司提供。配套質控血漿由Sysmex 公司提供。

1.1.3 標本篩選正常血漿標本（排出藥物、肝素、DIC及有相關疾病的標本，且避免溶血、脂血、黃疸），然后從每份標本中吸取血漿混勻，制作混合血漿，分裝8份后于-20℃凍存[4]（確保血漿成分穩定，每份不少于5 mL[5]）。

1.2 方法

試劑及質控血漿按要求復溶，再把試劑放置儀器試劑倉中，做好保養和質控，保證儀器處于最佳狀態，每次檢測前先按要求復溶一份凍存標本待檢。在擬訂的不同時間點（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）進行凝血四項檢測，記錄測定結果。每一時間點測定一份標本，重復測定8次，結果以（x±s）表示。

1.3 統計學方法

采用SPSS 16.0統計學軟件進行數據處理，不同時點重復計量資料采用方差分析，每一時間點測定結果與0 h的結果進行配對t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

試劑放置CA7000試劑盤上不同時間段（0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、18 h、24 h、36 h）結果比較，見表1。

3 討論

凝血四項為臨床常用的指標，用于術前篩查、出血疾病的診斷、抗凝藥物使用的檢測以及妊娠婦女分娩風險監測[6]等，人體的止血功能很關鍵，每當在人體受到意外情況受傷而流血時，止血功能就起到了非常關鍵的作用，使得血液能夠凝固從而及時堵住傷口使其不再繼續流血，減少了血量的過度流失[7]。如果患者的止血功能有欠缺，并且沒有能夠得到及時有效處理，就可能造成患者的生命危險。

凝血試驗所用試劑是根據不同反應而加入不同的凝血因子，均為生物制劑，容易受環境因素影響而降低其生物活性，甚至因失去活性而喪失引起凝血反應的能力[8]。影響凝血四項測定結果的因素很多，包括：儀器的精密度和重復性，試劑盒的配置和保存，樣本的采集、處理、保存與分離，藥物的干擾等[9]。相關研究也比較多，如標本放置溫度[10，11]、試劑預熱時間[12，13]等研究。但關于開蓋后試劑使用一段時間而影響穩定性方面的研究比較少。在日常工作中，我們發現同一定值標本不同時間段測定結果差異較大。雖然試劑說明書中有試劑復溶后的密閉保存穩定時間，但沒用試劑敞開使用的穩定時間，且各實驗室的溫濕度和使用方式不盡相同，試劑開蓋后的穩定時間也會不同[14]。

本文通過對CA7000血凝儀試劑盤上試劑敞開使用的穩定時間進行研究，從表1可以看出，凝血試劑敞開使用8 h時的TT結果、12 h時的APTT結果、18 h時的FIB結果、36 h時的PT結果分別與0 h時的結果比較有顯著性差異（P<0.05）。結果表明，由于環境溫度、濕度的影響，試劑在CA7000試劑盤上敞開使用的穩定時間是不同的，PT、APTT、TT、FIB的穩定時間分別是36 h、18 h、12 h、24 h，超過穩定時間的試劑不能使用，否則誤導臨床。

通過本次實驗，我們可以確定本室凝血試劑開蓋后使用的穩定時間，超過穩定時間時應更換新鮮試劑，保證檢驗結果準確可靠。同時，使用凝血試劑時要根據本室每天工作量選擇試劑包裝量大小，適量配制，既保證質量，又避免試劑剩余浪費。

[參考文獻]

[1] 孫磊. 討論凝血四項標本放置時間和溫度對測定結果的影響[J]. 中國醫藥指南，2013，10（11）：267-268.

[2] 諸越瑾，張梅，聶渝瓊. 凝血實驗檢測的影響因素探討[J].中國衛生檢驗雜志，2013，23（4）：903-904.

[3] 張志源. 凝血功能檢測影響因素的觀察[J]. 檢驗醫學與臨床，2012，19（8）：427-428.

[4] 戴慶忠，覃瑜. 影響凝血四項檢測的因素分析[J]. 國際檢驗醫學雜志，2013，34（17）：2349-2350.

[5] 楊繼明，張愛華，肖中華，等. 標本采集量對凝血項目檢測結果的影響[J]. 實驗與檢驗醫學，2011，15（1）：736-737.

[6] 楊海英，韓桂玲. 妊娠中晚期婦女凝血四項的監測與分析[J]. 山西醫藥雜志，2012，41（10）：1049-1050.

[7] 趙晶，葛存興，張鳳俠. 孕婦臨產前（38周后）凝血四項檢查結果及分析[J]. 中國實用醫藥，2010，5（3）：82.

[8] 張永愛，付林金. 凝血試驗的室內質量控制[J]. 實驗與檢驗醫學，2011，32（2）：148-149.

[9] 馬海玲，劉方鶴，等. 凝血四項檢測應注意的問題[J]. 黑龍江醫藥，2012，25（2）：309-310.

[10] 申衛和，黃倩. 凝血四項標本室溫條件下不同時間檢測對結果的影響[J]. 海南醫學，2012，23（4）：87-88.

[11] 李濟凱，吳建平，徐根云. 標本放置溫度及時間對PT、APTT檢測結果的影響[J]. 浙江檢驗醫學，2009，9（7）：22-24.

[12] Mischke R，Junker J，Deegen E. Sensitivity of commercial prothrombin time reagents to detect coagulation factor deficiencies in equine plasma[J]. The Veterinary Journal，2006，171（1）：69-70.

[13] 王潤琴，李美英，楊海青. 25℃室溫下不同保存時間對凝血功能的影響[J]. 山西職工醫學院學報，2011，21（1）：13-14.

[14] 劉志鋒，張耀輝，李雯麗. 標本離心時間對凝血四項檢測結果的影響[J]. 檢驗醫學與臨床，2013，10（12）：1535-1536.

（收稿日期：2014-05-16）endprint